色
,此反应是二氢黄酮类化合物的专属反应。 12.4、与碱反应
试液变黄色,可能含二氢黄酮、黄酮醇等黄酮类化合物。棕黄色,空气氧化变褐色:有黄酮醇类或查耳酮。4%氢氧化钠反应,棕色,有黄酮类化合物。 12.5、铝盐反应
取样品提取液5 mL,加入0.3mL 5% NaNO2,充分混匀,混匀后静置5min,加入0.3mL 10% Al(NO3)3,混匀后静置6min,加入2mL1 mol/L NaOH,混匀,静止10min。可观察到有砖红色的颜色产生,表明提取液中有黄酮类物质。黄色:有黄酮类化合物。 12.6、浓氨水反应
提取物乙醇溶液点在滤纸上,置于浓氨水上方30 s, 紫外灯下观察, 显黄色荧光斑点。棕黄色,有黄酮类化合物。 12.7、1%三氯化铁反应
蓝色:黄酮类化合物。 12.8、1%醋酸铅反应
黄色沉淀:黄酮类化合物。 12.9、浓硫酸反应
橙色:黄酮类化合物。 12.10、熔点测定
取提取的莲子心黄酮样品,经多次重结晶提纯,测其熔点230℃~230.5℃。 12.11、红外光谱图的比较
取精制的黄酮样品和黄酮(芦丁)对照品,溴化钾压片法绘制红外光谱图。测试条件:扫描范围4000cm-1~400cm-1;分辨率4cm-1,扫描次数32 13、总黄酮提取量即得率和提取率计算 13.1、总黄酮提取量即得率计算
Y= C×V1×(V2/V3)/m
式中,Y 为黄酮含量(mg/g),C为测定液黄酮浓度(mg/mL),V1为测量时定容 的体积(mL),V2为提取液体积(mL),V3为测量时取液体积(mL),m 为提取时原料质量(g)。
总黄酮得率X(%)=n×C×V/m×100%
式中:n为提取液稀释倍数;C为提取液中总黄酮浓度,mg/mL;V为提取液体积,mL;
m为果渣的重量,mg;X总黄酮得率。 P =C ×V ×n/W ×V1 ×103 ×100
式中:P—总黄酮类物质含量, g/100 g;C—从回归方程计算得样品中黄酮类物质质量, mg;n—稀释倍数;V —浓缩液的体积, mL;V1 —测定体积, mL;W—投料量, g。 13.2、总黄酮提取率计算
提取率= [提取的总黄酮质量/原料质量×原料中总黄酮含量] ×100% 14、单因素试验
14.1、乙醇体积分数的影响
取样品1g 左右,分别加入0%、10%、20%、30%、40%、50`%、70%、80%、90%、100%的乙醇溶液,在100℃条件下快速萃取法提取5min,测定提取液黄酮含量,并计算得率。 14.2、不同提取温度
取样品1g,乙醇体积分数60%,分别20℃、30℃、40℃、50℃、60℃、70℃、80℃、90℃、100℃于用快速萃取法提取5min,测定提取液黄酮含量,并计算得率。 14.3、不同提取时间
取样品1g,乙醇体积分数60%,在100℃分别快速萃取30min、60min、90min、120min、150min、180min,测定提取液黄酮含量,并计算得率。 14.4、不同粒度
取样品1g,乙醇体积分数60%,分别于20目、40目、60目、80目、100目、120目用快速萃取法提取5min,测定提取液黄酮含量,并计算得率。 14.5、提取次数
取样品1g,乙醇体积分数60%,在100℃快速萃取1 0mi n ,分别萃取1 、2 、3 、4 、5次,测定提取液黄酮含量,并计算得率。 14.6、料液比
取样品1g,乙醇体积分数60%,分别于1:10、1:20、1:30、1:40、1:50、1:60、1:70、1:80用快速萃取法提取5min,测定提取液黄酮含量,并计算得率。 15、超声波提取总黄酮
15.1、乙醇溶液浓度对总黄酮提取的影响 15.2、超声温度对总黄酮提取的影响 15.3、超声时间对总黄酮提取的影响 15.4、料液比对总黄酮提取的影响