微生物的培养与应用
一．书本知识梳理 实验原理 目的要求 材料用具 方法步骤 二．思维拓展
培养基配制步骤：称量，溶化，调PH，培养基分装，加棉塞，包扎。 灭菌与消毒：前者常见有高压蒸气灭菌法，火焰灼烧灭菌法等，其理化性质变化剧烈，是指杀死一定环境中所有微生物的细胞芽孢和孢子。后者理化性质变化温和，指杀死表层有害物，主要是有害病原体和微生物营养体。
高压蒸气灭菌法杀菌效力强的原因：湿热穿透力强，空气中有潜热存在，蛋白质容易凝固。 关键操作原由：
培养基分装与调酸碱度要在灭菌前否则会造成培养基污染 培养基分装要趁热否则培养基变成固体不好分装
培养基高度不能超过试管的五分之一否则搁置斜面时会占到棉塞，影响透气性污染培养基
培养基分装后要用普通棉塞比脱脂棉好，因为容易透气
灭菌时要用牛皮纸包住试管，可防止冷凝水润湿棉塞影响透气性污染培养基 接种操作要在火焰旁因为那里形成一个无菌区
对木屑培养基灭菌要进行第二及第三次加热是为了杀死芽孢彻底灭菌 分装平菇培养基时要用木棒钻洞，因为它是需氧型微生物，钻洞能增加底部氧气含量，促进基内菌丝生长
接种划线要注意(1)划线方向应该从里向外（2）线条要细而密（3）不要重复划线
三．跟踪训练 1．下表为蛋白质含水量与其凝固温度的关系，有关叙述不正确的是 （ ） 蛋白质的含水量％ 50 25 18 6 0 蛋白质凝固温度 56 74~80 80~90 145 160~170 灭菌时间min 30 30 30 30 30 A. 蛋白质与其凝固温度成反比。 B. 在一定温度下，湿热灭菌比干热灭菌的效果好 C. 高温能引起蛋白质发生不可逆的变性。 D. 高温能改变蛋白质中氨基酸的排列顺序. 2. 下列关于平菇培养技术的叙述中,不合理的是( ) A. 棉紫壳培养基属于天然固体培养基,但是必须加入适量水. B 分装培养基时，需要木棒钻洞，以利于菌丝生长繁殖 C 对培养基进行高压灭菌时，应使压力维持在98KPa左右加压20MIN D 待菌丝张出后，应保持适宜的温度和较大的湿度 3搁置斜面最佳温度是（ ） A.30℃ B.40℃ C.50℃ D.60℃ 4．分装培养基高度应为试管高度的（ ） A.1/2 B.1/3 C. 2/3 D.1/5 5高压蒸汽灭菌时的正常压力是（ ） A.49 kPa B.98. kPa C.980 kPa D.89kPa 6.细菌培养基通常在121℃压力锅中灭菌，若只是在100℃下灭菌，以下那一种生物还会存活（ ） A .大肠杆菌 B.青霉菌 C枯草芽孢杆菌 D沙门杆菌 7多数真菌最适PH为（ ） A.5.0~6.0 B.6.0~7.0 C.4.0~5.0 D.3.5~4.5 8细菌培养实验中使用滴定法调整PH时，滴入液体是（ ） A,HCL B.NaOH C.水 D.琼脂 9要从多种细菌中分离某种球形细菌，培养基要用（ ） A.加入青霉素的培养基 B加入高浓度食盐的培养基 C固体培养基 D液体培养基 10（多选）在培养基配制中下列那些操作是正确的（ ） A趁热将培养基装到洁净试管中，培养基高度是试管的1/5 B在溶化过程中的最后阶段要补加蒸馏水至100ml C在调PH时,要随时使用PH测定PH D试管加塞后，每10支用绳捆扎好，就可以进行灭菌 11(多选)下列关于灭菌和消毒的理解中正确的是（ ） A灭菌是指杀死一定环境中所有微生物的细胞芽孢和孢子 B消毒和灭菌实质上是相同的 C接种环用烧灼法灭菌
D常用灭菌方法有加热法、过虑法、紫外线法、化学药品法
12（多选）通过选择培养基可以从混杂微生物群体分离出所需微生物，在缺乏氮源的培养基上大部分微生物无法生长；在培养基中加入青霉素可以抑制细菌和放线菌；在培养基中加入10％酚可以抑制细菌和霉菌。利用上述方法能从混杂的微生物群体分离出
A大肠杆菌 B霉菌 C放线菌 D固氮细菌
13、生产谷氨酸等食品添加剂离不开发酵。请就谷氨酸发酵回答下列问题
（1）谷氨酸棒状杆菌的代谢类型是 （2）若从自然界分离得到的样品中含有谷氨酸棒状杆菌、固褐固氮菌、金黄色葡
萄球菌、酵母菌等，现欲筛选出酵母菌，则简便的方案是
（3）一定容积的培养液中进行谷氨酸发酵，C/N之值为3/1时，活菌数可保持最大；pH呈酸性时，发酵产物是乙酰谷氨酰胺，这些事实说明
（4）为测定谷氨酸棒状杆菌的生长，某同学设计了如下步骤：
配置适宜培养基，分装到5个锥形瓶中，用缓冲液分别调pH为4.0，4.5, 5.0, 5.5
6.0,分别标号Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ ；将每瓶培养基等量分装到3支试管中，加棉塞包扎，每捆试管外挂上相应的标签；在酒精灯上加热煮沸10MIN后冷却；无菌条件下接种等量菌种；37度恒温箱中培养24小时；测定每管中谷氨酸的产量；计量、统计并分析结果。上述步骤中有三个明显错误，请指出并改正。 a b c 14下面是最早发现抗生素－青霉素的 佛来明的探索过程：
观察及对问题的认识：培养细菌过程中，在青霉菌周围没有其它细菌生长。为什么出现这种情况？ 假
设
：
______________________________________________________________。
进行实验：把青霉菌放在培养液中培养后，观察这些培养液对细菌生长的影响。 结果：培养液阻止了细菌的生长和繁殖。
结论：_____________________________________________________________ （1）作为该实验的假设最恰当的是（ ）
A青霉菌能产生有利于人类的物质 B青霉菌污染了细菌生长的培养基 C青霉菌可能产生了有利于细菌繁殖的物质 D青霉菌可能产生了不利于细菌繁殖的物质 （
2
）
结
论
是
_____________________________________________________________ （3）青霉菌和细菌的关系是_____________________________________。 （4）为了证明青霉菌确实是由青霉菌产生的，而不是培养液和培养基中其它微生物产生的，应进一步设计 实验，其实验方法是____________________________________
。
若
实
验
结
果
为： ，则能证明青霉菌确实能产生可阻止细菌繁殖的青霉素。
（5）最初使用较少青霉素杀菌效果较好，而现在药效不明显了，这是因为：
。 其
根
本
原
因
是
。 答案：
选择题：DCCDBCABC;ABC;ACD;BCD.
13.(1)异氧需氧型（2）在培养基中加入青霉素或无氧条件下培养(3)环境条件的变化不仅影响菌种的生长繁殖，而且会影响菌种代谢产物的形成（4）PH为4.0, 4.5,
5.0,5.5,6.0;在酒精灯上加热煮沸10min;改正：6.5,7.0,7.5,8.0,8.5;在98kpa下高压蒸汽灭菌20min；测定菌体的细胞数目或测重量后再计算出细胞的总重量。
最新人教版选修1高中生物专题2《微生物的培养与应用》导学案(1)
