高中生物实验总结
实验一 观察DNA和RNA在细胞中的分布
1.实验原理: 利用甲基绿和吡罗红混合染色剂将细胞染色,可以显示DNA和RNA在细胞中的分布;甲基绿和吡罗红对DNA和RNA的亲和力不同: 甲基绿+DNA→绿色
吡罗红+RNA→红色
2.分布:真核生物DNA主要分布在细胞核
中;
线粒体和叶绿体内也含有少量的DNA; RNA主要分布在细胞质中。
3.实验结果: 细胞核呈绿色,细胞质呈红色.
4.实验结论:DNA主要分布在细胞核中;RNA主要分布在细胞质中;
5.实验流程:
(1)取口腔上皮细胞制片:①载玻片上滴一滴质量分数为:%NaCl溶液; ②漱口后,用消毒牙签刮口腔内壁后放在载玻片的液滴
中涂抹几下;
③载玻片在酒精灯上烘干,盖上;
(2)水解:①载玻片放入盛有30ml质量分数为8%的HCl的小烧杯中; ②大烧杯中加入30℃温水;
③将小烧杯放入大烧杯中保温5min;
(3)冲洗涂片:用蒸馏水的缓水流冲洗载玻片10s; (4)染色:①吸水纸吸去载玻片的水分;
②滴两滴混合染液,染色5min; ③吸去多余的染液,盖上盖玻片; (5)观察:先低倍后高倍; 6、几种液体在实验中的作用:
(1)%NaCl溶液:保持口腔上皮的正常形态。
8%的HCl:①改变细胞膜等的通透性; ②使染色质中的DNA与蛋白质分开。 蒸馏水:配置染液;冲洗载玻片。 (2)混合染液需要现配现用;
(3)该实验不宜用深色的材料,避免颜色对实验的干扰。 实验二、 物质鉴定
一、实验原理:还原糖 + 斐林试剂~砖红色沉淀(水浴加热)
脂 肪 + 苏丹III ~橘黄色 (滴液观察或制片显微镜观察) 脂 肪 + 苏丹IV~ 红色
蛋白质 + 双缩脲试剂 ~紫色反应 (不加热)
1、还原糖的检测
(1)材料的选取:还原糖含量高,白色或近于白色,如:苹果,梨,白萝卜。 (2)试剂:斐林试剂(甲液:mL的NaOH溶液,乙液:mL的CuSO4溶液),现配现用。
(3)步骤:取样液2mL于试管中→加入刚配的斐林试剂1mL(斐林试剂甲液和乙液等量混合均匀后再加入)→水浴加热2min左右→观察颜色变化(白色→浅蓝色→砖红色)
操 作 方 法 注 意 问 题 解 释 1. 制备组织样液。 苹果或梨组织液必须临因苹果多酚氧化酶含量高,组织液很易被氧化成褐色,将产生的颜色掩盖。 (去皮、切块、研磨、时制备。 过滤) 2. 取1支试管,向试管内注入2mL组织样液。 3. 向试管内注入1mL新制的斐林试剂,振荡。 应将组成斐林试剂的甲斐林试剂很不稳定,液、乙液分别配制、储存,甲、乙液混合保存时,使用前才将甲、乙液等量生成的Cu ( OH ) 2在混匀成斐林试剂; 70~ 900C下分解成黑切勿将甲液、乙液分别加色CuO和水; 入苹果组织样液中进行检测。 甲、乙液分别加入时可能会与组织样液发生反应,无Cu OH生成。 4. 试管放在盛有50-650C温水的大烧杯最好用试管夹夹住试管防止试管内的溶液冲上部,使试管底部不触及出试管,造成烫伤; 中,加热约2分钟,观烧杯底部,试管口不朝向缩短实验时间。 察到溶液颜色:浅蓝色 实验者。 → 棕色 → 砖红色(沉淀) ★模拟尿糖的检测
也可用酒精灯对试管直接加热。 1、取样:正常人的尿液和糖尿病患者的尿液
2、检测方法:斐林试剂(水浴加热)或班氏试剂或尿糖试纸
3、结果:试管内发生出现砖红色沉淀的是糖尿病患者的尿液,未出现砖红色沉淀的是正常人的尿液。
4、分析:因为糖尿病患者的尿液中含有还原糖,与斐林试剂发生反应产生砖红色沉淀,而正常人尿液中无还原糖,所以没有发生反应。 2、脂肪的检测
(1)材料的选取:含脂肪量越高的组织越好,如花生的子叶。
(2)步骤: 制作切片(切片越薄越好)将最薄的花生切片放在载玻片中央 ↓
染色(滴苏丹Ⅲ染液2~3滴切片上→2~3min后吸去染液→滴体积分数50%的酒精洗去浮色→吸去多余的酒精) ↓
制作装片(滴1~2滴清水于材料切片上→盖上盖玻片) ↓
镜检鉴定(显微镜对光→低倍镜观察→高倍镜观察染成橘黄色的脂肪颗粒)
操 作 方 法 注 意 问 题 解 释 因为浸泡时间短,不易切花生种子浸泡、去皮、切下干种子要浸泡一些子叶薄片,将薄片放在3~4小时,新花生片;浸泡时间过长,组织载玻片的水滴中,用吸水纸的浸泡时间可缩吸去装片中的水。 短。 较软,切片不易成形。切片要尽可能薄些,便于观察。 在子叶薄片上滴2~3滴苏丹染色时间不宜过Ⅲ或苏丹Ⅳ染液,染色1分长。 钟。 用吸水纸吸去薄片周围染液,用50%酒精洗去浮色,吸去酒精。 酒精用于洗去浮色,不洗去浮色,会影响对橘黄色脂肪滴的观察。同时,酒精是脂溶性溶剂,可将花生细胞中的脂肪颗粒溶解成油滴。 用吸水纸吸去薄片周围酒精,滴上1~2滴蒸馏水,盖上盖玻片。 滴上清水可防止盖盖玻片时产生气泡。 低倍镜下找到花生子叶薄片装片不宜久放。 时间一长,油滴会溶解在的最薄处,可看到细胞中有染成橘黄色或红色圆形小颗粒。 3、蛋白质的检测
(1)试剂:双缩脲试剂(A液:mL的NaOH溶液,B液:mL的CuSO4溶液) (2)步骤:试管中加样液2mL→加双缩脲试剂A液1mL,摇匀→加双缩尿试剂B液4滴,摇匀→观察
操 作 方 法 注 意 问 题 解 释 乙醇中。