利用质谱技术鉴定人肝癌细胞表面自然呈递的MAGE-A3表位

利用质谱技术鉴定人肝癌细胞表面自然呈递的MAGE-A3

表位

彭吉润;董南;刘虎威;冷希圣

【期刊名称】《中华外科杂志》 【年(卷),期】2007(045)009

【摘要】目的 鉴定人肝癌细胞系HLE细胞表面自然呈递的1条HLA-A2限制性MAGE-A3抗原表位FLWGPRALV(MAGE-A3271-279).方法 用高效液相色谱仪(HPLC)及液-质联用仪对人工合成多肽FLWGPRALV进行鉴定,明确该多肽的HPLC出峰时间和质谱信号特征,并确定这两种仪器对该多肽的检测下限.以弱酸洗涤法从HLE细胞表面洗脱出由主要组织相容性抗原复合物(MHC)分子自然呈递的抗原多肽,用HPLC纯化分馏,根据人工合成多肽的出峰时间,收集该出峰时间前后2 min的馏分,低温冻干后以液-质联用仪进行鉴定,明确其中是否存在MAGE-A3271-279抗原多肽.结果 经纯化的多肽洗涤样品经液-质联用仪检测,可获得一个(m/z)2为529.9的双电荷质谱信号,对其碰撞诱导解离谱图进一步分析,证明其序列(自N端至C端)为FLWGPRALV,相对分子质量为1058.4 Da,与MAGE-A3271-279抗原多肽相符,说明样品中存在低丰度的目的抗原多肽.结论 可以从人肝癌细胞系表面直接分离、鉴定出可被HLA-A2分子自然呈递的MAGE-A3表位多肽,提示MAGE-A3271-279抗原多肽在肝癌免疫治疗中具有潜在应用价值.

【总页数】3页(595-597)

【关键词】癌,肝细胞;表位,T淋巴细胞;肽类 【作者】彭吉润;董南;刘虎威;冷希圣