槲皮素微乳凝胶制备及体外透皮研究

槲皮素微乳凝胶制备及体外透皮研究

张煜炯，朱玉竹，胡 英

【摘 要】摘要:目的 制备槲皮素微乳凝胶，并对其性能及透皮效果进行研究。方法 根据已优化的槲皮素微乳的处方并将微乳制成凝胶，采用Franz扩散池对槲皮素微乳凝胶的体外透皮情况进行考察。结果 从体外透皮实验可见，与槲皮素混悬液凝胶比较，槲皮素微乳凝胶的体外透过量明显增加(P＜0.05)。结论 槲皮素微乳凝胶的制备工艺可行，且能促进槲皮素的透皮转运量。 【期刊名称】安徽医药 【年(卷),期】2012(016)008 【总页数】3

【关键词】关键词:槲皮素;微乳;凝胶;体外透皮

槲皮素(quercetin)是一种天然多活性的黄酮类化合物，在膳食中分布广泛，也是许多中草药的有效成分［1］。已有研究结果表明:槲皮素具有抗病毒、抗氧化、抗辐射、抑制多种肿瘤细胞的增殖、逆转肿瘤细胞的多药耐药等多种药理作用［2］。槲皮素局部皮肤给药可以减少因紫外引起的皮肤损伤作用，对紫外线损伤NIH3T3细胞的具有保护作用，是通过清除细胞内的活性氧自由基，维持细胞的线粒体膜电位，抑制细胞凋亡［3］。然而，由于槲皮素不溶于水，必须寻求一种合适的剂型才能达到作用的目的。

微乳(microemulsion，ME)，也称纳米乳(nanoemulsion)，粒径为10～100 nm，由水、油、表面活性剂和助表面活性剂组成的一种流动、透明、热力学稳定、各向同性的液体［4］。微乳虽为药物的优良载体，但微乳较低的粘度使其在外用透皮制剂中受到一定的影响，单独使用微乳制剂时，很难使药物在皮肤

表面滞留较长的时间，因此给药的剂量就会受到影响，从而导致影响药物的实际应用。通过提高微乳的粘度，增加其皮肤表面的粘附性，将有利于药物的经皮渗透。凝胶剂是一种新型的剂型，它能在较长的时间内与药物紧密粘附，使其在静置时保持一定的形态，在外力作用下又可以流动、变形［5］。因为亲水性的凝胶手感好，易洗脱，不污染衣物，故研究较多。本实验将槲皮素制成微乳凝胶剂可提高其透皮量且体外稳定，有望开发槲皮素透皮给药制剂。

1 仪器与材料

1.1 仪器 THZ-C恒温振荡箱(江苏海门麒麟医用仪器厂);AL204型电子天平(梅特勒-托利多仪器有限公司，上海);SB25-12D超声波清洗机(宁波新芝生物科技有限公司);Zetasizer Nano激光衍射粒度分析仪(马尔文仪器有限公司，英国);Advantage系列超纯水机(美国PALL公司);TK-12 B型透皮扩散试验仪(上海楷凯科技贸易有限公司);高效液相色谱仪(U3000，美国戴安)。

1.2 试药 槲皮素原料(山西慧科植物开发有限公司，含量＞98%，批号101118);槲皮素对照品(Sigma公司，批号:113k1051);聚氧乙烯蓖麻油(Cremophor EL BASF，德国，批号:33636WO);卡波姆-940(上海医药工业研究院，批号:20100208);正丁醇(上海试剂化学有限公司，批号:1007243);油酸乙酯(上海试剂化学有限公司，批号:1004152);吐温80(浙江龙游县化工试剂厂，批号:20100705);丙三醇(浙江杭州双林化工试剂厂，批号:20100401);无水乙醇(潥阳市光源工贸有限公司，批号:20100705);色谱纯甲醇(天津市四友精细化学品有限公司，批号:334042-06657)，其他试剂均为分析纯。

1.3 实验动物 SD大鼠雌雄各半(SCKK(浙)2003-0001)(浙江省实验动物中心)。

2 方法与结果

2.1 槲皮素微乳和槲皮素混悬液的制备 根据文献［6］，空白微乳:在室温条件下将油酸乙酯、Cremophor EL、正丁醇按(10∶54∶36，w/w)比例充分混合，形成均匀的互溶体系，在搅拌的条件下缓慢滴加处方量的纯化水，既得。 槲皮素微乳:在室温条件下取上述制得的空白微乳1 ml，在搅拌的条件下加入20 mg槲皮素原料，使其完全溶解，即得透明的淡黄色的微乳。

槲皮素混悬液:在室温条件下取磷酸盐缓冲液(PBS，pH=7.4)1 ml，在搅拌的条件下加入20 mg槲皮素原料，即得淡黄色的混悬液。

2.2 凝胶剂的制备 取0.2 g卡波姆，加适量纯化水使其溶胀。溶胀后，滴加入0.2 g Tween-80，2 ml甘油，取上述制备好的槲皮素微乳或槲皮素的PBS混悬液，加入溶胀的凝胶中，搅拌均匀，用适量三乙醇胺调节pH至7.0，加水至20 g。

2.3 槲皮素含量的测定［7］

2.3.1 色谱条件 色谱柱:Acclaim120(250 mm×4.6 mm，5 μm);流动相:甲醇-磷酸盐缓冲液(60∶40)(磷酸盐缓冲液由4 ml H3PO4+2 ml三乙胺 +1 L的超纯水组成);柱温:25℃;流速:1.0 mL·min-1;检测波长:373 nm;进样量:10 μl。采用外标法计算槲皮素含量。

2.3.2 标准曲线的绘制 精密称取槲皮素对照品20.0 mg，用适量的甲醇溶解，并定容至200 ml，制得0.1 g·L-1的槲皮素对照品储备液。精密吸取对照品储备液适量，用甲醇稀释成质量浓度分别为 2.0，5.0，10.0，20.0，30.0 和 50.0 mg·L-1的系列标准溶液，分别进样 10 μl，以质量浓度 C(mg·L-1)为横坐标，峰面积A为纵坐标回归，得标准曲线为:A=0.943 2C-0.059 3(r=0.999 98)。表明在 2.0 ～50.0 mg·L-1浓度范围内，呈良好线性关系。