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这些抗凝原理你真的了解吗? 抗凝管为防止血液凝固,经过抗凝剂处理过的试管。用于医疗,生物实验等方面。医院用于抽血的抗凝管,不同颜色代表不同的用途,及所含不同的抗凝剂,但其中的抗凝原理你都知道吗?
通常长用的抗凝管中的抗凝剂有:
1.乙二胺四乙酸(EDTA)盐 EDTA有二钠、二钾和三钾盐。 2.肝素
3.枸橼酸钠 4.草酸钠
1肝素
肝素广泛在肺、肝、脾等几乎所有组织和血管周围肥大细胞和嗜碱性粒细胞的颗粒中。它是一种含硫酸基团的粘多糖,是分散物质,平均分子量为15000(2000-40000)。肝素可加强抗凝血酶III(AT-Ⅲ)灭活丝氨酸蛋白酶,从而具有阻止凝血酶形成,对抗凝血酶和阻止血小板聚集等多种作用。每毫升血液抗凝需要持素15±2.5IU 。尽管肝素可以保持红细胞的自然形态,但由于其常可引起白细胞聚集在染色时产生蓝色背景,因此肝素抗凝血不适全血液学一般检查。肝素是红细胞透渗脆性试验理想的抗凝剂。 抗凝机制:
肝素是血液化学成分测定中最好的抗凝剂。肝素是一种含硫酸基团的黏多糖,分子量为1.5万,其抗凝机制是与抗凝酶Ⅱ一起,在低浓度能抑制因子Ⅸa、Ⅷ和PF3之间的作用,并能加强抗凝血酶Ⅲ灭活丝氨酸蛋白酶,从而阻止凝血酶形成;还有抑制凝血酶的自我催化及抑制因子X的作用。
肝素的盐类有钠、锂、铵盐。通常用肝素抗凝的剂量是10.0~12.5IU/mL血液。临床常用肝素锂,虽其价格较贵,但抗凝效果较好。某些生化成分在血清和肝素抗凝的血浆中有明显的区别。在凝血过程中由于红细胞的溶解破坏使血清钾的含量比血浆为
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高,由于血浆中含有Fg,其含量比血清高。因此,测定钾离子时,注意血清与血浆之间的差异。
另外肝素过量可引起白细胞聚集和血小板减少,故不适于白细胞分类和血小板计数,更不能用于止血学检验。通过试验表明,采血时加入肝素钠抗凝剂后,对测定血液中总蛋白质含量结果有较明显的影响。但加入了抗凝剂后,阻断了凝血活酶的生成,阻止了血液凝固,导致纤维蛋白原不能水解转化成纤维蛋白单体,有效阻止了纤维蛋白单体的形成,这些纤维蛋白原仍留在血浆中。而血清是血液经凝固后,纤维蛋白原水解转化为纤维蛋白单体,并因凝固而消耗,离心后随血细胞一并分离出去了。
2乙二胺四乙酸盐
乙二胺四乙酸(EDTA)盐 EDTA有二钠、二钾和三钾盐。均可与钙离子结全成螯合物,从而阻止血液凝固。EDTA盐对红、白细胞形态影响很小,血细胞计数用EDTA二钾作抗凝剂,用量为EDTA-K2。EDTA-NA与EDTA-K2对血细胞计数影响均较小,但二钠溶解度明显低于二钾,有时影响抗凝效果,其他抗凝剂不适合于血细胞计数。
抗凝机制:
EDTA是临检工作中最常用和最重要的抗凝剂和试剂之一,其机制是通过与水相中的钙离子形成稳定的螯合物而阻止血液凝固。EDTA的盐类有钾、钠、锂盐、均溶于水,钾盐较钠盐的溶解度大,全血胞计数最好使用EDTA的钾盐。
EDTA能影响某些酶的活性和抑制红斑狼疮因子,故不适于制作组化染色和检查红斑狼疮细胞的血涂片。EDTA还会影响血小板聚集和白细胞吞噬功能,也不适于做止血学检验和血小板功能检验。
用EDTA抗凝血制备的涂片对粒细胞形态有影响,其影响程度与抗凝血放置时间和抗凝剂浓度有关。按照ICSH建议EDTA的使用浓度为1.4~1.6g/L血液,迅速制备涂片,粒细胞形态特征有微小的改变,有时细胞核分叶不见,细胞肿胀。如果用放置时间较长的血液制备的涂片可出现细胞浆内颗粒消失,胞浆和细胞核有空泡,染色质模糊不清。用大于1.5g/L血液浓度制备的血涂片,粒细胞可完全变性,对淋巴细胞和
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单核细胞也有影响,尤其是血小板,可出现肿胀、破裂而产生碎片,影响其计数,造成结果偏高
3枸橼酸钠:
枸橼酸钠(trisodium citrate)枸橼酸盐可与血中钙离子形成可溶性螯合物,从而阻止血液凝固。枸橼酸钠有2Na3C6H5O7。和2Na3C6H5。11H2O等多种晶体。通常用前者配成109mmol/l(32g/l)水溶液(也有用106mmol/l浓度),与血液按1:9或1:4比例使用。枸椽钠对凝血V因子有较好的保护作用,使其活性减低缓,故常用于凝血象的检查,也用于红细胞沉降率的测定。因毒性小,是输血保养液中的成分之一。
抗凝机制:
枸橼酸盐主要用于止血学检验及血沉的测定。因其毒性小,也用于输血保养液中。其抗凝机制是枸椽酸盐与血中钙离子形成可溶性螯合物,从而阻止血液凝固,其反应式为Na3C6H5O7+Ca2+→CaC6H5+3Na+。
枸缘酸钠与血液按1:9使用。对于用于监测口服华法令等抗凝剂治疗的患者,测定PT、APTT所用的枸缘酸钠浓度不应随意改变,因为可能影响到国际标准化比值(INR)。
4草酸钠:
草酸盐是通过其草酸根与血液中的Ca离子形成草酸钙沉淀,使其无凝血功能。
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这些抗凝原理你真的了解吗?
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