吉大《医学微生物学》 （四）
一、采集标本的注意事项有哪些？
1、采集标本时应注意无菌操作，尽量避免杂菌污染；
2、根据致病菌在患者不同病期的体内分布和排除部位，采取不同标本。
如流行性脑脊髓膜炎病人取脑脊液、血液或出血瘀斑；伤寒病人在不同时期取不同材料； 3、采集标本应在使用抗菌药物之前
否则这种标本在分离培养时需要加药物拮抗剂。如使用青霉素的要加青霉素酶；使用磺胺类药物的加对氨苯甲酸。在采取局部病变标本处，不可用消毒剂，必要时用无菌生理盐水冲洗，拭干后再取。
4、标本必须新鲜，采集后尽快送检。
送检过程中，除不耐冷的脑膜炎奈瑟菌、淋病奈瑟菌等要保温外，多数菌可冷藏运送；粪便标本中含杂菌多，常置于甘油缓冲盐水保存液中。 二、简述致病菌的检验程序
1、直接涂片法：凡在形态和染色性上具有特征的致病菌，可直接涂片染色后镜检。 2、分离培养 3、生化试验 4、血清学试验 5、动物试验 6、药物敏感试验
三、简述生物制品的使用及注意事项
1、预防接种的对象：根据发病的年龄、职业、流行地区等确立接种对象。 2、生物制剂接种的途径不同
接种途径可直接影响免疫效果。死疫苗和类毒素接种量大，常用皮下接种：活疫苗接种量小，常采用皮肤划痕、皮内注射、口服及喷雾等；丙种球蛋白、动物免疫血清和抗毒素则采用肌肉注射或静脉滴注。
3、接种剂量、次数及间隔时间
剂量过大或不足都能影响免疫效果。死疫苗接种量大分2-3次接种，每次接种间隔时间根据免疫力形成的快慢而定。伤寒菌苗产生免疫力较快，间隔7-10天；类毒素吸收较慢，间隔3-4周。一般需要1-2年后再接种1次。
4、接种后反应及注意事项
（1）一般反应：接种后引起注射局部红肿、疼痛、附近淋巴结肿大；24h内还可引起发烧、头痛、乏力、恶心、周身不适等全身反应。这些多数由于疫苗中的蛋白质抗原、微生物本身的毒性或防腐剂和佐剂的刺激作用所致。一般不需要治疗，1-2天可恢复正常。
（2）异常反应：利用生物制剂治疗和预防疾病时，在个别人身上可发生较严重的异常反应。引起超敏反应或超敏反应性疾病；接种麻疹疫苗偶尔可引起变态反应性脑炎；接种卡介苗引起粟粒性结核（免疫缺陷者）
（3）应用生物制品的禁忌症
1）凡有高热、严重心血管疾病、高血压、肝炎、肾炎、糖尿病、活动性肺结核、活动性风湿病、甲状腺机能亢进、免疫缺陷或正在应用免疫抑制剂的患者，均不宜预防接种；
2）孕妇不宜接种，以防流产或早产； 3）妇女月经期要暂缓接种；
4）湿疹和皮肤病患者不宜划痕接种。 四、葡萄球菌属的抗原结构有哪些？
1、葡萄球菌A蛋白（staphylococcal protein A，SPA）：
存在于菌细胞壁的一种表面蛋白。SPA是一种单链多肽，与细胞壁肽聚糖呈共价结合，但有1/3分泌于胞外。90%以上的金黄色葡萄球菌有SPA，所有人源菌株均有，但不同菌株间相差悬殊。SPA是完全抗原，具有属特异性。
2、荚膜：
宿主体内的大多数金黄色葡萄球菌表面存在着荚膜多糖，有利于细菌粘附到细胞或生物合成材料表面，如生物性瓣膜、导管、人工关节等。
3、多糖抗原：
具有群特异性，存在于细胞壁。A群多糖抗原从金黄色葡萄球菌中提出，化学组成为磷壁酸中的N-乙酰葡糖核糖醇残基。B群多糖抗原分离自表皮葡萄球菌，化学组成是磷壁酸中的N-乙酰葡糖甘油残基。
4、抵抗力
葡萄球菌对外界因素的抵抗力强于其它无芽胞菌，干燥浓汁、痰液中存活2-3个月；加热60℃1h或80℃30分钟才杀死；2%石炭酸中15分钟或1%升贡中10分钟死亡；耐盐性强，在含
10-15%Nacl的培养基中仍能生长。同其他G+菌一样对碱性染料敏感。如1:100000-200000的龙胆紫溶液可抑制其生长。
五、葡萄球菌的致病物质有哪些？
1、酶：凝固酶、纤维蛋白酶、耐热核酸酶、透明质酸酶、酯酶等。 2、毒素：细胞毒素、表皮剥脱毒素、毒性休克综合征毒素-1、肠毒素等； 3、其他：粘附素、荚膜、胞壁肽聚糖等。 六、链球菌属的抗原结构有哪些？
1、蛋白质抗原或称为表面抗原：具有型特异性，位于C抗原外层。A群链球菌有M、 T 、R和S不同性质的蛋白质，与致病性有关的是M抗原。
2、多糖抗原或称C抗原：系群特异性抗原，是细胞壁的多糖组分，可用稀盐酸等提取。 3、核蛋白抗原或称P抗原：无特异性，各种链球菌均相同，并与葡萄球菌有交叉。 七、链球菌的致病物质有哪些？ 1、链球菌溶素 2、致热外毒素
3、透明质酸酶（扩散因子） 4、M蛋白
5、链激酶（streptokinase；SK）：也称链球菌溶纤维蛋白酶。 6、链道酶（streptodornase，SD）：也称链球菌DNA酶。 7、F蛋白
八、简述链球菌制热外毒素的作用： 1、对家兔有致热性和致死作用；
2、能使动物对内毒素休克的敏感性增加10万倍左右；
3、对培养的脾细胞和巨噬细胞有毒性；
4、能改变血脑屏障通透性，直接作用于下丘脑而引起发热反应等。 5、链球菌致热外毒素有时也会导致毒性休克综合征。
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