D. 克隆小鼠时,需将供体细胞核移植至减数第二次分裂中期的次级卵母细胞中
18. 在DNA测序工作中，需要将某些限制酶的限制位点在DNA上定位，使其成为DNA分子中的物理参照
点，这项工作叫做“限制酶图谱的构建”。假设有以下一项实验：用限制酶HindⅢ、BamHⅠ及两者的混合物分别降解一个4 kb(1 kb即1千个碱基对)大小的线性DNA分子，降解产物分别进行凝胶电泳，在电场的作用下，降解产物分开，如甲图所示。据此构建这两种限制酶在该DNA分子上的“限制酶图谱”如乙图（B、D为酶切位点，A、C为降解产物的长度），请判断图乙中相关的标注正确的是
A. 2.8
B. HindⅢ
C. 0.3
D. BamHⅠ
19. 如图是利用基因工程培育抗虫植物的示意图。以下相关叙述,正确的是
A. ②的构建需要限制性核酸内切酶和DNA聚合酶参与 B. ③侵染植物细胞后,重组Ti质粒整合到④的染色体上 C. ④的染色体上若含抗虫基因,则⑤就表现出抗虫性状 D. ⑤只要表现出抗虫性状就表明植株发生了可遗传变异 20. 如图为蛋白质工程操作的基本思路，下列叙述不正确的是
A. 代表蛋白质工程操作思路的过程是④⑤ B. 代表中心法则内容的是①②
C. ①代表转录,②代表翻译,④代表分子设计,⑤代表 DNA合成
D. 蛋白质工程的目的是对基因的结构进行分子设计,通过基因合成或改造实现．
二、多选题（本大题共5小题，共15.0分）
21. 下图1表示的是某DNA分子上的一些限制性内切酶的酶切位点。用XhoI和SalI两种限制酶分别处理该
DNA分子，经电泳分离结果如图2。以下叙述正确的是
A. 所用两种限制性核酸内切酶识别的核苷酸序列可能相同 B. 限制酶通过作用于磷酸二酯键和氢键得到相应产物 C. 根据泳道②电泳示意图可知使用的限制性内切酶为XhoI D. 用两种限制酶同时处理后进行电泳，条带可多于 6条
22. 如图所示为部分双链DNA片段，下列有关基因工程中涉及的酶功能的叙述正确的是
A. 切断a处的酶为限制酶 C. 切断b处的酶为解旋酶
B. 连接a处的酶为DNA连接酶 D. 连接b处的酶为RNA聚合酶
23. 下图表示选用具有同一外源目的基因对某品种奶牛进行遗传特性改造的三种途径，下列有关叙述正确的
是
A. 获得奶牛1通常采用显微注射法导入外源基因 B. 奶牛2体内不同组织细胞的基因组成一定相同 C. 成功获得奶牛1、2、3表明三个受体细胞都具有全能性 D. 奶牛1、2、3的获得均需在体外进行早期胚胎培养 24. 下列关于单克隆抗体的叙述中，正确的是
A. 制备单克隆抗体是动物细胞融合技术最重要的应用 B. 单克隆抗体特异性强、纯度高、产量大、灵敏度高 C. 工业化制备单克隆抗体一般通过体内培养获得
D. 单克隆抗体是由骨髓瘤细胞和效应T细胞形成的杂交瘤细胞产生的 25. 现代生物科学技术中涉及的一些关系，符合集合图所示关系的是
A. ①质粒②载体③ DNA B. ①种群 ②群落 ③生态系统
C. ①植物组织培养②植物体细胞杂交③细胞工程 D. ①动物细胞核移植②动物细胞工程③细胞工程
三、填空题（本大题共8小题，共65.0分）
26. （9分）鸡干扰素是一种具有高效和广谱抗病毒作用的细胞因子，广泛用于动物领域的抗病毒治疗。科
研人员将鸡干扰素基因作为目的基因，构建基因表达载体，通过农杆菌介导法导入烟草，以获得抗病毒烟草。下图为科研人员制备能合成鸡干扰素的烟草愈伤组织细胞的流程，①～④表示相关的操作，两
种限制酶的识别序列及切割位点如表所示。请回答下列问题：
（1）步骤①中，利用PCR技术扩增干扰素基因时，设计引物序列的主要依据是______。科研人员还在两种引物的一端分别加上了_________和__________序列，以便于后续的剪切和连接,一个DNA分子三轮复制以后，含有两种引物的DNA分子有________个．为防止酶切产物自身环化，构建表达载体需用两种限制酶，选择的原则是 ________。 A．Ti质粒内，每种限制酶只有一个切割位点
B．目的基因编码蛋白质的序列中，每种限制酶只有一个切割位点 C．酶切后，目的基因形成的两个黏性末端序列不相同 D．酶切后，Ti质粒形成的两个黏性末端序列相同
（2）步骤②所构建的基因表达载体中未标注出的必需元件还有__________，步骤③中需先用_____处理农杆菌以便将基因表达载体导入细胞。
（3）步骤④中，科研人员提取愈伤组织细胞的RNA后，先通过_______获得DNA，再进行PCR扩增，若最终未能检测出干扰素基因，其可能原因是__________。
27. （7分）下图为单克隆抗体制备流程示意图。
(1)单克隆
抗体制备技术的技术是 和
（2）细胞融合是随机的过程，在HAT培养基中培养，目的是________________。在细胞培养过程中，培养液中需要添加无机盐，但要注意无机盐的______ __，以保证生命活动的正常进行。
（3）为选育出能产生高特异性抗体的细胞，要将从HAT培养基上筛选出的细胞稀释到7～10个细胞/mL，每孔滴入0.1 mL细胞稀释液，其目的是___________________________________。 （4）与一般的血清抗体相比，单克隆抗体的优点是________________。
（5）若用15N标记的氨基酸培养能产生单克隆抗体的细胞，放射性物质在细胞结构中出现的先后顺序是_____________________________________________。
28. （8分）花椰菜易受黑腐病菌的危害而患黑腐病，野生黑芥具有黑腐病的抗性基因。用一定剂量的紫外
线处理黑芥原生质体可使其染色体片段化，并丧失再生能力。再利用此原生质体作为部分遗传物质的供体与完整的花椰菜原生质体融合，以获得抗黑腐病杂种植株。流程如下图。
据图回答下列问题：
（1）过程①所需的酶是______________________。
江苏省苏州市第五中学2018-2019学年高二下学期期中考试生物试题(含答案)
