骨髓问充质干细胞分化为光感受器样细胞的体外诱导和微环境研究

骨髓问充质干细胞分化为光感受器样细胞的体外诱导和微

环境研究

洪玉;徐国兴;

【期刊名称】《中华实验眼科杂志》 【年(卷),期】2013(031)007

【摘要】背景近年来间充质干细胞（MSCs）在眼科方面已成功诱导分化为角膜细胞、视网膜神经节细胞（RGCs）、视网膜神经样细胞等，但诱导成为光感受器细胞及其微环境的研究尚少。目的研究骨髓MSCs（BMSCs）在体外定向分化为光感受器样细胞的可能性及其所需的微环境。方法分别将第2代BMSCs细胞株和视网膜色素上皮（RPE）细胞株进行常规培养和传代，取第4代人BMSCs细胞株及第3代RPE细胞株用于实验。将BMSCs分为诱导组和对照组，诱导组的BMSCs与含有20μg／L碱性成纤维细胞生长因子（bFGF）、20μg／L表皮生长因子（EGF）及20μg／L脑源性神经营养因子（BDNF）的骨髓干细胞培养基（MSCM）及RPE细胞的条件培养液共培养进行BMSCs的诱导分化，而对照组的BMSCs仅用MSCM培养基进行培养，倒置显微镜下观察分化细胞的形态学变化。采用免疫细胞化学法检测RPE细胞诱导BMSCs3、5、7d时细胞中视紫红质蛋白的阳性表达率，以鉴定分化细胞的表型。采用逆转录PCR（RT—PCR）法检测RPE细胞诱导BMSCs5d、7d时细胞中视紫红质和恢复蛋白mRNA的表达情况。结果培养的BMSCs形态均一，呈纺锤形或梭形，RPE细胞形态均一，呈多边形或六边形，细胞内充满色素颗粒，生长良好。诱导后的部分BMSCs呈神经样细胞形态，细胞变圆，突起增长，突起末端可见一级、二级分支，相互间连接呈网状。免疫细胞化学法检测表明，诱导

组细胞诱导后第3、5、7天细胞中可见视紫红质的表达，表达率分别为（5．83±0．29）％、（20．36±0．32）％和（29．80±2．30）％，明显高于对照组的（0．71±0．35）％、（2．56±0．24）％和（2．32±0．42）％，差异均有统计学意义（t3d=41．510，t5d=107．290，t7d=30．036，P〈0．01）。RT—PCR法检测显示，诱导后5d、7d诱导组细胞中视紫红质和恢复蛋白mRNA表达的灰度值均明显高于对照组，差异均有统计学意义（视紫红质mRNA：t5d=103．506，t7d=122．584，P〈0．01；恢复蛋白mRNA：t5d=106．674，t7d=189．992，P〈0．01）。结论采用含bFGF、EGF及BDNF的条件培养基与RPE细胞培养液体外共培养后BMSCs能够诱导锌zp甫非成辱晏呈碰纲腧 【总页数】5页(P.659-663)

【关键词】问充质干细胞;骨髓;诱导分化;光感受器样细胞;微环境;条件培养液;视紫红质;恢复蛋白 【作者】洪玉;徐国兴; 【作者单位】;; 【正文语种】英文 【中图分类】R779.13 【文献来源】

https://www.zhangqiaokeyan.com/academic-journal-cn_chinese-journal-experimental-ophthalmology_thesis/0201238780207.html 【相关文献】

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