病毒类疫苗生产与质量控制要求中国食品药品检定研究院生物制品检定所胡忠玉2012.7.18.上海National Institutes for Food and Drug Control病毒类疫苗以病毒或病毒某种抗原成分为原料，可分为：?减毒活疫苗：麻疹、风疹、腮腺炎等遗传重配疫苗：流感减毒活疫苗、小儿轮状减毒活疫苗?灭活疫苗：全病毒颗粒疫苗亚单位疫苗?重重组疫苗：是指基因工程技术使用克隆并表达保护性抗原基因，利用表达的抗原疫苗指基程技术使克隆并表达保护性抗基表达的抗产物或重组体本身制成的疫苗，主要包括亚单位疫苗、载体疫苗、核酸疫苗、基因缺失活疫苗、蛋白工程疫苗等，如重组乙型肝炎疫苗、重组戊型肝炎疫苗新型疫苗：合成肽疫苗、抗独特型抗体疫苗、微胶囊疫苗等National Institutes for Food and Drug Control1病毒性疫苗工艺流程简述三级种子库三级细胞库澄清、过滤（提澄清过滤（提减毒活疫苗取）、配制减毒种子接种培养病毒种子种子细胞病毒收获灭活、纯化、配制灭活疫苗（细胞收获）重组体纯化（灭活）配重组疫苗原代细胞制传代细胞人二倍体细胞National Institutes for Food and Drug Control内容1.灭活疫苗2.减毒活疫苗3.重组疫苗National Institutes for Food and Drug Control2病毒性灭活疫苗优缺点灭活疫苗的优点1、所用生产毒种不必需要减毒或弱毒株；2、必须使用灭活剂灭活病毒；因此，可以灭活可能的外源因子；3、严格的灭活试验验证病毒是否灭活；4、使用者较安全，无活疫苗毒性回复的潜在危险；5、存储和运输相对容易；灭活疫苗的缺点1、在灭活过程中可能破坏或改变有效的抗原决定簇，影响免疫效果；2、生产时的纯化步骤多，较复杂；生产时的纯化步骤多较复杂3、免疫程序较繁复、需多次接种和加强；4、产生免疫效果时间短，不易产生局部免疫；5、抗原量要求大，成本较高；6、某些疾病灭活疫苗不但无效反而有害。National Institutes for Food and Drug Control病毒性灭活疫苗关键点灭活疫苗的关键点：1、生产用病毒种子2、生产用基质细胞或动物3、生产工序和/或步骤4、灭活剂和灭活方法5、纯化方法和纯度要求6、疫苗的添加剂7、单次收获液、原液、半成品和成品的质量和检定8、生产设施和厂房National Institutes for Food and Drug Control3病毒性灭活疫苗关键点1(病毒种子)原始种子原始种子和主种子要求冻干保存于－20℃；病毒种子批系统工作种子可以液体保存于－60 ℃以主种子下，一般不超过下，般不超过2年；建立的台帐实物一致工作种子各种子批标签：1、病毒名称2、代次来源、历史清楚3、数量4、批号鉴别试验验证确定为该病毒5、制备日期病毒增殖滴度达到要求6、病毒滴度免疫原性达到要求从原始种子?主种子?工作种子的传递不超过规定无细菌、真菌和支原体污染无外源因子污染新建的毒株还需要对关键蛋白质的核苷酸序列提出要求National Institutes for Food and Drug Control细胞库原材料?不得使用神经系统来源的细胞；?细胞培养液：不得含有人血清；?胰蛋白酶检测：应证明无细菌、真菌、支原体或病毒污染，特别是检测胰蛋白酶来源的动物可能携带的病毒，如猪细小病毒等；?抗生素：不得使用青霉素或β-内酰胺类抗生素细胞制备的要求?生产人员应定期检查身体；?生产区内不得从事非生产用细胞或微生物的操作；?同一工作日进行细胞操作前，不得操作或接触有感染性的微生物或动物；细胞库的建立及管理?三级库的建立?细胞活性：冻存前的活细胞应不低于90%，复苏后细胞存活率应不低于85%；?主细胞库和工作细胞库应分别存放；?生产用细胞与非生产用细胞严格分开存放；细胞库的检定?细胞鉴别?无菌、支原体检查?内外源病毒因子检查?致瘤性(致瘤性细胞、条件致瘤性传代细胞、活病毒产品的细胞系/株、新建细胞系/株)?必要时：细胞染色体核型National Institutes for Food and Drug Control4病毒性灭活疫苗关键点2-1 生产用基质细胞原代动物细胞原代细胞中国药典（2010年版三部）灭活疫苗的动物细胞应来自封闭式房所地鼠肾细胞内饲养的动物，并须检测与使用动物相沙鼠肾细胞关的特殊病毒鸡胚细胞WHO对地鼠外源病毒检测的要求兔肾细胞pathogenic for hamsters牛肾细胞淋巴瘤病毒乳突淋瘤病毒猴肾细胞多瘤病毒属腺病毒逆转录病毒淋巴细胞脉络丛脑膜炎病毒呼肠孤病毒－3型小鼠肺炎病毒小鼠微小病毒仙台病毒汉滩病毒鼠脊髓灰质炎小鼠肝炎病毒基里姆大鼠SV-5Toolans H-aNational Institutes for Food and Drug Control病毒性灭活疫苗关键点2-2 生产用基质细胞或动物我国目前用原代细胞生产的疫苗：1、乙型脑炎灭活疫苗1乙型脑炎灭活疫苗地鼠2、乙型脑炎减毒活疫苗地鼠3、狂犬病疫苗地鼠4、森林脑炎疫苗地鼠5、肾综合征出血热疫苗地鼠、沙鼠6、麻疹减毒活疫苗鸡胚7、风疹减毒活疫苗兔8、腮腺炎减毒活疫苗、腮腺炎减毒活疫苗鸡胚9、黄热病减毒活疫苗鸡胚10、脊灰疫苗猴11、轮状病毒疫苗牛肾12、流感疫苗鸡胚National Institutes for Food and Drug Control5
病毒性疫苗new - 图文
