（生物科技行业）第八章分子生物学常用技术的原理及其应用及人类基因组学
第八章分子生物学常用技术的原理及其应用及人类基因组学
测试题
一、名词解释 1．分子杂交
2．Southernblotting 3．Northernblotting 4．Westernblotting 5．dotblotting 6．DNA芯片技术 7．PCR 8．功能性克隆 9．转基因技术 二、填空题
1．Southernblotting用于研究 、Northernblotting用于研究 ，Westernblotting用于研究 。
2．PCR的基本反应步骤包括 、 和 三步。
3.在PCR反应体系中，除了DNA模板外，还需加入 、 、 和 。 4．Sange法测序的基本步骤包括 、 、 和 。 5．目前克隆致病相关基因的主要策略有 、 、 。
6．血友病第Ⅷ因子基因的首次克隆成功所采用的克隆策略是 ，而DMD致病基因的克隆所采用的克隆策略是 。
三、选择题 A型题
1.经电泳分离后将RNA转移到硝酸纤维素(NC)膜上的技术是： A．SouthernblottingB．Northernblotting C．WesternblottingD．dotblotting E．insituhybridization
2.不经电泳分离直接将样品点在NC膜上的技术是
A．SouthernblottingB．Northernblotting C．WesternblottingD．Dotblotting E．insituhybridization
3.经电泳分离后将蛋白质转移到NC膜上的技术是 A．SouthernblottingB.Northernblotting C．WesternblottingD．dotblotting E．insituhybridization
4.经电泳后将DNA转移至NC膜上的技术是 A．SouthernblottingB．Northernblotting C．WesternblottingD．Easternblotting E．insituhybridization
5.PCR的特点不包括
A．时间短，只需数小时B．扩增产物量大 C.只需微量模板D．用途非常广泛 E.底物必须标记
6．用于PCR的DNA聚合酶必须
A．耐热B．耐高压C.耐酸D．耐碱E.耐低温 7．PCR反应过程中，模板DNA变性所需温度一般是 A．95?CB．85?CC．75?CD．65?CE．55?C 8．PCR反应过程中，退火温度一般是
A．72?CB．85?CC．75?CD．65?CE．55?C 9.PCR反应过程中，引物延伸所需温度一般是 A．95?CB.82?CC．72?CD．62?CE．55?C 10．PCR反应体系不包括 A.模板DNAB．TaqDNA聚合酶 C.上、下游特异性引物A、BD．ddNTP E．含Mg2+的缓冲液 11．PCR的循环次数一般为
A．5～10次B．10～15次C．15～20次 D．20～25次E．25～30次
12．PCR反应体系与双脱氧末端终止法测序体系不同的是缺少 A．模板B．引物C.DNA聚合酶 D．ddNTPE．缓冲液 13．Sanger法测序不需要
A．Klenow小片段B．引物C.dNTP D．标记dNTPE．ddNTP 14．Sanger法测序的基本步骤不包括 A．标记模板B．模板一引物杂交C．电泳 D．引物的延长与合成阻断E．放射自显影直读图 15．Sanger法测序的四个反应体系中应分别加入不同的 A．模板B．引物C标记dNTP D．DNA聚合酶E.ddNTP
16．人类基因组计划的主要研究内容不包括 A．遗传图分析B．物理图分析C．转录图分析 D.序列图分析E．蛋白质功能分析
17．1996年，英国科学家克隆的Dolly羊所采用的技术是 A．转基因技术B．核转移技术C．基因剔除技术 D．肽核酸技术E.反义核酸技术
18．Maxam—Gilbert法与Sanger法测序的共同点是均需
A.引物B．Klenow大片段C.ddNTP D.化学裂解试剂E．电泳后放射自显影读图
19．Sanger法测序所得直读图像中，由终点至始点所读序列为 A．待测DNA5?到3?的碱基序列 B．待测DNA3?到5?的碱基序列 C．待测DNA互补链3?到5?的碱基序列 D．待测DNA互补链5?到3?的碱基序列 E．引物5?到3?的碱基序列 20．PCR实验的特异性主要取决于：
A．DNA聚合酶的种类B.反应体系中模板DNA的量 C．引物序列的结沟和长度D．四种dNTP的浓度 E.循环周期的次数
21．基因剔除(knockout)的方法主要被用来研究
A．基因的结构B．基因的功能C.基因的表达 D．基因的调控E．基因的突变 22.反义核酸作用主要是
A．封闭DNAB．封闭RNAC．降解DNA D．降解DNAE．封闭核糖体的功能 23．有关Sanger法测序的叙述，不正确的是 A．只需标记一种dNTP
B.一般应去除DNA聚合酶I的5?到3?外切酶活性 C．与dNTP相比阻断剂应尽可能的多 D．反应时间不必太长 E.应采用超薄高压电泳 B型题 (1—5)
A．NorthernblottingB．dotblottingC．Westernblotting D.SouthernblottingE.insituhybridizanon
1.．用限制性内切酶酶切后进行电泳分离，再将DNA转移到NC膜上杂交的技术是 2．电泳分离后将RNA转移至NC膜上杂交的技术是
3．电泳分离后将蛋白质转移至NC膜上，与标记蛋白杂交的技术是 4．不经电泳直接将样品点在NC膜上杂交的技术是 5.在组织切片上直接与探针杂交的技术是 (6—8)
A．95?CB．85?CC．72?CD．65?CE．55?C 6．PCR变性温度一般是 7．PCR退火温度一般是 8．PCR引物延伸温度一般是
(9—12)
A．TaqDNA聚合酶B.反转录酶C．K1cnow大片段D．末端核苷酸转移酶E．Klenow小片段
9．同聚物加尾连接需要 10．PCR需要
11．Sanger法测序需要 12．由mRNA合成cDNA需要 X型题
1.PCR反应体系中含有
A．特异性引物B．Klenow大片段C.dNTP D．ddNTPE．35S-?-dATP 2.PCR技术的反应步骤包括：
A．退火B.复性C.变性D．引物延伸E．引物终止 3．DNA链末端合成终止法反应体系中含有 A．引物B．dNTPC．ddNTP D．35S-?-dATPE．TaqDNA聚合酶 4．DNA链末端合成终止法反应体系中不含有 A．模板B．TaqDNA聚合酶C．ddNTP D．化学裂解试剂E．35S-?-dATP 5．PCR技术可以用于
A．病原微生物的微量检测B．突变基因的筛选 C.法医学鉴定D．DNA序列分析 E．克隆目的基因
6．克隆致病相关基因的策略包括
A．定位克隆B．非定位候选克隆C．功能克隆 D．定位候选克隆E．随机克隆 四、问答题
1．何谓PCR?简述其基本原理、反应体系和主要步骤。 2．简述Sanger法测序的基本原理及大体过程。
3.如果你有翻译活性很高的人酪氨酸酶的mRNA，请设计两个实验以鉴定某个克隆的基因片段是否为酪氨酸酶的基因?
参考答案
一、名词解释
1．在DNA复性时，如把不同DNA分子或DNA与RNA分子放在同一溶液中，只要这些核酸单链分子之间存在一定程度的碱基配对关系，就可在不同分子间形成杂化双链，这种现象称核酸分子杂交。
2．将限制性内切酶酶切电泳后的DNA转移至NC膜上，再与核酸探针杂交的技术。 3．将电泳后的RNA转移至NC膜上，再与核酸探针杂交的技术。
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