[4
]郭玲 , 王丽华 . 同型半胱氨酸与原发性高血压相关性研究 [J ]. 社区医学杂志 , 2008, 6(9 :32-34. [5
]汤 群 , 陆 国 平 , 吴 春 芳 , 等 . 同 型 半 胱 氨 酸 与 叶 酸 、 维 生 素 B 12及维生素 B 6的关 系 [
J ]. 中 华 心 血 管 病 杂 志 , 2004, 32(9 :812- 815. [6
]王宇 . 血浆同型 半 胱 氨 酸 临 床 常 用 检 测 方 法 及 影 响 因 素 [J ]. 检验医学与临床 , 2010, 7(24 :2808-2810. [7
]高静 , 董振南 , 田 亚 平 . 循 环 酶 法 测 定 血 清 同 型 半 胱 氨 酸 的临床应用研 究 [J ]. 中 华 检 验 医 学 杂 志 , 2006, 29(3 :199-
202. [8
]金军英 , 杨晓伟 , 王树清 . 高血压 、 冠心病患者同型半胱氨 酸的测定分析 [J ]. 中国实用医药 , 2008, 3(6 :67-68. [9]周麦菊 , 张健莉 . 158例 青 年 人 脑 梗 死 临 床 分 析 [J ].
中 西 医结合心脑血管病杂志 , 2005, 3(3 :273-274. [10
]尤克 , 陈哲萌 , 杨柳 , 等 . 青年高血压合并脑梗死与高同型 半胱氨酸血症 关 系 的 探 讨 [J ]. 中 国 实 用 神 经 疾 病 杂 志 , 2008, 11(1 :67-
68. [11
]李保华 , 毛利忠 , 王克义 , 等 . 脑梗死与高同型半胱氨酸血 症的相关性研究 [J ]. 中国实用神经疾病杂志 , 2006, 9(1 :8-
10. [12
]赵建荣 , 黄宇玮 , 茆亦一 , 等 . 高血压病患者血浆同型半胱 氨酸与血脂关系研究 [J ]. 大家健康 , 2007, 5(1 :5-6. [13
]庄爱霞 , 刘华 , 葛中 林 . 高 同 型 半 胱 氨 酸 血 症 与 血 管 性 痴 呆相关性研究 [J ]. 脑 与 神 经 疾 病 杂 志 , 2008, 16(3 :200-201.
[14
]马韬 , 熊大迁 , 蔡红蓉 , 等 . 血液同型半胱氨酸测定结果在 相关疾病 中 的 应 用 [J ]. 检 验 医 学 与 临 床 , 2009, 6(14
:1151-
1152. (收稿日期 :2011-05- 18 △
通讯作者 , E -m a i l :d o n g l i a n g c a n g 5856@163. c o m 。 原发性肝癌的分子诊断
董良仓 1综述 , 柴 丽 △ 审校 (1. 河北省三河市燕达国际医院检验科 065201; 2.
河南省 通许县人民医院检验科 475400 【 关键词 】 肝癌 ; 诊断 ; 分子 D O I :10. 3969/j
. i s s n . 1672-9455. 2012. 01. 033文献标志码 :A 文章编号 :1672-9455(2012 01-0060-
03 全世界每年新发 现 的 恶 性 肿 瘤 患 者 约 6
35万 例 , 肝 癌 26万例 , 其中 42. 5%发生 在 中 国 。 肝 脏 原 发 肿 瘤 中 90%以 上 为 恶性肿瘤 , 而原发性肝癌 的 发 病 率 居 肝 脏 恶 性 肿 瘤 之 首 , 是 我 国常见的恶性肿瘤之一 , 其死亡率在消化道肿瘤中占第 3位 , 仅次于胃癌与食管癌 。 近 年 来 , 随 着 分 子 生 物 学 、 细 胞 生 物 学 和人类基因组学 、 蛋白质组学等基础学科向癌症研究领域的延 伸 ,
肝癌分子诊断的研究 取 得 了 长 足 的 进 展 , 下 面 简 单 介 绍 一 下肝癌相关的分子诊断方法和分子诊断要点 。
1 基因相关检测 1. 1 癌症相关基 因 的 检 测 癌 症 相 关 基 因 传 统 上 分 为 癌 基 因 、 抑癌基因 、 肿瘤转移基因 、 肿瘤转移抑制基因 。 在这些基因 中有代表性的基 因 如 P 21、 P 53、 表 皮 生 长 因 子 受 体 、 n m 23、
热 休克蛋白 70等 ,
这些基 因 有 的 直 接 介 导 癌 症 的 发 生 、 发 展 [1]
, 有的可以分泌蛋白 , 作为 癌 症 的 促 进 或 抑 制 因 子 , 有 的 是 作 为 “ 伴侣蛋白 ” 介导癌蛋白 构 象 成 熟 , 影 响 信 号 转 导 , 参 与 肝 细 胞 的恶性转化 。 目前对这类基因的分子诊断方法很多 , 可采用单 链构象多态性分析 (P C R -S S C P 、 核酸杂交技术 、 D N A 测序 、 等 位基因特异性 寡 核 苷 酸 (P C R -A S O
等 方 法 进 行 , 也 可 采 用 各 种印记方法进行相关检测 [ 2]
。 1. 2 基因甲 基 化 的 检 测 D N A 甲 基 化 能 引 起 染 色 质 结 构 、 D N A 构象 、 D N A 稳定性及 D N A 与 蛋 白 质 相 互 作 用 方 式 的 改 变 , 从而控制基因表达 。 D N A 的甲基化对维持染色体的结构 、 染色体的失活 、 基
因印记 和 肿 瘤 的 发 生 、 发 展 都 起 着 重 要 的 作 用 。 D N A 甲基化是 一 种 表 观 遗 传 修 饰 , 它 是 由 D N A 甲 基 转
移酶催化 S -腺苷甲 硫 氨 酸 作 为 甲 基 供 体 , 将 胞 嘧 啶 转 变 为 5-甲基胞嘧啶的一种反应 , 在真核生物 D N A 中 , 5-甲基胞嘧啶是 唯一存在的化学 性 修 饰 碱 基 。 C G 二 核 苷 酸 是 最 主 要 的 甲 基 化位点 , 它在基因组中呈不均匀分布 , 存在高甲基化 、 低甲基化 和非甲基化的区 域 , 在 哺 乳 动 物 中 5-甲 基 胞 嘧 啶 约 占 C 总 量
的 2%~7%[ 3]
。 检测基因甲基化 的 技 术 主 要 有 S s s Ⅰ 甲 基 转 移 酶 转 移 分 析法 , 免 疫 抗 体 分 析 技 术 , 甲 基 化 敏 感 随 机 扩 增 P C R 技 术
(M S P , 高效液相层析 , 探针杂交法 , D N A 微阵列法等 。 有学者采用 M S P 研究肝癌患者 92个基因的甲基化谱 , 发 现 32个基因甲基化频率发生了改变 。 其中肝癌早期相关基因 有硫酸 软 骨 素 蛋 白 多 糖 (C S P G 2、 O X C T 、 周 期 蛋 白 (c y c l i n A 1、 R a s 相关区域家族 1A (R A S S F 1A 等 14个 , 肝癌晚期相关 基因有 D B C C R 1、 P E N K 、 I R F 7、 G S P T 1等 9个 。 部分甲基化基
因可能成为肝细胞癌诊断的潜在分子 [ 4]
。 1. 3 相关病毒的基因检 测 大 量 研 究 发 现 ,
肝 癌 的 发 生 与 乙 型肝炎病毒 (H B V 、 丙 型 肝 炎 病 毒 (H C V 等 病 毒 的 感 染 息 息 相关 , 相当一部分的肝癌都是由这些病毒感染发展而来 , 利用 分子诊断的方法如核 酸 杂 交 、 P C R 、 基 因 芯 片 等 技 术 检 测 这 些 肿瘤相关 病 毒 的 基 因 , 也 可 以 为 肿 瘤 的 诊 断 提 供 参 考 依 据 。 H B V 的 分 子 诊 断 方 法 目 前 主 要 是 以 P C R 为 主 ,
可 采 用 普 通 P C R 、 套 式 P C R 、 荧 光 定 量 P C R 、 竞 争 性 P C R 、 免 疫 杂 交 P C R 等 进 行 H B V D N A 检 测 。 H C V 一 般 是 以 检 测 H C V R N A 为主 。
2 肝癌相关标志物的检测
肿瘤相关标志物可分为两大类 , 即血清肿瘤标志物和细胞 肿瘤标志物 , 血清标志 物 包 括 癌 胚 抗 原 类 、 酶 类 、 激 素 类 、 糖 蛋 白类 , 常见的肝癌 的 血 清 标 志 物 有 甲 胎 蛋 白 (A F P 、 γ-谷 氨 酰
基转移酶 (G G T 、 糖链抗原 125(C A 125 等 。 细 胞 肿 瘤 标 志 物 主要包括癌基因类和 细 胞 表 面 抗 原 类 两 大 类 。 这 类 物 质 在 正 常组织和良性疾病时几乎不产生或产量甚微 , 它反映了肿瘤的 发生 、 发展过程及肿瘤相关基因的激活或失活程度 , 可在肿瘤 患者组织 、 体液 、 排泄 物 中 检 测 出 来 。 此 外 , 在 肿 瘤 的 发 生 、 发 展过程中 , 某些因子特异性低 , 但是与肿瘤的发展相关 , 也可用
·06·检验医学与临床 2012年 1月第 9卷第 1期 L a b M e d C l i n , J a n u a r 2012, V o l . 9, N o . 1
作肿瘤的诊断 [5]。
2. 1 血清学水平上肝癌的诊断标志物 血清学水平肿瘤标志 物的检测方法 , 除传统的放射免疫分析 (R I A 和酶联免疫分析 (E L I S A 外 , 目前在国内主要有三类全自动免疫化学分析系统 (化学发光免疫分析系统 、 荧 光 免 疫 分 析 系 统 和 电 化 学 发 光 免 疫分 析 系 统 广 泛 应 用 于 临 床 , 可 检 测 A F P 、 C E A 、 C A 19-9、 C A 72-4、 C A 125、 C A 15-3、 N S E 、 C y f r a 21-1、 P S A 、 f -P S A 等 血 清 肿瘤标记物 。
A F P 现已广泛应用于肝细胞癌的普查 、 诊 断 、 判 断 治 疗 效 果 、 预测复发 。 肝细胞癌 A F P 阳 性 率 为 70%~90%。 在 生 殖 腺胚 胎 瘤 、 少 数 转 移 性 肿 瘤 如 胃 癌 以 及 孕 妇 、 肝 炎 、 肝 硬 化 等 A F P 可呈假阳性 , 但升 高 不 如
原发性肝癌的分子诊断(精)
