* * * * 制 药 厂 技术标准----质量管理 文件名称 制 订 人 制订日期 制订部门 质管部 人工牛黄质量 标准及内控标准 审 核 人 审核日期 编 码 页 数 批准人 批准日期 TS-ZL-017-00 4-1 实施日期 分发部门 生产车间、供应部、检验室、原辅料仓 目 的：制订人工牛黄质量标准及内控标准。 适用范围：人工牛黄质量标准及内控标准。
责 任：检验室、生产车间、原辅料仓及供应部执行该标准，质管部负责监督该标准的执行。 标 准：
1.品名: 人工牛黄 2.原料编号：Y07 3.法定规格标准:
3.1标准依据：WS3－132（Z－122）－98 3.2内容：
本品为贝斯素、胆酸、猪去氧胆酸、胆红素、胆固醇、无机盐等配制而成。 [性状] 本品为黄色疏松的粉末，味苦，微甘。
[鉴别] （1）取本品适量，分为二份，置点滴板上，一份加硫酸，数分钟后，显污绿色，另一份加硝酸，即显红色。
（2）取本品约100mg置10ml量瓶中，适量溶液超声处理使充分提取后，静置使澄清，用甲醇稀释至刻度，取上清液。作为供试品溶液。另取胆酸、猪去氧胆酸对照品，分别加甲醇制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液。照《薄层色谱法标准操作规程》(SOP-QC-082-00)试验，吸取上述供试品溶液4μl，对照品溶液各2μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以异辛烷－正丁醚－冰醋酸（8：5：5）为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10%磷钼酸的乙醇溶液，于105℃烘约5分钟。供试品色谱中在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。
（3） 取[签别]（2）项下的供试品溶液，另取贝斯素对照品约30mg
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于10ml量瓶中，加甲醇适量超声处理使充分提取后，用甲醇稀释至刻度，静置使澄清，取上清液作为对照品溶液，照《薄层色谱法标准操作规程》(SOP-QC-082-00)试验，吸取上述供试品溶液8μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以冰醋酸－甲苯－水（10：7.5：0.3）为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10%磷钼酸的乙醇溶液，于105℃烘约5分钟。供试品色谱中在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。
（4）取本品约100mg于10ml量瓶中，加水5ml，超声处理使充分提取后，用甲醇稀释至刻度，静置使澄清，取上清液作为供试品溶液，另取贝斯素对照品约30mg置10ml量瓶中，同法处理，取上清液作为对照品溶液照《薄层色谱法标准操作规程》试验。吸取上述供试品及对照品溶液各2μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以正丁醇－冰醋酸－乙醇－水（4：2：1：1）为展开剂，展开，取出，晾干，于105℃烘约10分钟,喷以1%茚三铜乙醇溶液，于105℃烘约5分钟，供试品色谱中，在与对照品包谱相应的位置上，显相同颜色的斑点
[检查] 水分：照《水分测定法标准操作规程》(SOP-QC-085-00)测定，不得过5.0%
猪去氧胆酸：对照品溶液的配制 精密称取猪去氧胆酸对照品适量，用甲醇制成每1ml含1mg的溶液。
供试品溶液的配制 取本品约0.1g，精密称定，置10ml量瓶中，用甲醇稀释至刻度，密塞，振摇，使样品中猪去氧胆酸溶解，放置，取上清液作为对照品溶液。
检查法 照《薄层色谱法标准操作规程》(SOP-QC-082-00)试验，精密量取供试品溶液4μl及对照品溶液2μl，交叉点于同一硅胶G薄层板上，以异辛烷－正丁醇－冰醋酸（8：5：5）为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10%磷钼酸乙醇液，于105℃烘约5分钟，供试品色谱中，猪去氧胆酸斑点的
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颜色应深于或等于对照品色谱的斑点颜色。 [含量测定] 胆酸
对照品溶液的制备 取在105℃干燥至恒重的胆酸对照品12.5mg，精密称定，置25ml量瓶中，加60%冰醋酸溶液使溶解，并稀释至刻度，摇匀，即得（每1ml含胆酸0.5mg）。
标准曲线的制备 精密量取对照品溶液0.2、0.4、0.6、0.8与1.0ml，分别置于带塞试管中，分别加60%冰醋酸溶液稀释成1.0ml，加新配制的糠醛水溶液（1→100）各1.0ml，在冰浴中放置5分钟，精密加入硫酸溶液（取硫酸50ml与蒸馏水65ml混合制成）13ml，混匀，在70℃水浴中加热10分钟，迅速移至冰浴中，放置2分钟，以相应的试剂为空白，照《紫外分光光度法标准操作规程》(SOP-QC-079-00)在605nm波长处测定吸收度，以吸收度为纵坐标，浓度为横坐标，绘制标准曲线。
测定法 取本品约100mg，精密称定，加60%冰醋酸溶液数ml，充分研磨，定量移至50ml量瓶中，再加60%冰醋酸溶液稀释至刻度，摇匀，弃去初滤液，精密吸取续滤液各1ml，分别置于甲、乙两个带塞试管中，于甲管中加新配制的糠醛水溶液1ml，乙管中加水1ml作空白，按标准曲线的绘制项下的方法自“在冰浴中放置5分钟”起，依法测定吸收度。从标准曲线中读出供试品溶液中含胆酸的重量，计算，即得本品中（C24H40O5）胆酸的百分含量。 本品胆酸（C24H40O5）按干燥品计，不得少于13.0%。 （2）胆红素
对照品溶液的制备 取胆红素对照品约100mg，精密称定，置100ml棕色量瓶中，加氯仿80ml超声处理使充分溶解，加氯仿稀释至刻度，作为对照品储备液（0.1mg/ml）精密吸取对照品储备液10.0ml，置50ml棕色量瓶中，加氯仿稀释至刻度，即为对照品溶液（每1ml中含胆红素20μg）
标准曲线的制备 精密吸取胆红素对照品溶液4.0、5.0、6.0、7.0、8.0ml，
GMP认证全套文件资料017-人工牛黄质量标准及内控标准
