非洲猪瘟疫苗研究进展
张丹琳
【期刊名称】广西畜牧兽医 【年(卷),期】2019(035)003 【总页数】5
非洲猪瘟(African swine fever，ASF)是由非洲猪瘟病毒(African swine fever virus，ASFV)引起猪的一种急性、烈性传染病。ASFV是非洲猪瘟病毒科、非洲猪瘟病毒属的唯一成员，是目前唯一已知的虫媒DNA病毒[1]。ASFV基因组为线性的双链DNA分子，根据病毒株的不同其大小约为170～190kb，包含151～167个开放阅读框，可编码150～200种蛋白[2]。ASF的急性临床症状为高热、呼吸急促、全身广泛性出血，死亡率可高达100%，因此，世界动物卫生组织(OIE)将其列为必须报告动物疫病，我国将其列为一类动物疫病。 1921年非洲肯尼亚首次报道ASF疫情，1957年传入葡萄牙并在西班牙、法国、意大利、马耳他、比利时等欧洲国家广泛传播；19世纪70年代ASF传入西半球南美洲及中美洲地区；2007年ASF在高加索地区和俄罗斯联邦暴发；2014年ASF蔓延至东欧多国家并持续流行；2018年8月3日我国辽宁省沈阳市某养殖场发生ASF疫情，这是我国历史上首次暴发ASF疫情[3]。截至2019年3月1日，我国已经确诊111起疫情，其中108起是生猪的疫情，3起是野猪的疫情。我国是养猪大国，养猪数超过世界一半，突如其来的ASF给我国养猪业带来了空前的危机，对我国养猪业、国民经济和国计民生的影响都是非常大的。 由于ASFV基因组可编码的蛋白很多，且基因组变异频繁，抗ASFV感染的免疫机制也复杂，ASFV还可逃避机体的免疫应答，给ASF疫苗研发工作造成很
多困难，至今无有效的ASF疫苗。但是疫苗对于ASF的防控具有重大意义，国内外科学家一直在努力，随着现代技术发展，ASF疫苗的研发取得一定的进展。本文对ASFV免疫机制的认识，ASF灭活疫苗、弱毒疫苗、基因缺失疫苗、DNA疫苗、亚单位疫苗、病毒活载体疫苗的研究进展进行综述，以期为我国ASF疫苗的研发提供参考。
1 对ASFV免疫机制的认识
目前，对抗ASFV感染的免疫机制尚未清楚，使得ASF有效疫苗的研发受到制约。早期实验证明，自然感染或是人工感染ASFV的猪的血清内缺少抗ASFV的中和抗体。最近一些实验表明，p30、p54和p72这些具有高度抗原性的蛋白具有中和病毒的作用，p30对病毒的内化有抑制作用，p54和p72对病毒的吸附有抑制作用[4]，但是p30、p54和p72诱导的抗体没有保护性[5]。有研究表明，ASFV强毒株感染机体可以逃避免疫系统的清除，而弱毒株会激发免疫和炎症反应的细胞信号通路，ASFV感染机体后逃避免疫的能力可能与其毒力强弱有关[6]。ASFV中许多基因参与形成了多种免疫逃避机制。MGF505/530和MGF360蛋白可以抑制干扰素的产生，也抑制干扰素的抗病毒作用[7]，DP71L蛋白可以抑制细胞凋亡[8]，A179L蛋白可以抑制细胞自噬[9]，CD2v蛋白和细胞AP-1蛋白相互作用参与ASFV细胞内转运，CD2v还抑制淋巴细胞产生[10]。这些免疫逃避机制所发挥的作用，使ASFV具有逃避机体免疫系统清除的能力。从感染ASFV后康复的猪中分离的细胞毒性T细胞能够破坏病毒感染的巨噬细胞，表明细胞介导的免疫在免疫过程中起主要作用[11]。当ASFV弱毒株用于免疫接种，细胞免疫反应(特别是CD8+T细胞)被认为是一种重要的保护机制。CD8+T细胞的消耗可阻止之前接种过弱毒ASFV
OURT88/3株的受试动物受到保护[12-13]。DNA疫苗在没有ASFV特异性抗体的情况下可以提供部分免疫保护，这与CD8+T细胞免疫应答有关[14]。用DNA质粒和编码ASFV融合蛋白的杆状病毒载体进行疫苗接种，间接表明了细胞免疫参与了ASFV的攻毒保护。这些疫苗诱导细胞毒性T淋巴细胞反应，并对ASFV的攻毒提供部分免疫保护[15-16]。CD8+T细胞体外增殖反应与抗ASFV感染有关[17]。p30、p72可以诱导细胞毒性T淋巴细胞反应，但是是否具有保护作用尚不清楚[18]。由于体内T细胞的异质性，使得具有保护作用的细胞毒性T淋巴细胞表位的鉴定非常困难。有研究表明，自然杀伤细胞(NK)在抗ASFV感染中也具有重要作用[19]。因此认为体液免疫和细胞免疫相关机制在抗ASFV感染过程中都发挥重要作用。
2 ASF疫苗研究进展
2.1 灭活疫苗
通过病毒灭活制成的灭活疫苗是传统、经典的病毒疫苗。至今，采用多种传统灭活工艺所制备的ASF灭活疫苗并不十分满意，包括ASFV接种的肺泡巨噬细胞悬液制备的疫苗和感染猪的脾组织后匀浆并添加弗氏完全佐剂制备的疫苗，因为猪接种ASF灭活疫苗后机体虽产生特异性抗体，但是无法抵御病毒攻击，起不到有效的免疫保护作用[20]。灭活疫苗具有难以刺激机体免疫系统产生良好的细胞免疫的缺点，随着对ASF的深入研究，科学家希望利用新型佐剂或免疫增强剂提高机体细胞免疫水平，以此增强灭活疫苗的效果[21]。Blome等利用新型佐剂PolygenTM或Emulsigen(?)-D制备ASF灭活疫苗，猪免疫后经强毒攻击，能诱导机体产生ASFV特异性抗体，但仍出现急性临床症状，研究结果表明，添加了新型佐剂的ASF灭活疫苗仍无法提供有效保护力[22]。
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