洋葱伯克霍尔德菌纸片扩散法药物敏感试验标准操作规程 1．目的
规范洋葱伯克霍尔德菌纸片扩散法药物敏感试验标准操作规程，确保药敏结果的准确。 2．适用范围
本操作规程适用于是洋葱伯克霍尔德菌。 3．选药原则
3.1现行版本的CLSI M02和M100对假单胞属细菌纸片扩散法药物敏感试验的要求。
3.2本单位处方手册中的抗菌药物名册。
3.3本单位上一年度洋葱伯克霍尔德菌耐药监控数据。 4．质控
纸片药敏试验应使用大肠埃希菌ATCC25922、大肠埃希菌ATCC35218（用于β-内酰胺/β-内酰胺抑制剂合剂）和铜绿假单胞菌ATCC27853进行质量控制，质控菌株可接受的抑菌圈范围参见现行版本的CLSIM100-A19。 5．试验材料和仪器
M-H培养基，无菌生理盐水，药敏纸片，无菌棉签，35℃孵育箱，测量尺。 6．操作步骤
参见《药物敏感性试验标准操作规程》。 7．判断标准 见表5-49.
表5-49 洋葱伯克霍尔德菌纸片扩散试验判断标准
判断标准（mm） 药 备注
敏感 中介 耐药
头孢他啶（30μg） ≥21 18~20 ≤17 美罗培南（10μg） ≥20 16~19 ≤15 米诺环素（30μg） ≥19 15~18 ≤14 复方新诺明（1.25/23.75μg） ≥16 11~15 ≤10 头孢哌酮/舒巴坦（75/75μg） ≥21 16~20 ≤15
8．注意事项
抑菌圈直径量取的范围为包括药敏纸片在内的被药物完全抑制的区域（肉眼判断）。药敏平板应置于无反光的黑色背景下，用反射光源肉眼观测。测量区域应为肉眼观察无明显可见菌落生长区域，忽略只有用放大镜才能观察到的位于抑菌圈外缘的细菌菌落。测量复方磺胺药敏纸片的抑菌圈时，可忽略微弱的生长区域，而从细菌明显生长处量取抑菌圈直径。
参
考
文
献
敏纸片
[1]CLSI.Performance Testing;Nineteenth
Standards for Antimicrobial
CLSI
Susceptibility
document
Informational Supplement.
M100-S19.Wayne,PA:Clinical and Laboratory Standards Institute,2009
[2] 叶应妩，王毓三，申子瑜主编.全国临床检验操作规程.第三版.南京：东南大学出版社，2006
（倪语星 韩立中）
编写人： AAA、BBB 操作人：本室操作人员 批准人
洋葱伯克霍尔德菌纸片扩散法药物敏感试验标准操作规程
