12. 〔生物—选修3:现代生物科技专题〕下图是绿色荧光蛋白转基因克隆猪的培育过程示意图,请据图同答:
(1)分析可知，科学家获取绿色荧光蛋白基因所运用的限制酶是图中所示的________。最终获得的绿色荧光蛋白基因的末端类型属于_____。构建基因表达载体的目的是_____，基因表达载体的组成含有复制原点、目的基因、启动子、__________。
(2)图示工程中，将重组质粒导入猪胎儿成纤维细胞，常用的方法是__________。
(3)图示中,作为受体细胞的去核卵母细胞一般处在______期，常通过_______(物理方法)进行激活,使其完成减数分裂和发育进程。
【答案】 (1). PstⅠ和EcoRⅠ (2). 黏性末端 (3). 使目的基因在受体细胞中稳定存在并遗传给下一代，同时使目的基因能够表达和发挥作用 (4). 终止子和标记基因 (5). 显微注射法 (6). MⅡ中（减数第二次分裂中） (7). 电脉冲（或电刺激） 【解析】本题主要考查基因工程以及核移植，基本属于识记内容。要求学生熟记基因工程和核移植的操作步骤，以及理解目的基因获取中限制酶的选择方法。
（1）图中所示的限制酶PstI和EcoRⅠ可以切割DNA片段，获取绿色荧光蛋白基因，并不能破坏目的基因．限制酶切割产生的DNA片段末端不平整，即末端为黏性末端。构建基因表达载体的目的是使目的基因在受体细胞中稳定存在并遗传给下一代，同时使目的基因能够表达和发挥作用。基因表达载体的组成含有复制原点、目的基因、启动子、终止子和标记基因。 （2）如图示将重组质粒导入猪胎儿成纤维细胞的过程，因受体细胞为动物细胞，常用的方法是显微注射法。
（3）受体细胞一般取处在MⅡ中（减数第二次分裂中）期的去核卵母细胞作为受体细胞，通过电脉冲（或电刺激）进行激活，使其完成减数分裂和发育进程．
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