酸枣仁中酸枣仁皂苷A、B及斯皮诺素的动态研究*
郭 慧，崔莹莹，焦梦娇，郑玉光
【摘 要】摘 要：建立了PHLC-UVD测定酸枣仁中酸枣仁皂苷A、B及斯皮诺素含量的方法。并对河北省北部地区和中南部地区8个不同采收时间酸枣仁中酸枣仁皂苷A、B及斯皮诺素的含量进行测定。以期为确定河北产酸枣仁最佳采收期提供一些依据。研究发现，不同采收时间酸枣仁中有效成分含量差别很大。结果表明，河北中南部地区酸枣仁的较佳采收期为9月中旬，北部地区为10月中旬；河北中南部产酸枣仁质量较好。 【期刊名称】广州化工 【年(卷),期】2016(044)007 【总页数】3
【关键词】酸枣仁；采收期；高效液相；酸枣仁皂苷；斯皮诺素
酸枣仁为鼠李科植物酸枣[Ziziphus jujube Mill.Var.spinosa(Bunge)Hu ex H.F.Chou]的干燥成熟种子。具有养心补肝，宁心安神，敛汗，生津的功效，用于惊悸多梦，虚烦不眠，体虚多汗，津伤口渴等症[1],为中医首选安神药。现代药理研究表明，酸枣仁具有镇静催眠[2]、降压[3]降脂[4]、抗脂质过氧化[5]、抗心肌缺血[6]、护脑[7]、改善记忆障碍[8]等作用。由于酸枣仁自古以来的良好治疗效果，以及现在人们生活水平提高对养生药物需求的增加，因此市场对酸枣仁这种药食同源品的需求量越来越大，关注度持续上升。
目前药材市场的酸枣仁主要来源于野生品种。由于野生酸枣没有归属权，因此野生酸枣在刚刚结出果实的时候便被当地的村民争相采收，当地称之为“抢青”。“抢青”的酸枣仁较为干瘪，出仁率低，临床疗效不理想。最终导致药
农实际的经济收益降低，影响药农来年的采收积极性，这也是近几年酸枣仁市场价格大幅波动的原因之一。
此外，不同产地的中药质量也有很大差异。由于地形地貌、环境、海拔高度等因素的影响，也会影响酸枣仁质量的差别。目前尚未建立酸枣仁的GAP基地标准，对不同产地的酸枣仁进行质量评价，有助于建立酸枣仁药材的标准化种植及道地药材的质量控制。
由于河北省南北纬度跨度较大，南部和北部地区节气差距较大，因此本课题组对河北南部和北部产酸枣仁有效成分进行动态监测，为确定酸枣仁最佳采收期提供理论依据。
1 仪器和材料
LC-15C高效液相色谱仪，岛津；SPD-15C紫外检测器；MSE125P-100-DU分析天平。
乙腈(色谱纯)，赛默飞世尔科技(中国)有限公司；水为娃哈哈纯净水；其余试剂为分析纯。
酸枣仁皂苷A、B和斯皮诺素对照品(批号分别为110734-200611、110814-200607、111869-201203，购自中国药品生物制品检定所)；酸枣仁供试药材去核、粉碎机粉碎，过60目筛。
2 方 法
2.1 色谱条件
色谱柱为WondasilTM C18柱(250 mm×4.6 mm，5 μm)；乙腈(A)-水(B)为流动相进行梯度洗脱；斯皮诺素的运行时间30 min，0～10 min，12%A～19%A，10～18 min，19%～20%，18 min～30 min，20%～50%；酸枣仁
皂苷A、B的运行时间38 min，0～15 min，20%A～35%A，15～35 min，35%～35%A，35～38 min，35%～70%A；柱温均为25 ℃；流速均为1 mL·min-1；斯皮诺素的检测波长为335 nm，酸枣仁皂苷A和酸枣仁皂苷B的检测波长为204 nm；进样体积10 μL。 2.2 供试品溶液的制备
取酸枣仁样品约5 g，精密称定，加石油醚(60～90 ℃)100 mL，超声1 h，弃去石油醚液，药渣挥去溶剂，转移至250 mL 圆底烧瓶中，加入70%乙醇100 mL，加热回流2 h，滤过，滤渣用70%乙醇25 mL洗涤，合并洗液与滤液。挥干溶剂，残渣加水50 mL溶解并转移至分液漏斗中，用水饱和的正丁醇萃取4次，每次20 mL，合并正丁醇提取液，蒸干，残渣加甲醇溶解，转移至25 mL容量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，取续滤液，即得。 2.3 对照品溶液的制备
分别取斯皮诺素、酸枣仁皂苷A、酸枣仁皂苷B适量，精密称定，加甲醇溶解，定容，摇匀，分别制成对照品溶液，过0.45 μm微孔滤膜，取续滤液。 2.4 系统适用性实验
取供试品溶液10 μL，进行含量测定，要求斯皮诺素、酸枣仁皂苷A、酸枣仁皂苷B的理论塔板数不低于7000，且与其他成分分离良好(见图1、图2)。 2.5 方法学考察 2.5.1 线性关系考察
分别取干燥至恒重的斯皮诺素、酸枣仁皂苷A、酸枣仁皂苷B对照品1 mg定容于5 mL容量瓶，制备成对照品溶液。分别精密吸取斯皮诺素、酸枣仁皂苷A和B对照品溶液2、4、6、8、10、12 μL，在上述色谱条件下进行检测，以
酸枣仁中酸枣仁皂苷A、 B及斯皮诺素的动态研究
