分子生物学期末考试资料
一、名词解释（ 8/16）
1、靶标鸟枪法： 用稀有限制性内切核酸酶先将待测基因组降解为长度几十万个碱基对的片 段；再分别进行测序；或者根据染色体上已知基因或遗传标签的位置来确定部分 DNA 片段 的排列顺序；逐步确定各片段在染色体上的相对位置。 P447
2、蛋白质免疫印迹： 是根据抗原抗体的特异性结合检测复杂样品中的某种蛋白的方法。该 法是在凝胶电泳和固相免疫测定技术基础上发展起来的一种新的免疫生化技术。 P239
3、反密码子： 是位于 tRNA 反密码环中部、可与 mRNA 中的三联体密码子形成碱基配对的 三个相邻碱基。 P123
4、感受态细胞： 用理化方法人工诱导细胞；使之处于易于吸收和容纳外源 DNA 分子的状 态。 P175 5、 冈崎片段：是在DNA半不连续复制中产生的长度为 1000~2000个碱基的短的DNA片段； 能被连接形成一条完整的 DNA链。P471
6、 基因敲除：针对一个序列已知但功能未知的基因；从 该基因的功能或消除其表达机制；从而推测该基因的生物学功能。
DNA水平上设计实验；彻底破坏
P472
7、 基因芯片：将大量DNA或cDNA探针固定于支持物表面；然后与标记的待测核酸样品进 行杂交；通过检测杂交信号对样品核酸进行分析。 P228
8基因组DNA文库：是某一生物体全部或部分基因的集合。将某个生物的基因组 DNA或c DNA 片段与适当载体在体外重组后；转化宿主细胞；所得的菌落或噬菌体的集合即为该生 物的基因文库。 P473 9、 克隆：把外源DNA插入具有复制能力的载体 DNA中；使之得以永久保存和复制；这种 过程称为克隆。 P190
10、 连锁图：是指基因或DNA标志在染色体上的相对位置与遗传距离。
P435
—
11、 免疫共沉淀技术： 当细胞在非变性条件下被裂解时；完整细胞内存在的许多蛋白质 蛋白质间的相互作用被保留下来。 P221
12、 启动子：DNA链上一段能与RNA聚合酶结合并起始 mRNA合成的序列。P74
13、 RFLP ： 是指基因型之间限制性片段长度的差异；这种差异是由限制性酶切位点上碱 基的插入、缺失、重排或点突变所引起的。 P193
14、 SD序列：mRNA中用于结合原核生物核糖体的序列。
P96
15、 图位克隆法： 是分离未知性状目的基因的方法。首先通过构建遗传连锁图；将目的基 因定位到某个染色体的特定位点；并在其两侧确定紧密连锁的分子标记。再通过对不同生 态型个体的大量限制性内切核酸酶和杂交探针的分析；找出与目的基因距离最近的分子标 记；通过染色体步移技术将位于这两个标记之间的基因片段分离并克隆出来。最后；根据 基因功能互补原理鉴定目的基因。 P475 16、转座子： 是存在于染色体 DNA 上可自主复制和位移的基本单位。
P62
二、填空题
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三、简答题（ 5/10） 8分
1简述孟德尔、摩尔根和 Watson等人对分子生物学发展的主要贡献。
P18
答：孟德尔的主要贡献在于他通过豌豆实验；发现了遗传规律、分离规律及自由组合规律 ；摩尔根的主要贡献在于发现染色体的遗传机制；创立染色体遗传理论；成为现代实验生 物学奠基人；沃森和克里克在
1953年提出DAN反向平行双螺旋模型。
2、原核生物 DNA 具有哪些不同于真核生物 DNA 的特征？ P33
答：真核生物：①、真核基因组庞大。②、存在大量的重复序列。③、大部分为非编码序
列 （＞90 ％）。
④、转录产物为单顺反子。⑤、是断裂基因；有内含子结构。⑥、存在大 量的顺式作用元件（启动子、增强子、沉默子）。⑦、存在大量的DNA多态 性。⑧、具有端粒结构。
原核生物：①、基因组很小；大多只有一条染色体；且
DNA含量少。
② 、结构简练：原核 DNA分子的绝大部分是用来编码蛋白质；只有非常小的一 部分不转录；这与真核 DNA 的冗余现象不同。
③ 、存在转录单元：原核生物 DNA序列中功能相关的 RNA和蛋白质基因；往往 丛集在基因组的一个或几个特定部位；形成功能单元或转录单元；它们可被一 起转录为含多个 mRNA的分子；称为多顺反子 mRNA。 ④ 、
有重叠基因：重叠基因；即同一段 DNA能携带两种不同蛋白质信息。主要有以 下几种情况
a、一个基因完全在另一个基因里面；
对是重叠的。
b、部分重叠；c、两个基因只有一个碱基
3、什么是SNP ？ SNP作为第三代遗传标记的优点是什么？ P66
答：SNP即单核苷酸多态性；指基因组 DNA序列中由于单个核苷酸的突变而引起的多态性
优点：⑴、SNP数量大；分布密集；（2）、SNP比STR扩增更可靠；不会产生假带； 易
于自动化批量检测；易于计算机分析结果。
（3）、
4、真核与原核生物基因转录有哪些差异？ P93
3种以
答：（ 1）、只有一种 RNA 聚合酶参与所有类型的原核生物基因转录；而真核生物有
上的 RNA 聚合酶来负责不同类型的基因转录；合成不同类型的、在细胞核内有不同定位的 RNA 。 （2）、转录产物有差别。原核生物的初级转录产物大多数是编码序列；与蛋白质的氨基酸 序列呈线性关系；而真核生物的初级转录产物很大；含有内含子序列；成熟的 mRNA 只占 初级转录产物的一小部分。 （3）、原核生物的初级转录产物几乎不需要剪接加工；就可直接作为成熟的
mRNA 进一步
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行使翻译模板的功能；真核生物转录产物需要经过剪接、修饰等转录后加工成熟过程才能 成为成熟的
mRNA 。
（4）、在原核生物细胞中；转录和翻译不仅发生在同一个细胞空间里；而且这两个过程几 乎是同步进行的；蛋白质合成往往在
mRNA刚开始转录时就被引发了。真核生物 mRNA的
合成和蛋白质的合成则发生在不同的空间和时间范畴内。
5、什么是 RNA 编辑？其生物学意义是什么？ P108 答： RNA
编辑是指某些RNA特别是mRNA前体经过插入、删除或取代一些核苷酸残基等操作；导致
DNA所编码的遗传信息的改变；使得经过编辑的
。
mRNA序列发生了不同于模版 DNA的变化
生物学意义：（1）、校正作用：有些基因在突变的途中丢失的遗传信息可能通过
一种方式；（ 3）、扩充遗传信息：能使基因产物获得心得结构核功能；有 利于生物的进化。
RNA的
编辑得以恢复；（ 2）、调控翻译：通过编辑可以构建或去除其实密码子和终止密码子；是 基因表达调控的
6、蛋白质有哪些翻译后的加工修饰？其作用机制和生物学功能是什么？ 答：①、N端fMet或Met的切除
P144
细菌蛋白质氨基端的甲酰基能被脱甲酰化酶水解；不管是原核生物还是真核生物； 端的甲硫氨酸往往在多肽链合成完毕之前就被切除。 ② 、二硫键的形成
N
mRNA 中没有胱氨酸的密码子；而不少蛋白质都含有二硫键；这是蛋白质合成后通过 两个半胱氨酸的
氧化作用生成的。二硫键的正确形成对稳定蛋白的天然构象具有重要的作 用。 ③ 、特定氨基酸的修饰
氨基酸侧链的修饰作用包括磷酸化、糖基化、甲基化、乙酰化、泛素化、羟基化和羧 基化等。 ④ 、切除新生肽链中的非功能片段
由多个肽链及其他辅助成分构成的蛋白质；在多肽链合成后还需经过多肽链之间以及 多肽链与辅基之间的聚合过程；才能成为有活性的蛋白质。
7、试述 PCR 扩增的原理和步骤。 P177
答：原理：首先将双链DNA分子在临近沸点的温度下加热分离成两条单链 DNA分子；DNA 聚合酶以单链
DNA为模板并利用反应混合物中的四种脱氧核苷三磷酸、合适的
实验中提供的引物序列合成新生的 DNA分子。
Mg2+浓度和
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