肺癌病理应用支气管冲洗细胞块免疫组化染色的诊断分析
奚剑敏
【摘 要】摘要 目的:分析研究应用支气管冲洗细胞块免疫组化染色在肺癌病理诊断中的价值。方法:选择2014年3月—2016年11月收治的支气管冲洗液阳性患者118 例,在液基薄层细胞学检查(TCT)检测基础上,制作细胞块,HE切片及免疫组化SP法染色处理,对比分析两种方法的诊断结果。结果:细胞块及免疫组化法分型检出率为85.6%,明显高于TCT检测法的58.5%,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:支气管冲洗细胞块免疫组化染色在肺癌病理诊断中具有较高的应用价值。 【期刊名称】临床医药实践 【年(卷),期】2018(027)002 【总页数】3
【关键词】关键词 肺癌;病理;支气管冲洗;细胞块;免疫组织化;染色;诊断
肺癌是临床较常见的恶性肿瘤,近几年,随着医疗水平的不断提升,肺癌诊治朝着新的阶段迈进[1]。2011年2月,国际肺癌研究学会联合多家学会机构,对肺腺癌分类提出了新的意见。其中,针对非小细胞肺癌,需利用免疫组化进行区分,为药物治疗提供依据。过去细胞诊断中针对分化差的癌,仅仅以小细胞癌与非小细胞癌进行区分,致使临床需求无法得到满足[2]。近年来,诸多专家与学者开始致力于对支气管冲洗细胞块免疫组化染色的研究。支气管冲洗细胞块指支气管刷细胞冲洗液,免疫组化指应用免疫学基本原理——抗原抗体反应,即抗原与抗体特异性结合的原理,借助化学反应,使标记抗体的显色剂(荧
光素、酶、金属离子、同位素)显色,确定组织细胞内抗原(多肽和蛋白质),并对其进行定位、定性及相对定量的研究。为分析肺癌病理应用支气管冲洗细胞块免疫组化染色的诊断价值,检测了118 例支气管冲洗液液基细胞学检查阳性患者,报告如下。
1 资料与方法
1.1 一般资料
选择2014年3月—2016年11月本院收治的118 例支气管冲洗液液基细胞学检查阳性患者(分型明确与不明确均有涉及),其中男71 例,女47 例,年龄(60.3±10.67) 岁。 1.2 方法 1.2.1 仪器
采用由安必平医药科技有限公司提供的SC-3612程控低速离心机与XK96-4E微量振荡器。 1.2.2 方法
液基薄层细胞学检查(TCT)制片:取等量的支气管冲洗液和安必平公司支气管TCT保存液,均放置于保存瓶中,混合均匀,添加1 mL黏液稀释液至10 mL混合液中,搁置30 min后,将混合液放于振荡器上,给予10 s振动处理,取10 mL混合液转移至12 mL离心管内,以1 832 r/min为标准,离心10 min,将上清液倒掉,添加5 mL缓冲液,混合均匀后,以1 832 r/min为标准,离心5 min,再次将上清液倒掉,振荡细胞块30 s。随后,在玻片上涂抹细胞黏附剂,放于制片染色板上,将制片染色舱扣上。借助微量移液器,在离心管中添加800~1 000 μL缓冲液,混合均匀。在染色舱中添加200~400 μL样本,
等待8~10 min,倾出样本。给予巴氏染色处理后,进行光学树脂湿式封片。成功制片后,将剩余沉渣放至瓶内,以供备用。制备液基细胞块、HE切片与免疫组织化(IHC)染色:取10 mL剩余混合液,放置于离心管内,以1 832 r/min为标准,离心10 min,将上清液倒掉,再次添加混合液,并重复上述操作,直到用完混合液,并将上清液倒掉。对于蕴含多种血性成分的样本,可添加5 mL保存液,混合均匀,离心后,将上清液倒掉。随后,添加2 mL 95%乙醇至离心管中,添加醇溶性伊红染色1 滴,20 min后,固定液倒掉,取沉渣块,用擦镜纸包裹,置于浓度为10%的中性甲醛固定液中。基于常规组织取材的前提下,一同给予自动脱水处理,包埋后,制作为细胞块。以3 μm为标准,将细胞块切成9 张,用制备的防脱载玻片捞片、烘片,一张做HE染色,其余8 张备用。Ki-67、TTF-1、CK7、Syn、CD56、p63、CK5/6、Naspin-A为IHC选用的抗体。通过Max Vinsion快捷免疫组化SP法,进行染色处理,其中,PBS替代一抗,作为空白对照,而阳性对照以已知阳性组织为准。阅片:由2 名高年资病理医师阅片。TTF-1、p63、Ki-67细胞核中可见棕黄色颗粒,表示为阳性。CK7、CK5/6、Syn、CD56、NapsinA细胞质或膜(CD56)中可见棕黄色颗粒,表示为阳性。 1.3 统计学方法
采用SPSS20.0系统软件,计数资料以百分率表示,采用χ2检验,计量资料以表示,采用t检验,P<0.05为差异有统计学意义。
2 结 果
2.1 诊断结果
对比分析两种方法诊断结果,细胞块及IHC法检出率明显高于TCT检测法,差