阶段质量检测（五） DNA和蛋白质技术
(时间：60分钟；满分：100分)
一、选择题(每小题2.5分，共50分)
1．(2018·湖南名校月考)对“DNA的粗提取与鉴定”实验的叙述，正确的是( )
A．利用DNA能溶而蛋白质不溶于冷酒精溶液，可将DNA与蛋白质分离B．在用菜花作实验材料时，研磨过程中加入食盐的目的是瓦解细胞膜C．在DNA滤液中加入嫩肉粉，通过木瓜蛋白酶的作用，可提高DNA纯度
D．利用DNA在0.14 mol/L NaCl溶液中溶解度最大的特点，可将DNA与杂质分离
解析：选C DNA不溶于冷酒精，蛋白质可以；加食盐的目的是溶解DNA；DNA在0.14 mol/L NaCl溶
液中溶解度最小。
2．以下对DNA粗提取与鉴定实验的分析正确的是( )
A．可用猪血细胞来做实验
B．在DNA的粗提取与鉴定实验中，有两次析出DNA，所依据的原理相同
C．在实验中要进行除杂处理，以便得到较纯净的DNA
D．将析出的DNA溶解在2 mol/L的NaCl溶液中，加入二苯胺试剂后呈现蓝色
解析：选C 猪血细胞中主要是成熟的红细胞，而其成熟红细胞中无细胞核，所以不能用于提取DNA；提取DNA时，第一次析出DNA是利用DNA在0.14 mol/L的NaCl溶液中的溶解度最低的原理，第二次则是利
用DNA不溶于冷酒精的原理；DNA遇二苯胺要沸水浴加热才能变蓝。
3．以下对PCR技术操作过程的叙述，正确的是( )A．PCR扩增DNA时必须使用解旋酶和Taq DNA聚合酶
B．PCR过程中引物的作用是保证新链的合成方向为3′端→5′端C．在95 ℃、55 ℃和72 ℃的温度下，Taq DNA聚合酶都有活性D．高压灭菌的微量移液器枪头每吸取一种试剂后不需要更换
解析：选C PCR技术中通过高温解旋，因此不需要解旋酶；新链合成的方向是5′端→3′端；Taq DNA
聚合酶耐高温，所以在上述三个温度下该酶均有活性；微量移液器枪头每吸取一种试剂后都需要更换。
4．下列关于PCR引物的说法，错误的是( )
A．引物是PCR过程中与模板DNA部分序列互补，并能引导模板DNA的互补链合成的(脱氧)核苷酸序列
B．引物常根据需要扩增的目标DNA的碱基序列用化学合成的方法获得C．DNA聚合酶只能使DNA链从引物的3′端开始向引物的5′端延伸
D．引物的3′端必须具有游离的羟基
解析：选C DNA的合成方向是从子链的5′端向3′端延伸。
5．下列有关“血红蛋白的提取和分离”的相关叙述，错误的是( )
A．可通过SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳鉴定血红蛋白的纯度
B．将血红蛋白溶液进行透析，其目的是去除相对分子质量较小的杂质C．血红蛋白释放时加入有机溶剂，其目的是使血红蛋白溶于有机溶剂
D．整个过程不断用磷酸缓冲液处理，是为了维持血红蛋白的结构
解析：选C 本实验可通过SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳鉴定血红蛋白的纯度；将血红蛋白溶液进行透析，其
目的是去除相对分子质量较小的杂质；血红蛋白释放时加入有机溶剂，其目的是溶解磷脂，加速血红蛋白的释
放；整个过程不断用磷酸缓冲液处理，是为了维持pH相对稳定，防止血红蛋白的结构发生改变。
6．关于DNA的粗提取与鉴定实验的叙述，错误的是( )
A．鸡血细胞中加水是为了提取DNA
B．NaCl溶液的物质的量浓度为2 mol/L时，DNA溶解
C．向溶解DNA的烧杯中加蒸馏水是漂洗DNAD．过滤加水后的鸡血细胞液是为了除去杂质
解析：选C 鸡血细胞中加水是为了使血细胞破裂释放DNA，从而提取DNA；NaCl溶液的物质的量浓度为2 mol/L时，DNA溶解；向溶解DNA的烧杯中加蒸馏水是为了降低NaCl溶液的浓度，从而使DNA析出；
鸡血细胞加水破裂后需过滤去除细胞碎片等杂质。
7．下列有关“DNA的粗提取与鉴定”实验的叙述，正确的是( )
A．研磨植物细胞时加入洗涤剂是为了快速溶解DNAB．NaCl溶液的浓度越大，DNA在其中的溶解度越大C．在95%的冷酒精中，某些蛋白质的溶解度比DNA大D．在50～60 ℃的水浴中，DNA遇二苯胺试剂后呈蓝色
解析：选C 研磨植物细胞时加入洗涤剂是为了瓦解细胞膜；NaCl溶液物质的量浓度低于0.14 mol/L时，NaCl溶液物质的量浓度越大，DNA在其中的溶解度越小；NaCl溶液物质的量浓度高于0.14 mol/L时，NaCl溶液物质的量浓度越大，DNA在其中的溶解度越大；在酒精溶液中，某些蛋白质的溶解度比DNA大，因此用
酒精可以进一步纯化DNA；在沸水浴中，DNA遇二苯胺试剂后呈现蓝色。
8．复性过程主要是引物与模板结合，然后子链在引物的基础上进行延伸，下列有关说法错误的是( )
A．引物一定在模板链的末端结合，延伸的子链最终与模板链等长B．引物和模板之间的碰撞结合机会远远高于模板互补链之间的碰撞
C．复性过程与子链延伸过程所需温度不同
D．两条子链的延伸方向相反，最终特异性扩增处于两种引物之间的DNA片段解析：选A 引物与模板依据碱基互补配对原则结合，未必在模板链末端。
9．下面关于DNA光吸收特点或DNA含量计算的叙述，正确的是( )
A．DNA主要吸收蓝紫光B．DNA主要吸收红橙光
C．可根据DNA在260 nm紫外线波段光吸收值的多少推算DNA的含量
D．计算DNA含量的公式可表示为“50×紫外分光光度计260 nm的读数”
解析：选C DNA主要吸收波长为260 nm的紫外线，可据光吸收量的多少推算DNA的含量，公式可表
示为“DNA含量(μg/mL)＝50×(紫外分光光度计260 nm的读数)×稀释倍数”。
10．以下关于猪血红蛋白的提取与分离的描述，错误的是( )
A．血红蛋白的颜色可用于凝胶色谱法分离过程的监测B．透析的目的是去除样品中相对分子质量较小的杂质D．蛋白质通过凝胶时，相对分子质量较大的移动速度快
C．血红蛋白的释放过程应加入生理盐水和甲苯，在搅拌器上充分搅拌
解析：选C 血红蛋白是有色蛋白，因此在凝胶色谱分离时可以通过观察颜色来判断什么时候应该收集洗
脱液。凝胶色谱法分离蛋白质的原理是：相对分子质量较大的蛋白质在凝胶颗粒的间隙移动，路程短，移动速度较快；相对分子质量较小的蛋白质容易进入凝胶内部的通道，路程较长，移动速度较慢。血红蛋白的释放中
加入的是蒸馏水和甲苯。
11．为了提取血红蛋白，从学校附近的屠宰场索取新鲜的猪血，对猪血处理的正确操作是( )
A．要在采血容器中预先加入抗凝血剂柠檬酸钠
B．取血回来后，马上进行高速长时间离心C．将离心后的血细胞加入清水中缓慢搅拌
D．重复洗涤直到上清液呈黄色为止
解析：选A 取血后，应进行低速短时间离心；离心后的血细胞加入生理盐水，缓慢搅拌，清洗红细胞；
红细胞重复洗涤直到上清液没有黄色为止。
12．下列关于样品的加入和洗脱的叙述，正确的是( )
A．先加入1 mL透析后的样品
B．加样前要使缓冲液缓慢下降全部流出
D．洗脱时可以用缓冲液也可以用清水
C．如果红色区带均匀一致地移动，说明色谱柱制作成功
解析：选C 加样前，打开色谱柱下端的流出口，使柱内凝胶面上的缓冲液缓慢下降到与凝胶面平齐，关
闭出口，无需全部流出；再用吸管小心地将1 mL透析后的样品加到色谱柱的顶端。洗脱时只能用缓冲液。
13．在提取和分离猪血红蛋白的实验中，应使用( )
A．柠檬酸钠溶液洗涤红细胞，防止红细胞破裂B．蒸馏水和甲苯处理红细胞，使其释放出血红蛋白C．生理盐水透析血红蛋白溶液，保持血红蛋白活性D．生理盐水洗脱，有利于血红蛋白在凝胶柱中移动
解析：选B 柠檬酸钠可防止血液凝固；在蒸馏水和甲苯的作用下，红细胞破裂，释放出血红蛋白；透析
用的是磷酸缓冲液；磷酸缓冲液有利于血红蛋白在凝胶柱中移动。
14．关于DNA和血红蛋白的提取与分离实验的分析，正确的是( )
A．提取DNA或血红蛋白均可用猪的红细胞或鸡的红细胞B．提取细胞中的DNA和蛋白质均需要用蒸馏水涨破细胞
C．通过用不同浓度NaCl溶液的反复溶解与析出DNA，可去除蛋白质
D．在蛋白质提取和分离过程中，进行透析可去除溶液中的DNA
解析：选C 提取DNA或血红蛋白都可用鸡的红细胞，但猪的成熟红细胞中无细胞核，不能作为提取DNA的原料；提取植物细胞中的DNA不用蒸馏水涨破细胞；利用DNA在不同浓度NaCl溶液中的溶解度不同，将DNA用不同浓度的NaCl溶液反复溶解与析出，可去除蛋白质；在蛋白质的提取和分离过程中，进行透析可去
除溶液中的小分子杂质。
15．(2018·成都校级月考)下列关于凝胶色谱法的原理，错误的是( )
A．凝胶色谱法是利用凝胶柱把相对分子质量不同的蛋白质分离开的—种方法B．在洗脱过程中，相对分子质量大的蛋白质不能进入凝胶内部而最先流出
C．凝胶内部有很微细的多孔网状结构，其孔隙大小与被分离的蛋白质的大小无相应关系
D．凝胶对要分离的物质没有吸附作用，所有要分离的物质最终都能被洗脱出来
解析：选C 凝胶色谱法是根据相对分子质量大小分离蛋白质的有效方法。凝胶是由多糖类化合物构成的，
其内部有很微细的多孔网状结构，小分子蛋白质可以进入凝胶内部，路程较长，移动速度慢，而相对分子质量较大的蛋白质无法进入凝胶内部，路程较短，移动速度快，因此在洗脱时相对分子质量大的蛋白质先分离出来。凝胶一般对分离的物质无吸附作用，所有要分离的物质都应该被洗脱出来，这是凝胶色谱法与一般层析法的不
同。
16．在DNA粗提取与鉴定实验中有以下步骤：①过滤用蒸馏水稀释过的鸡血细胞液；②过滤含黏稠物的0
.14 mol/LNaCl溶液；③过滤溶解有DNA的2 mol/L NaCl溶液。以上三次过滤分别为了获得( )
A．含核物质的滤液、纱布上的黏稠物、含DNA的滤液B．含核物质的滤液、滤液中的黏稠物、含DNA的滤液C．含核物质的滤液、滤液中的黏稠物、纱布上的DNAD．含较纯的DNA滤液、纱布上的黏稠物、含DNA的滤液
解析：选A 用蒸馏水稀释过的鸡血细胞液，血细胞的细胞膜、核膜破裂，释放出核物质，此时过滤只能得到含DNA和其他物质(如蛋白质)的滤液，这种滤液必须经过实验中其他步骤的相继处理，才能得到较纯的
DNA。DNA在0.14 mol/L NaCl溶液中溶解度最低，呈丝状黏稠物，经过滤留在纱布上。
误的是( )
17．PCR技术是一项在生物体外复制特定的DNA片段的核酸合成技术，如图表示合成过程。下列说法错
A．甲过程高温使DNA变性解旋，该过程不需要解旋酶的作用
B．丙过程用到的酶在高温下失活，因此在PCR扩增时需要再添加
度循环3次，则在形成的子代DNA中含有15N标记的DNA占25%
D．PCR中由碱基错配引起的变异属于基因突变
C．如果把模板DNA的两条链用15N标记，游离的脱氧核苷酸不做标记，控制“95 ℃→55 ℃→72 ℃”温
解析：选B 丙过程用到的酶是Taq DNA聚合酶，其特点是耐高温。
18.如图表示对某蛋白质溶液进行SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳的结果(相似于纸层析法分离色
素)，下列相关叙述错误的是( )
其所带电荷相反的电极移动
A．蛋白质上某些基团解离后可使蛋白质带电，电场中带电的蛋白质分子(或多肽)会向着与
B．蛋白质在SDS-聚丙烯酰胺凝胶中的迁移率完全取决于其所带净电荷多少
C．蛋白质在SDS-聚丙烯酰胺凝胶中的迁移率取决于其相对分子质量的大小
D．电泳结果表明溶液中蛋白质可能有两种，但也可能只有一种
解析：选B 蛋白质的氨基与羧基可发生解离，使其带正电或负电，在电场中发生迁移；SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳所加的SDS可完全掩盖蛋白质本身所带电荷，故其迁移率与本身所带电荷无关，而由其相对分子质量大小决定；SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳会使蛋白质水解成肽链，故结果所示可能只有一种蛋白质(有两种肽链)，
也可能是两种蛋白质。
19．图1、2分别为“DNA的粗提取与鉴定”实验中部分操作步骤示意图，下列叙述错误的是( )
A．图1、2中加入蒸馏水稀释的目的相同
B．图1中完成过滤之后保留滤液C．图2中完成过滤之后弃去滤液
D．在图1鸡血细胞液中加入少许嫩肉粉有助于去除杂质
解析：选A 图1加入蒸馏水的目的是使鸡血细胞吸水涨破释放DNA，图2加入蒸馏水的目的是稀释NaCl溶液使DNA析出；图1中加入蒸馏水后，DNA存在于滤液中；图2中加入蒸馏水后，NaCl溶液浓度降低，DNA析出，所以弃去滤液；嫩肉粉的主要成分是蛋白酶，鸡血细胞液中加入少许嫩肉粉可将蛋白质分解成小分子肽
或氨基酸，除去蛋白质。
20．SRY基因为Y染色体上的性别决定基因，可用SRY-PCR法鉴定胚胎性别，其基本程序如图，相关说
法正确的是( )
提取少量胚胎SRY基因引物PCR大量SRY探
―――――→―→―→
细胞DNA扩增DNA针检测
A．PCR扩增的操作步骤依次是：高温变性、中温复性、低温延伸
B．上述过程需要使用的工具酶之一是RNA聚合酶
D．SRY探针能与雄性胚胎样品中DNA配对
C．PCR技术中以核糖核苷酸为原料，以指数方式扩增
解析：选D PCR扩增的操作步骤依次是：高温变性、低温复性、中温延伸；上述过程需要使用的工具酶之一是热稳定DNA聚合酶；PCR技术中以脱氧核糖核苷酸为原料，以指数方式扩增；SRY探针是用位于Y染
色体上的性别决定基因(SRY基因)制成的，因此SRY探针能与雄性胚胎样品中DNA配对。
二、非选择题(除注明外，每空1分，共50分)
21．(12分)PCR技术有效地解决了因样品中DNA含量太低而难以对样品进行研究的问题，而被广泛应用
，此过程需要一种Taq DNA聚合酶。请回答有关问题：
Ⅰ.(1)体内DNA复制过程中用解旋酶打开双链DNA，而PCR技术中应用_______________________。(2分)
(2)相对于细菌分离，DNA分子的分离和提取操作要复杂得多。
①在DNA提取中两次用到蒸馏水，其目的分别是____________________、__________________。(每空2
②实验中能否以哺乳动物成熟的红细胞为实验材料？为什么？________________________________。(2
(3)与体内DNA复制相比较，PCR反应要在____________中才能进行，并且要严格控制温度条件。(2分)
Ⅱ.选用猪、牛、羊或其他脊椎动物的血液进行实验，来提取和分离血红蛋白。
分)分)
(4)实验前取新鲜血液，要在采血器中预先加入__________，取血回来，马上进行相关处理，收集血红蛋
白溶液。
(5)利用凝胶色谱法进行血红蛋白的分离，基本原理是__________________(填“相对分子质量大”或“相
2018-2019学年高二生物人教版选修一阶段质量检测：(五) DNA和蛋白质技术 Word版含解析
