第17讲 微生物的利用与酶的应用
[考纲要求] 1.大肠杆菌的培养和分离。2.分离以尿素为氮源的微生物。3.果汁中的果胶和果胶酶。4.α-淀粉酶的固定化及淀粉水解作用的检测。
1．培养基与微生物培养
单菌落的分离。
提醒
(1)LB固体培养基添加琼脂等凝固剂，用于
(2)全营养LB培养基与尿素固体培养基：①全营养LB培养基(含琼脂糖)是基础培养基；②尿素固体培养基：选择培养基(如以尿素作为唯一氮源的尿素培养基)和鉴别培养基(如尿素培养基中加入酚红)。
(3)加入尿素前的固体培养基用高压蒸汽灭菌法灭菌，尿素溶液用G6玻璃砂漏斗过滤。 2．灭菌与消毒的比较
类型 煮沸消毒法 巴氏消毒法 消毒方法 紫外线 热水 灼烧 房间、仪器设备 泡菜坛等 接种环、接种时用的试管口或瓶口等 化学药剂 水源或生物体结构部分等 适用范围 日常生活 不耐高温的液体 操作方法及注意点 100 ℃煮沸5～6 min 70～75 ℃煮30 min或80 ℃煮15 min 擦拭，如用70%酒精擦拭双手；成熟紫葡萄用高锰酸钾浸泡5 min；外植体在70%酒精中浸泡10 min，再放入5%次氯酸钠溶液中浸泡5 min，然后用另一5%次氯酸钠溶液浸泡5 min 紫外线照射30 min 热水清洗坛内壁两次 直接在酒精灯火焰的外焰烧红接种环或试管口和瓶口过火 高压蒸汽灭菌锅内，条件一般为1 kg/cm2，生产和实验室常用器具，如培养基、培养皿等 温度121 ℃，15 min(若为葡萄糖，则灭菌条件为500 g/cm2压力，温度90 ℃以上，30 min)；灭菌时间从高压锅内有压力后开始；高压锅或灭菌锅压力和大气压相同时才能打开锅盖 G6玻璃砂漏斗过滤。G6玻璃砂漏斗使用尿素等加热会分解的物质 前用纸包好进行高压蒸汽灭菌；G6玻璃砂漏斗使用后用1_mol/L盐酸浸泡，抽滤去酸，再用蒸馏水洗至洗出液呈中性，干燥后保存 操作空间：专门的接种室； 其操作设备：超净台(用前打开紫外灯和过滤风，用时关闭紫外灯，台面用70%酒灭菌方法 高压蒸汽 灭菌 过滤灭菌 他 精擦拭)； 操作环境：酒精灯火焰旁
3．微生物分离的两种常用方法的比较
浙江高考生物二轮复习讲义专题八生物技术实践
