2438动物营养学报2016，28（8）：2431-ChineseJournalofAnimalNutrition
doi：10.3969/j.issn.1006-267x.2016.08.014
硒蛋白x基因沉默和过氧化氢处理对人正常肝脏细胞中硒蛋白基因表达和
抗氧化酶活性的影响
汤加勇 赵 华 贾 刚 刘光芒 陈小玲 蔡景义 吴彩梅
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（
四川农业大学动物营养研究所，成都611130）
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lx）基因沉默和过氧化氢（HO）处理对人正常肝脏细胞摘 要：本试验旨在探讨硒蛋白x（Se
（LO2）中硒蛋白基因表达和抗氧化酶活性的影响，为探索Selx与其他硒蛋白之间的调控关系及Selx的功能奠定基础。对本实验室保存的Selx基因稳定沉默LO2细胞株（siSelx）和对照细胞
iSelx和CK用200μmol/LHO处理2.5h株（CK），利用噻唑兰（MTT）法比较其生长速率；s
CR技术考察25个硒蛋白基因的表达量；同时比较Selx后，采用荧光定量P基因沉默以及HO
H-Px）、超氧化物歧化酶（SOD）活性及总抗氧化处理对LO2细胞株中谷胱甘肽过氧化物酶（GS
AOC）的影响。结果显示：1）Selx基因沉默显著降低了LO2细胞株的生长速率（P＜能力（T-0.05）；2）Selx6、Txnrd2、Seli05），显著下调了基因沉默显著上调了Gpx基因的表达量（P＜0.
Dio2、Dio3、Selm、Sepw1基因的表达量（P＜0.05）；HO处理显著上调了Dio1基因的表达量（P＜0.05），显著下调了Gpx2基因的表达量（P＜0.05）；Selx6、基因沉默后HO处理显著上调了GpxTxnrd2、Dio1基因的表达量（P＜0.05），显著下调了Txnrd3、Dio2、Selm、Sepw1、Selv基因的表达量（P＜0.05）；3）SelxH-Px活性（P＜0.05），显著提高了SOD基因沉默显著提高了LO2细胞株GS
05）；SelxH-Px活性（P＜0.05）。由此可见，的活性（P＜0.基因沉默后HO处理显著提高了GS
Selxlx基因沉默降低了LO2细胞株的生长速率，Se基因沉默后HO处理影响部分硒蛋白基因
H-Px、SOD活性。在细胞中的表达量，同时也影响了GS
lx关键词：Se基因；沉默；HO；表达811.3 文献标识码：A 文章编号：1006-267X（2016）08-2431-08中图分类号：S
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e）是哺乳动物新陈代谢所必需的基本微硒（S
量元素，在动物的生长、繁殖等方面起着重要作e用。S在动物体内主要以硒蛋白的形式来发挥其多种生理功能，在人中已分离得到了25种硒蛋白。很多硒蛋白在动物体内是作为细胞重要的抗氧化防御系统，起着清除氧自由基、保护生物膜
e完整等功能。在动物饲粮中添加一定量的S
可以增加体内硒蛋白的表达，从而增强动物机体
[1]
[2-4]的免疫及抗氧化功能等。到目前还有很多硒蛋白的功能和作用机理不完全清楚，其中就包含
elx）。Selx也称为硒蛋白R（SelR）和硒蛋白x（S
rB1），在动物体内广泛蛋氨酸亚砜还原酶B1（Ms
r）家族，定位存在，隶属于蛋氨酸亚砜还原酶（Ms
r于细胞核和细胞质中。Ms是一种氧化还原修复
酶，它可修复被氧化的核糖体蛋白使其恢复蛋白
eactiveoxygenspecies，质的功能。活性氧（r
[3-4]
[5]
收稿日期：2016-02-28
CLD001）基金项目：国家自然科学基金面上项目（31072043，31272468）；四川隆达畜牧科技有限公司项目（2015S
mail：410699653@qq.com作者简介：汤加勇（1981—），男，四川乐山人，实验师，硕士，研究领域为营养与分子生物学。E--mail：zhua666@126.com*通信作者：赵 华，副研究员，硕士生导师，E
硒蛋白x基因沉默和过氧化氢处理对人正常肝脏细胞中硒蛋白基因表达和抗氧化酶活性的影响
