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2016年广西单招生物模拟试题:多聚酶链式反应扩增DNA片段
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1：使用末端终止法测定DNA序列需要的成分有： A、DNA聚合酶 B、dNTP C、ddNTP D、RNA引物 2：
如图为DNA变性和复性示意图，下列相关说法正确的是( ) A、向右的过程为加热(80～100℃)变性的过程 B、向左的过程是DNA双链迅速致冷复性
C、变性与在生物体内解旋过程的条件、实质都相同 D、图中DNA片段共有4个游离的磷酸基、4个3′端
3：在实验室内模拟生物体内的DNA复制，需要哪些条件
①酶 ②游离的脱氧核苷酸 ③ATP ④DNA分子 ⑤引物 ⑥tRNA ⑦适宜的温度 ⑧适宜的酸碱度 A、①②③④⑤⑥ B、②③④⑤⑥⑦ C、②③④⑤⑦⑧ D、①②④⑤⑦⑧
4：下列有关DNA聚合酶链式反应的说法正确的是 A、需要引物
B、始终在高于70℃的条件下进行 C、需要加解旋酶
D、需要热稳定DNA聚合酶
5：下列有关核酸的变性与复性的正确叙述是( )。
A、不同长度的DNA分子变性后，在合适温度下复性所用的时间基本相同 B、热变性后的DN A经缓慢冷却后可复性
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C、热变性的DNA迅速降温过程也称作退火 D、复性的最佳温度为70C-85C
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PCR技术是把DNA片段在体外酶的作用下，合成许许多多相同片段的一种方法，利用它能快速而特异地扩增任何要求的目的基因或DNA分子片段，它的基本过程如下图所示：
注：图中短线表示每次扩增过程中需要的引物。每个引物约含20个脱氧核苷酸，并分别与两条单链DNA结合，其作用是引导合成DNA子链。
(1) PCR技术的原理是模拟生物体内______的过程。
(2) PCR扩增过程中需要对DNA片段进行高温处理，其目的是____，此过程在生物体内为____，需______酶的参与。
(3)假如引物都用3H标记，从理论上计算，所得DNA分子中含有3H标记的占____。
(4)假定DNA片段含200对脱氧核苷酸，经3次扩增，从理论上计算需要______个游离脱氧核苷酸。 7：
（2014河北石家庄月考）PCR是一种体外快速扩增DNA的方法，用于扩增特定的DNA片段，数小时内可使目的基因片段扩增到数百万个拷贝。请回答相关问题：
(1) DNA分子的两条链在碱基关系上表现为____，DNA的两条链在方向上表现为____；通常将____的末端称为5’端；当引物与DNA母链通过碱基互补配对结合后，DNA聚合酶就能从引物的____开始延伸DNA链，故DNA子链复制的方向是____。
(2) PCR与体内DNA复制的不同之处主要表现在温度上，在PCR中先用95℃高温处理的目的是____；而这一过程在细胞内是通过____实现的。
(3) PCR需要模板DNA、引物、____和____等条件，其中的引物实质上是一种____
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（2015湖北襄阳第一次调研）生活饮用水已经过沉淀、过滤、加氯消毒等处理，含微生物很少，但当其水源水不洁或处理达不到要求时，仍然会含相当量的微生物甚至含致病性微生物。供水管道破损及二次供水等环节也可能导致生活饮用水的污染。因此生活饮用水的微生物安全性日常检测是很重要的。我国生活饮用水水质标准( CB5749 - 85)中规定生活饮用水中细菌总数不得大于100个/mL，总大肠菌群不得大于3个/L。
(1)检验大肠杆菌的含量时，通常将水样进行一系列的梯度稀释，然后将不同稀释度的水样用涂布器分别涂布到琼脂固体培养基的表面进行培养，记录菌落数量，这种方法称力____。 (2)用该方法统计样本菌落数时是否需要设置对照组？为什么？_ ___。
(3)如分别取0.1 mL已稀释102倍的水样分别涂布到四个琼脂固体培养基的表面进行培养，培养基记录到大肠杆菌的菌落数分别为161、155、158、170，则每升原水样中大肠杆菌数为____。
(4)纯化大肠杆菌时使用的培养基一般用法灭菌， ___（可／不可）用加入抗生素的方法防止杂菌感染。 (5)如果要测定水中的病毒种类，可以用____技术使其遗传物质扩增，然后用___技术进行鉴定。 9：
请根据以下图表回答问题。
(1)在采用常规PCR方法扩增目的基因的过程中，使用的DNA聚合酶不同于一般生物体内的DNA聚合酶，其最主要的特点是 ______。
(2) PCR过程中复性温度必须根据引物的碱基数量和种类来设定。如表为根据模板设计的两对引物序列，如图为引物对与模板结合示意图。请判断哪一对引物可忍耐较高的复性温度 ____。
10：
在进行DNA亲子鉴定时，需大量的DNA。PCR技术（多聚酶链式反应）可以使样品DNA扩增，获得大量DNA克隆分子。该技术的原理是利用DNA的半保留复制，在试管中进行DNA的人工复制（如图，图中黑色长方形是
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引物）。在很短的时间内将DNA扩增几百万倍甚至几十亿倍，使实验室所需的遗传物质不再受限于活的生物体。
(1)图中的变性、延伸分别是指__________、__________、__________。
(2)某样品DNA分子中共含3 000个碱基对，碱基数量满足：(A+T)／(G+C)=1／2，若经5次循环，至少需要向试管中加入____个腺嘌呤脱氧核苷酸。（不考虑引物所对应的片段） (3)若下图为第一轮循环产生的产物。请绘出以a链和b链为模板经PCR扩增的产物。
11：（8分） PCR技术（聚合酶链式反应）是一项在生物体外复制特定的DNA片段的核酸合成技术，下图表示合成过程，请据图分析回答：
（1） C过程要用到的酶是＿＿＿＿＿＿。PCR反应除提供酶外，还需要满足的基本条件有：＿＿＿＿＿＿，＿＿＿＿＿＿，＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿。
（2） 人类利用PCR技术合成的DNA进行新子鉴定，其原理是：首先获取被测试者的DNA，并进行PCR扩增，放进凝胶内，用电泳推动DNA小片段分离，再使用特别的“探针”去寻找基因。相同的基因会凝聚在一起，然后利用特别的染料在X光下，便会显示由DNA探针凝聚于一起的黑色条码。每个人的条码一半与其母亲的条码吻合，另一半与其父亲条码吻合。下图为某小孩和其母亲以及待测定的四位男性的DNA指纹图谱示意图，请推测该小孩真正生物学上的父亲是＿＿＿＿，为什么？＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿。如果四位男性中有该小孩的同母异父的兄弟，请推测该小孩的同母异父的兄弟有＿＿＿＿ 。
12：（12分）糖尿病是一种常见病，且发病率有逐年增加的趋势，以致西方发达国家把它列为威胁人类健康的第三号“杀手”。目前对糖尿病的治疗，大多采用激素疗法，该激素过去主要从动物（猪、牛）中得到。自从70年代基因工程发展起来后，人们开始采用这种新技术生产，其操作的基本过程如图所示。（1～7代表某生理过程，a～g代表细胞或结构）
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（1）2过程需要用工具是 ，4过程需要用工具是 。
（2）已知g代表的胰岛素分子是由51个氨基酸分子构成的蛋白质，具有两条肽链，控制合成g的基因至少有 个含氮碱基（不考虑终止密码子）。
（3）b细胞是 ，d基因与人体内胰岛素基因的区别是 。 （4）在功能上与g物质有拮抗作用的是 。 13：（6分）请回答PCR方面的有关问题：
(1)引物是扩增过程中必须加入的物质，从化学本质上说，引物是一小段_______________。 (2)引物是子链合成延伸的基础，如下图。
从理论上推测。第四轮循环产物中两条脱氧核苷酸链等长的DNA片段所占DNA总数的比例为 。
(3)设计引物是PCR技术关键步骤之一。某同学设计的一组引物(只标注了部分碱基序列)不合理(如下图)，请说明理由 。
（4）在DNA聚合酶的作用下，两条子链的延伸方向都是 。
（5）假如引物都用H标记，从理论上计算，所得DNA分子中含有H标记的占 。
（6）与体内DNA复制相比，PCR反应体系除引物外，还需加入哪种特别的物质？ 。 14：（改编）番茄营养丰富，是人们喜爱的一类果蔬。但普通番茄细胞中含有多聚半乳糖醛酸酶基因，控制细胞产生多聚半乳糖醛酸酶，该酶能破坏细胞壁，使番茄软化，不耐贮藏。为满足人们的生产生活需要，科学家们通过基因工程技术，培育出了抗软化、保鲜时间长的番茄新品种。操作流程如图，请回答：
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