细粒棘球绦虫成虫全长cDNA质粒文库的构建及鉴定

细粒棘球绦虫成虫全长cDNA质粒文库的构建及鉴定

吕刚;芦亚君;范志刚;史大中;王虎;韩秀敏

【期刊名称】《海南医学院学报》 【年(卷),期】2010(016)006

【摘要】目的:构建细粒棘球绦虫(E.g.)成虫全长cDNA质粒文库,并检测文库质量.方法:提取E.g.成虫mRNA,应用SMART方法构建pBluescript Ⅱ SK全长cDNA质粒文库,检测文库的重组率及容量;用载体克隆位点两端的引物进行PCR扩增,检测插入片段大小.随机挑选阳性重组克隆5'端测序,归并unigene,计算unigene得率,全长性判定主要根据同源全长基因5'末端进行比较判定并计算全长率.结果:成功构建E.g.成虫全长cDNA质粒文库.文库的重组率为95.04%,库容量1.13×106;平均插入片段长度约为1.2 kb.24个随机阳性克隆测序,unigene比例为69.57%,全长性比率为64.71%.结论:成功构建E.g.成虫全长cDNA质粒文库,文库质量良好. 【总页数】4页(673-676)

【关键词】细粒棘球绦虫;成虫;全长cDNA质粒文库;构建;鉴定 【作者】吕刚;芦亚君;范志刚;史大中;王虎;韩秀敏

【作者单位】海南医学院寄生虫学教研室,海南,海口,571101;海南医学院寄生虫学教研室,海南,海口,571101;海南医学院寄生虫学教研室,海南,海口,571101;海南医学院寄生虫学教研室,海南,海口,571101;青海省地方病预防控制所,青海,西宁,811602;青海省地方病预防控制所,青海,西宁,811602 【正文语种】中文 【中图分类】R383.33