第三章 细胞生物学研究方法

一、章（节、目）授课计划

授课章节名称 第三章 细胞生物学研究方法 授课 时数 第 页

2 教 学 目 的 教 学 要 求 教 学 重 点 教 学 难 点 教学 方法与手段 1、使学生掌握细胞形态结构的观察方法，了解主要工具，侧重掌握基本原理和基本应用 2、了解细胞组分的分析方法及细胞培养 3、了解细胞工程技术 1、掌握细胞形态结构的观察方法，掌握光学显微镜技术 2、了解细胞组分的分析方法及细胞培养 3、了解细胞工程技术 1、细胞形态结构的观察方法 2、细胞组分的分析方法及细胞培养。 1、观察细胞形态的主要方法及工具的介绍。 2、细胞组分的分析方法 讲授法、 互动讨论法 作业与 部分课后作业 思考题 阅读 书目或参考 资料 1、《细胞生物学》（第3版）(翟中和等)(高等教育出版社)（2009） 2、《细胞生物学进展》（郑国錩等）（高等教育出版社）（1994） 3、《分子细胞生物学》（韩贻仁）（高等教育出版社）（2007） 教 学 后 记 精品 Word 可修改 欢迎下载

二、课时教学内容

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技术的进步在一门学科的建立与发展过程中起着巨大的作用。没有 显微镜的发明就没有细胞的发现，更不会有细胞学说的建立，没有电子显微技术及其分子生物学技术的结合，就不会有细胞生物学今天的发展。

细胞生物学研究方法：一般来说，凡是用来解决细胞生物学问题所采用的方法，都属于细胞生物学研究方法。当前细胞生物学研究中常用到的方法有:核酸和蛋白质成分的分析和序列测定、研究特异DNA、RNA常用的southern杂交、Northwre杂交及蛋白质免疫印迹技术、基因打靶技术等等。

第一节 细胞形态结构的观察方法

一、有关显微镜的一些概念

（1）分辨率（resolution）：指分辨物体最小间隔的能力。 光学显微镜的分辨率 R=0.61λ/N．sin（α/2）．

? 其中λ为入射光线波长； ? N =介质折射率；空气中N =1

? α=物镜镜口角（样品对物镜镜口的张角） 。

（2）放大倍数（magnification）：是指眼睛看到像的大小与对应标本大小的比值。它指的是长度的比值而不是面积的比值。

例：放大倍数为100×，指的是长度是1μm的标本， 放大后像的长度是100μm，要是以面积计算，则放大了10,000倍。

显微镜的总放大倍数等于物镜和目镜放大倍数的乘积。

（3）有效放大倍数（effective magnification）：物镜的数值孔径（NA）决定了显微镜有效放大倍数。有效放大倍数，就是人眼能够分辨的d′与物镜的d间的比值，即不使人眼看到假像的最小放大倍数： M=d′/d 二、显微镜的分类

现代显微镜可以分为两大类：一类是光学显微镜，另一类是非光学

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显微镜 。这两类显微镜又可根据不同的情况分成若干类型。

三、光学显微镜技术

光学显微镜技术至今仍是细胞生物学研究的重要手段。 （一）普通复式光学显微镜技术 1. 构成：

①照明系统：光源、折光镜、聚光镜

②光学放大系统：为两组玻璃透镜，目镜与物镜

③机械装置和支架系统，由镜座、镜筒、物镜转换器、载物台、推动器、粗动螺旋和微动螺旋等部件组成，保证光学系统的准确配置和灵活调控。 2. 原理：经物镜形成倒立实像，经目镜放大成虚像。

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