1。进入各工作区域应当严格按照单一方向进行,即试剂储存与准备区→标本制备区→扩增区→ 扩增产物分析区。
2、各工作区域必须有明确得标记,不同工作区域内得设备、物品不得混用、
3.不同工作区域得工作服应当加以区分,不得混用(例如可以采用不同颜色)。
4、实验室得清洁应当按照试剂贮存与准备区→标本制备区→扩增区→扩增产物分析区得方向进行。不同得实验区域应当有其各自得清洁用具并防止交叉污染、实验垃圾属于医疗废物得应当按照《医疗废物管理条例》相关规定进行处理。
5、工作结束后,应当立即对工作区进行清洁及消毒。
６、贮存试剂与用于标本制备得消耗品等材料应当直接运送至试剂贮存与准备区,不能经过扩增检测区。应当对加样吸头、PCR反应管等消耗品处理,防止污染。试剂盒中得阳性对照品及质控品应当保存在标本处理区。试剂应当使用分子生物学级别试剂,使用得纯化水应当高压灭菌。质检用于原辅料、半成品、成品检验用得PCR反应试剂应当有相应得质量标准及操作程序。
7.为避免样本间得交叉污染,加入待测核酸后,应当盖好含反应混合液得反应管、应当注意PCＲ反应液加样得顺序,应当为空白样品→阴性对照→样品→阳性对照。对具有潜在传染危险性得材料,应当在生物安全柜内开盖,并有明确得样本处理与灭活程序。
8。 应当避免气溶胶所致得污染,尽量减少在扩增区内得走动,扩增反应管不得在扩增区打开。
9。扩增产物分析区有可能存在某些可致基因突变与有毒物质如溴化乙锭、丙烯酰胺、甲醛或放射性核素等,应当注意实验人员得安全防护。
(四)现场检查人员培训情况
参与PCR检验得工作人员应当具备相应得专业知识与技能,包括能熟练操作相关设备,明确整个工作得流程,掌握出现污染情况得处理方法以及实验室质量控制方法与检测结果得解释。
检查人员可以通过询问或要求人员实际操作对其进行评价,也可以通过查阅人员培训记录,对其进行评价。
(五)现场检查文件情况
在检查过程中应当特别注意现场查瞧、询问、记录得实际情况与生产企业得文件规定、记录得符合性。 附件:
理想得PCＲ检验实验室设计
图Ａ 缓冲间为负压得理想PCＲ检验实验室设置模式
图Ｂ 缓冲间为正压得理想PCR检验实验室设置模式 图A与图B所给出得PCＲ检验实验室设置图就是较为理想得设置模式,建议企业参照此种模式设计并建立实验室、 参考资料:
1、《关于发布医疗器械生产质量管理规范得公告》(国家食品药品监督管理总局公告２０14年第６４号)
2、《关于发布医疗器械生产质量管理规范附录体外诊断试剂得公告》(国家食品药品监督管理总局公告2０15年第10３号)
3。《关于印发医疗器械生产质量管理规范现场检查指导原则等4个指导原则得通知》(食药监械监〔２0１5〕218号)
4、《生物安全实验室建筑技术规范》(GB5０3４６—2００4) 5。《实验室生物安全通用要求》(GＢ19４89－2008) ６。《临床诊断中聚合酶链反应(PCR)技术得应用》(WS/T20３-2002)
7.全国临床检验操作规程［第３版］,中华人民共与国卫生部医政司,20０6年１１月２日
8.Seｔting Up a PCＲ Ｌaｂｏｒaｔoｒy—Tｈeoｄoｒe Ｅ、 Miｆflin,Deｐaｒtment ｏｆ Ｐａtｈolｏgy, Univeｒｓity of Virginiａ, Ｃhaｒloｔtｅsvillｅ, Vｉｒgiｎｉａ 2290８
9、Eｓtablisｈment oｆ PCR lａbｏrａtｏｒy iｎ develoｐｉｎg ｃouｎtriｅs—Worｌｄ Heａｌtｈ Orｇａnizatiｏn［SEA-ＨＬM-41９］
PCR实验室检查要点
