C、血清学鉴定法 D、分子生物学鉴定法 18、( B )大多数植物组织培养培养基最适pH为 。 A、5.0-7.0 B、5.0-6.0 C、3.0-4.0 D、7.0-8.0 19．有一种植物经初代培养得到４株无菌苗，以后按每３６天继代增
殖一次，每次增殖倍数为３倍，一年后繁殖苗有＿C A、 3×410株 B 、4 × 312株
C 、４× 310株 D、３× 412株
20、( D )下列哪种在MS培养基中不起促进生长作用___D______。 A、氨基酸 B、肌醇 C、维生素 D、琼脂
21、植物病毒病害防治上，植物病毒脱毒技术得到了广泛的应用，下
列脱毒技术效果最好、应用最广泛的是（ C ）。 A、热处理脱毒法 B、茎尖培养脱毒法
C、热处理与茎尖培养相结合的脱毒法 D、基因工程技术脱毒法
22、下列物质不能用高温蒸汽灭菌的是（C ）
A、镊子 B、滤纸 C、抗生素类 D、6-BA 23、( A )下列那种不是无性繁殖的器官_________。
A、种子 B、枝条 C、块茎 D、块根 22、( B ) 植物离体保存的主要步骤是 。
①离体培养物的保存 ②离体培养与祛除病原物
③种质离体收集 ④遗传稳定性鉴定
A、①②③④ B、③②①④ C、②④①③ D、①②④③ 24、 ( C ) 原生质体纯化步骤大致有如下几步 。
①将收集到的滤液离心，转速以将原生质体沉淀而碎片等仍悬浮在上清液中为准，一般以500r／min离心15min。用吸管谨慎地吸去上清液。
②将离心下来的原生质体重新悬浮在洗液中(除不含酶外，其他成分和酶液相同)，再次离心，去上清液，如此重复三次。
③将原生质体混合液经筛孔大小为40～100um的滤网过滤，以除去未消化的细胞团块和筛管、导管等杂质，收集滤液。
④用培养基清洗一次，最后用培养基将原生质调到一定密度进行培养。一般原生质体的培养密度为104～106／ml。
A、①②③④ B、③②①④ C、③①②④ D、②③①④ 25、( D )下列有关细胞全能性的含义，正确的是 。
A、每个生物体内的所有细胞都具有相同的功能
B、生物体内的任何一个细胞可以完成该个体的全部功能 C、生物体的每一个活细胞都具有发育成完整个体的潜能 D、生物体的每个细胞都经过产生、分裂、分化、生长、衰老、死亡的全过程
26、( D )下列不属于活性炭在组织培养中的作用是_________。
A、吸附有毒物质
B、减少褐变，防止玻璃化
C、创造黑暗环境，增加培养基的通透性，利于根的生长 D、增加培养基中的养分 三、名词解释
1、植物组织培养：又称植物离体培养，是在无菌和人工控制的条件下，利用合适的培养基，完成对植物的器官，组织，细胞以及原生质体的培养，使其按人们的意愿生长，增殖或再生完整植株的一门生物技术。
2、脱分化：是指一个成熟个体恢复分化状态，失去已分化组织，形成愈伤组织的过程。
3、离体培养：在植物组织培养中，把植物体的组织或细胞离体在一定条件下培养。
4、愈伤组织：植物培养中，植物细胞表现其全能性，经过脱分化，形成的一团无序生长的薄壁组织。
5、细胞悬浮培养：是指植物的细胞和细胞小聚体在液体培养基中进行培养，使之在体外繁殖，生长，发育，并在培养过程中保持很好的分散性的技术。
6、玻璃化现象：是试管苗的一种生理失调症状，当植物材料进行离体培养时，有些组培苗的嫩茎，叶片往往会出现半透明状和水渍状的现象。
7、外植体：进行植物组织培养中作为离体培养材料的器官或组织的片段。在继代培养时，将培养的组织切段移入新的培养基时，这
种切段也称外植体。
8、驯化现象：在植物组织培养的早期研究中，发现一些植物的组织经长期的继代培养发生了一些变化，在前期的继代培养中需要生长调节物质的植物材料，其后加入少量或不加入生长调节物质就可以继续生长的现象。 四、简答题：
1.简述培养基配制的基本过程 答：
1）取出母液并按顺序排好，并将有机营养物质贮液溶化待用。 2）再取出洁净各种的玻璃器皿如：烧杯，玻璃棒，移液管，移液枪，量筒放在指定位置。
3）取一个大烧杯，倒入三分之一的纯水，并依母液所需量按顺序加入，并不断搅拌。
4）再加入蔗糖，琼脂，并加热使其完全溶解。 5）加入植物生长调节剂，用纯水定容。
6）调节pH，用预先配制好的氢氧化钠溶液或稀盐酸溶液进行调节。
7）将培养基分装到各培养器皿，并封好瓶口。 2.在植物组织培养实验中，造成污染的因素有哪些？ 答：
1）培养基和各种使用器具消毒不彻底 2）外植体灭菌不彻底，杂菌残存外植体表面
3）超净工作区域污染 4）操作人为因素带入 5）环境不洁净 3.简述外植体的消毒过程。
清水清洗——清洁精清洗——吸干水分——70％酒精清洗——升汞清洗——无菌水清洗。 4.简述缓解和减轻褐变的措施。
1）外植体和培养材料进行20—40d的遮光或暗培养，可以减轻一些种类的褐变现象；
2）选择适宜的培养基，调节激素用量，控制温度和光照，降低温度，减少光照；
3）选择年龄适宜的外植体材料进行培养；
4）在培养基中，加入抗氧化剂和其他抑制剂如抗坏血素，可以有效地抑制褐变；
5）连续转移，对易褐变的材料可间隔12—24h的培养后，再转移到新的培养基上，连续培养处理7—10d后，褐变现象便会得到控制或大为减轻；
6）添加活性炭等吸附剂，这是生产上常用的降低褐变的有效方法。
5.脱毒苗的鉴定方法有哪些？
1）指示植物病毒鉴定法； 2）抗血清鉴定法；
植物组织培养技术考试复习题
