《临床生化检验》期末复习思考
1 什么是双缩脲反应？双缩脲法测定TP的原理是什么？
血清中蛋白质的两个相邻肽键在碱性溶液中能与二价铜离子作用产生稳定的紫色配合物，称为双缩脲反应。原理：血清中蛋白质的两个相邻肽键在碱性溶液中能与二价铜离子作用产生稳定的紫色配合物，紫色配合物颜色深浅与血清蛋白质的含量成正比。 2 双缩脲试剂的组成及各自的作用.
双缩脲试剂A:氢氧化钠水溶液 （提供碱性环境） 双缩脲试剂B：硫酸铜水溶液（作为显色剂与蛋白质反应）
3 .Trinder反应的基本原理、色原物质及影响因素是什么？
原理：葡萄糖氧化酶GOD能将葡萄糖氧化成葡萄糖酸和过氧化氢，生成的过氧化氢在过氧化物酶POD的作用下，将无色的4-氨基安替比林与酚氧化缩合成红色醌类化合物，即Trinder反应。色原物质：4-氨基安替比林、酚 影响因素：维生素C、尿酸、谷胱甘肽及胆红素等还原性物质也与色原性物质竞争H2O2，从而使氧化过程中产生的H2O2被消耗，导致色素形成减少，测定结果偏低。
4. 血液标本采集后为什么需要及时分离血清或血浆？.溶血标本对测定结果有何影响？为什么？. 不及时分离可发生红细胞与血清之间成分的相互转移，或细胞中的某些酶分解待测物等，而影响检验结果。溶血的影响：AST、ALT,LDH,K离子，TBIL,CKEA,TP等显著升高；GLU等显著降低。（理由：有些物质在红细胞内的浓度比血浆高22-160倍可使测定结果偏高。样品中某些强的酶会促使葡萄糖降解导致测定值降低。）
5.什么是IQC、EQA？两者有什么区别？
IQC:室内质量控制，旨在检测和控制常规工作的精密度和准确度，提高常规工作中天内和天间标本检测的一致性。
EQA：室间质量评价，是指多家实验室分析同一标本，并由外部独立机构收集和反馈实验室上报的结果，以此评价实验室操作的过程。 比较：
6.质控图在控的判断规律是什么？能力对比实验计算公式判断标准是什么？
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Levey-Jennings质控图正常分布规律：95%数据落在x?2S内，5%的数据可在x?2s外，但在x?3s以内；不能有连续5次结果在同一侧；不能有连续5次结果渐升或渐降；不能有连续2点落在x?2s以外；不应该有落在x?3s以外的点。 Westgard多规则质控法：
12s规则：任意一个质控结果处于x±2s至x?3s之间，仅用作“警告”规则，并启动由其他规则来检验质控数据。
13s 规则：一个质控结果超过x±3s，就判断失控，该规则主要对随机误差敏感。
22s 规则：两个连续的质控结果同时超过x＋2s或x－2s，就判断失控，该规则对系统误差敏感。
R4s规则：同一批中两个质控结果之差超出4s范围，一个质控结果超过x＋2s，另一个质控结果超过x－2s，就判断失控，该规则对随机误差敏感。
41s规则：一份质控血清四个连续的质控结果同时超过x＋1s或x－1s，或2份质控血清的测定结果同时连续两次超过x＋1s或x－1s，就判断失控，该规则对系统误差敏感。 10x失控规则：10个连续的质控结果落在平均数的一侧（高或低于平均数，对偏离的大小没有要求），就判断失控，（一种为：一个水平的质控品连续10次质控值在均值的同一侧；另一种：两个水平的质控品同时连续各有5次质控值在均值的同一侧），该规则对系统误差敏感。
能力对比试验（PT）计算公式：某一项目PT得分S1=某一项目可接受结果数x100%
某一项目的测定次数全部项目PT总的得分S2=全部项目可接受数x100%
全部测定项目数能力比对试验如在可接收范围内PT得分为100分，在可接受范围外，PT得分为0分；能力对比室间质评要求：S1 S2均高于80%，否则为不满意；S1 S2连续两次或以上不满意者则失败，不准开展此项目。
计算变异指数得分法：变异百分率（V)=变异指数(VI)=
x?T*100%,x为测定值，T为靶值 TV*100 CCV为卫生部临床检验中心针对某个项目推荐的变异系数，当CCVVI<400时，VIS=VI;当VI>400时，VIS=400。
WHO判断标准：VIS<50为优秀；50<=VIS<100为良好；100<=VIS<150为及格 中国判断标准：VIS<=80为优良；80
7.根据血、尿、粪便中胆色素的变化，区别三种不同性质的黄疸。 类型 正常人 血 液 结合胆红素 未结合胆红素 无或极微 有 尿 液 尿胆红素 阴性 尿胆原 少量 棕黄色 粪便颜色
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溶血性黄疸 肝细胞性黄疸 梗阻性黄疸 轻度增加 中度增加 明显增加 中度增加 阴性 阳性 尿胆红素 强阳性 明显增加 一般增加 尿胆原 减少或无 加深 变浅 粪便颜色 变浅或陶土色 结合胆红素 未结合胆红素 明显增加 轻度增加 8.酶活性测定方法有几种？原理是什么？各有何特点？ 定时法 原理：使酶促反应进行一段时间后，加入终止剂终止反应，测定这段时优点：测定时酶促反应已终止，无需安装恒温装置，显色剂的选择可不考虑对酶活性的影响。 缺点：应做预试验，确保在酶促反应速率恒定期进行检测 连续监测法 学法） 原理：指在酶促反应过程中用仪器监测某一反应产物或底物的浓度随时优点：无须终止酶促反应，不需添加其它成色试剂，就反应物变化的多点测定结果 连接成线，观察整个反应过程，选择线性期来计算酶活性，结果准确可靠。 平衡法 （终点法）
9.酶活性单位的计算：
已知速率法测定参数,列出详细计算公式并算出该酶的活性单位（U／L）
原理：通过测定酶促反应开始至反应达到平衡时产物或底物浓度的总变化量来求出酶活性浓度的方法，目前少用 （速率法或动力 间的变化量，求出酶反应初速度，间接计算酶活性浓度的方法。 （固定时间法） 间内底物或产物的变化量，从而计算出酶活性浓度。 U/L??AV?10^6? min??v?LV为反应体系体积（ml）、ε为摩尔消光系数（cm.mol）、v为样品量（ml）、L为比色杯光径（cm）、?A为吸光度变化、10^6为将mol换算成μmol。 10.何谓电泳、电泳迁移率？影响电泳的因素有哪些？
电泳：是指带电颗粒在电场力作用下向所带电荷相反电极的泳动。
电泳迁移率：带电粒子在单位时间内移动的距离称为电泳迁移率。电子迁移率??Q/(6?r) Q为粒子所带电荷，r为粒子的半径
影响因素：1.电泳介质的pH值 2.缓冲溶液的离子强度：离子强度过低缓冲液的缓冲容量小不易维持pH值恒定；离子强度过高，则降低蛋白质的，使电泳速度减慢，常用离子强度在0.02-0.2之间 3.电场强度：电场强度与移动距离成正比，电场强度越高，带电粒子移动越
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快。4.电渗：当电泳方向与电渗方向相反时，则实际电泳的距离等于电泳距离减去电渗的距离；当两者方向相同时，实际电泳距离等于电泳距离加上电渗距离。5.支持介质的筛孔：在筛孔大的介质中泳动速度快，反之慢。
11.什么是血脂、血浆脂蛋白、载脂蛋白、脂蛋白受体、高脂蛋白血症？
血脂：血浆脂类的简称，包括游离胆固醇FC，胆固醇酯CE，磷脂PL，甘油三酯TG，糖脂GL，游离脂肪酸FFA等。
血浆脂蛋白：指血浆中与蛋白质结合在一起形成的脂质-蛋白质复合物，根据密度不同分为乳糜微粒CM,极低密度脂蛋白VLDL,低密度脂蛋白LDL，高密度脂蛋白HDL
载脂蛋白（Apo)：是脂蛋白中的蛋白部分，具有构成并稳定脂蛋白的结构、修饰并影响与脂蛋白代谢有关的酶活性的作用，并以脂蛋白受体的配体形式参与脂蛋白与细胞表面脂蛋白受体结合和代谢过程。（脂蛋白中具有运输脂质作用的蛋白质）
脂蛋白受体：脂蛋白受体是一类跨细胞膜上的糖蛋白，能与相应的脂蛋白配体作用，介导细胞对脂蛋白的摄取与代谢。
高脂蛋白血症：指血浆中CM,VLDL,LDL,HDL等脂蛋白有一类或者几类浓度过高的现象。 12.血浆脂蛋白的分类、名称及对应关系。 按密度不同分为：乳糜微粒：运输外源性甘油三酯 极低密度脂蛋白：主要运输内源性甘油三酯 低密度脂蛋白：运输内源性胆固醇的主要形式
高密度脂蛋白：从肝外组织摄取胆固醇至肝脏排泄，对机体有保护作用。 按电泳法分：乳糜微粒 β脂蛋白 前β脂蛋白 ɑ脂蛋白
按密度从低到高CM VLDL LDL HDL(CM β-Lp pre-Lp ɑ-Lp) 13.什么是Jaffe反应？如何消除假肌酐的干扰？
1.在碱性条件下，苦味酸和肌酐发生反应，生成黄红色的苦味酸肌酐复合物称为Jaffe反应。 （标本中的维生素C、丙酮酸、丙酮、乙酰乙酸、甲基多巴、高浓度的葡萄糖、蛋白质和一些抗菌素如 青霉素G、头孢噻吩、头孢西丁、头孢唑啉等也都能与碱性苦味酸生成红色复 合物。这些不是肌酐但能起显色反应的物质称为“假肌酐” ） 2.消除“假肌酐”干扰，主要采取两种办法：
①用吸附剂（硅酸铝或纯化漂白土）吸附或用离子交换树脂除去“假肌酐”。
②在速率法测定中，设置20S延迟期，即在样品与碱性苦味酸试剂混匀后的20—80S之间（此时期中肌肝与苦味酸反应占主导地位 ，称为“窗口期”进行测定，可得到较准确的测定结果。
14.方法学评价试验与可测误差类型的关系。 名称 重复性试验 方法 在重复性条件下对同一标本进行多次分析误差类型 随机误差
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测定，测定结果的精密度 回收试验 将被分析的纯品标准液加入患者样品中成为分析样品，原患者样品加入相同量的无分析物溶液做基础样品，然后用实验方法分析，计算回收率。衡量候选方法的准确度 比例系统误差 干扰试验 基本与回收试验一样，加入的是疑有干扰或非特异性反应的物质，衡量候选方法的准确度 恒定系统误差 方法比较试验 对一组患者的标本用候选方法和对比方法同时进行分析测定，最后观察两者之间的差异。 恒定系统误差 比例系统误差
15.回收实验的计算：
已知样品制备及各样品管和校准管的测定吸光度，计算各管的测定浓度、加入浓度、回收浓度及回收率和比例系统误差。 1.加入浓度的计算： 加入浓度（mmol/L)=
标准液量（ml）?标准液浓度病人样品量（ml）?标准液量(ml)2.回收试验病人标本的浓度（mmol/L)=测定管吸光度?标准液浓度 （注意：加入浓度计算中
标准管吸光度用到的标准液浓度与该标准液浓度不同，该标准液浓度为校准管中加入的标准液的浓度） 3.回收浓度=各回收样品测得值得均值-基础样品测得的均值 4.各回收样品的回收率=回收浓度?100%
加入浓度5.平均回收率=各回收样品回收率之和 回收样品数6.比例系统误差=100%-平均回收率 16.什么是血气分析？分析指标有哪些？
血气分析是医学上常用于判断机体是否存在酸碱平衡失调以及缺氧和缺氧程度等的检验手段，包括测定血液氧分压、二氧化碳分压和pH三个主要指标。 常用分析指标：1.血液pH 2.二氧化碳分压 3.氧分压
4.氧饱和度（SO2):指血液在一定的氧分压下，氧合血红蛋白（HbO2)占全部血红蛋白的百分比
5.实际碳酸氢盐(AB)：实际血氧饱和度和二氧化碳分压条件下测得血浆中HCO3-的实际浓度
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生化复习题参考答案剖析
