产品编号 CAT:RY8001 保存条件
-20 ℃保存,有效期1年 产品组分
组分 2×Yeast PCR mix Yeast lysis buffer 产品概述
本试剂盒含有绿色染料,可在反应结束后直接进行电泳,能够快速扩增酵母中重组质粒目的基因片段,省时省力。Yeast lysis buffer用于破坏酵母的细胞壁;2×Yeast PCR mix含PCR buffer,dNTPs,MgCl2,热启动快速Taq酶,客户只需加入引物和模板/酵母菌落即可进行扩增,减少移液操作,提高了稳定性,且2×Yeast PCR mix中含有保护剂,反复冻融后仍可保持稳定性。PCR产物的3’端带有A,可直接用于TA克隆。 实验流程
1、吸取3-3.5 μl Yeast lysis buffer到PCR管中,用无菌枪头或牙签蘸取适量酵母菌至PCR管中。 2、吸打(搅拌)混匀后,置于98 ℃反应10-20 min。 3、再准备一支无菌PCR管,按下表配制反应体系。 PCR反应体系:
2×Yeast PCR mix primer F(10 μM) primer R(10 μM) template* ddH2O * 步骤2的反应液短暂离心,混匀后吸取1 μl作为模板,为佳 PCR反应条件:
反应温度 95 ℃ 95 ℃ Tm 72 ℃ 72 ℃ 4 ℃ 反应时间 3 min 15 sec 15 sec 15 sec /kb 5 min ∞ 1 1 循环 1 30-32 25 μl 2 μl 2 μl 1 μl to 50 μl RY8001-01 1 ml 200 μl RY8001-02 1 ml*2 400 μl RY8001-03 1 ml*8 1.6 ml * 该退火温度根据引物的Tm值进行调整,一般设置Tm -5 ℃ 案例:
图注:从SD/-Leu-Trp-His-Ade培养基中挑取酵母菌落直接进行酵母菌落PCR
南京瑞源生物技术有限公司坐落于南京市栖霞区生命科技园,专注于基因组高通量研究领域,致力于生物高科技研发,目前产品的技术水平已达到省级实验水平,瑞源生物立足于生命科学,为基础研究领域科学工作者提供生物学技术服务,自2019年创立以来,全体员工致力于利用酵母系统研发新药物靶点,专注于生物学研究,长期与全国各大农林/医药院校在大型科研技术研发上紧密合作。
酵母菌落PCR试剂盒使用指南
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