产品编号 CAT：RY8001 保存条件
-20 ℃保存，有效期1年 产品组分
组分 2×Yeast PCR mix Yeast lysis buffer 产品概述
本试剂盒含有绿色染料，可在反应结束后直接进行电泳，能够快速扩增酵母中重组质粒目的基因片段，省时省力。Yeast lysis buffer用于破坏酵母的细胞壁；2×Yeast PCR mix含PCR buffer，dNTPs，MgCl2，热启动快速Taq酶，客户只需加入引物和模板/酵母菌落即可进行扩增，减少移液操作，提高了稳定性，且2×Yeast PCR mix中含有保护剂，反复冻融后仍可保持稳定性。PCR产物的3’端带有A，可直接用于TA克隆。 实验流程
1、吸取3-3.5 μl Yeast lysis buffer到PCR管中，用无菌枪头或牙签蘸取适量酵母菌至PCR管中。 2、吸打（搅拌）混匀后，置于98 ℃反应10-20 min。 3、再准备一支无菌PCR管，按下表配制反应体系。 PCR反应体系：
2×Yeast PCR mix primer F（10 μM） primer R（10 μM） template* ddH2O * 步骤2的反应液短暂离心,混匀后吸取1 μl作为模板，为佳 PCR反应条件：
反应温度 95 ℃ 95 ℃ Tm 72 ℃ 72 ℃ 4 ℃ 反应时间 3 min 15 sec 15 sec 15 sec /kb 5 min ∞ 1 1 循环 1 30-32 25 μl 2 μl 2 μl 1 μl to 50 μl RY8001-01 1 ml 200 μl RY8001-02 1 ml*2 400 μl RY8001-03 1 ml*8 1.6 ml * 该退火温度根据引物的Tm值进行调整，一般设置Tm -5 ℃ 案例：
图注：从SD/-Leu-Trp-His-Ade培养基中挑取酵母菌落直接进行酵母菌落PCR
南京瑞源生物技术有限公司坐落于南京市栖霞区生命科技园，专注于基因组高通量研究领域，致力于生物高科技研发，目前产品的技术水平已达到省级实验水平，瑞源生物立足于生命科学，为基础研究领域科学工作者提供生物学技术服务，自2019年创立以来，全体员工致力于利用酵母系统研发新药物靶点，专注于生物学研究，长期与全国各大农林/医药院校在大型科研技术研发上紧密合作。
酵母菌落PCR试剂盒使用指南
