奶牛原代乳腺上皮细胞的培养及β酪蛋白mRNA的表达

奶牛原代乳腺上皮细胞的培养及β酪蛋白mRNA的表达

蒲俊华1,2，朱小瑞1，绪 欣1，卢徐斌1，毛永江1，杨章平1* (1.扬州大学动物科学与技术学院，扬州 225009；2.江苏省家禽科学研究所，扬州 225125) 【摘 要】本试验旨在建立原代乳腺上皮细胞系的体外培养方法，并进行β酪蛋白mRNA的表达验证。取新鲜泌乳期的乳腺组织，采用组织块法培养纯化原代乳腺上皮细胞，利用显微镜观察细胞形态并进行细胞生长计数，采用实时荧光定量PCR技术检测β酪蛋白mRNA表达。结果显示，纯化培养的原代乳腺上皮细胞集聚成岛屿状生长，具有典型的铺路石和鹅卵石形状，细胞生长曲线呈“S”形，符合一般细胞的生长规律，并成功表达β酪蛋白mRNA。综上所述，本研究采用组织块法成功培养出具有正常生理功能的奶牛原代乳腺上皮细胞，为后续的乳腺上皮细胞功能研究提供了良好的细胞试验模型。 【期刊名称】中国畜牧兽医 【年(卷),期】2017(044)007 【总页数】7

【关键词】奶牛；原代；乳腺上皮细胞

奶牛乳腺炎是困扰世界奶牛业发展的重要疾病之一，严重影响奶牛产奶量和牛奶质量，造成严重的经济损失[1-2]。奶牛乳腺炎可造成奶牛第一个泌乳期产奶量下降9%，第二个泌乳期产奶量减少达11%[3]；在美国,奶牛乳腺炎影响1/3的奶牛，经济损失超过20亿美元;世界范围内造成的经济损失可达350亿美元[4-5]。奶牛乳腺炎依然是当前的研究重点和热点。

奶牛乳腺上皮细胞是抵抗病原菌入侵乳腺的第一道防线，激发奶牛乳腺炎的自然免疫应答，并参与调控病程发展[6-8]。奶牛原代乳腺上皮细胞具有二倍体遗