动物细胞培养和核移植技术
【教学目标】
1．简述动物细胞培养的过程、条件及应用。
2．简述通过动物体细胞核移植技术克隆动物的过程和应用前景。 3．举例说出动物细胞融合与单克隆抗体的原理和应用。
【教学重难点】
1．动物细胞培养的过程及条件。
2．用动物体细胞核移植技术克隆动物的过程。 3．单克隆抗体的制备和应用。
【教学方法】
诱思法、分析法、归纳法。
【教学过程】
一、引入新课
利用植物细胞可以培育成植物体，那么，你利用动物细胞能不能大量繁殖动物体，以提高繁殖率呢？这节课我们来学习动物细胞工程。 二、进行新课
动物细胞工程的常用技术手段有哪些？最基础的技术手段是什么？
动物细胞培养、动物细胞核移植、动物细胞融合、生产单克隆抗体等。最基础的技术手段是动物细胞培养。
1．动物细胞培养
概念：从动物机体中取出相关的组织，将它分散成单个细胞，然后，放在适宜的培养基中，让这些细胞生长和增殖。
（1）需分散成单个细胞；（2）需要在培养基上培养；（3）动物细胞培养的实质是细胞增殖。
2．动物细胞培养的过程：（学生自学总结） 取动物组织块
↓剪碎、胰蛋白酶处理 分散成单个细胞 ↓
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细胞悬液 ↓转入培养液 原代培养
↓胰蛋白酶处理 传代培养
问题：什么是细胞贴壁？什么是接触抑制？
悬液中分散的细胞很快就贴附在有丝分裂，称为细胞贴壁。当贴壁细胞分裂生长到表面相互接触时，细胞就会停止分裂增殖，这种现象称为细胞的接触抑制。
问题：如何打破接触抑制？
需要重新用胰蛋白酶等处理，然后分别继续培养，让细胞继续增殖。 问题：细胞传代培养代数有什么特点？
传代培养的细胞一般传至10代后就不易传下去了，一般来说，细胞在传至10～50代左右时，增殖会逐渐缓慢，以至于完全停止，这时部分细胞的细胞核型可能发生变化，当继续传代培养时，少部分细胞会克服细胞寿命的自然极限，获得不死性。所以目前使用的或冷冻保存的正常细胞通常为10代以内，以保持细胞正常的二倍体核型。
3．动物细胞培养的条件 （1）无菌、无毒的环境。
（2）营养：合成培养基成分包括糖、氨基酸、促生长因子、无机盐、微量元素等，通常还需加入血清、血浆等一些天然成分。
（3）温度和pH：适宜温度一般与动物的体温相近；pH为7.2～7.4。 （4）气体环境：95％空气和5％CO2混合气体。 问题：如何保证无菌、无毒环境？
（1）对培养液和所有培养用具进行无菌处理；（2）通常还需要在细胞培养液中添加一定量的抗生素；（3）应定期更换培养液，以便清除代谢产物，防止细胞代谢产物积累对细胞自身造成危害。
4．动物细胞培养技术的应用
（1）可大规模生产一些有重要价值的生物制品。 （2）培养的动物细胞可作为基因工程中常用的受体细胞。
（3）培养的动物细胞可用于检测有毒物质，判断某种物质的毒性（根据变异率）。 （4）培养正常或病变细胞，用于生理、病理、药理等方面的研究。
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人教版生物选修3：2.2.1 动物细胞培养和核移植技术 教案1
