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分光光度计的原理与应用解析

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(3)按“3”键可看到标准曲线、曲线方程及相关系数,将线性方程及相关系数记录在原始记录本上,按“RETURN”键返回定量测量参数设置界面。

(4)按“F3”键进入试样池设置→再按“1”键选择试样池为5联池→按“2”键可利用数字键对样品池数进行设置,输入完成后按“ENTER”键→继续按“3”键选择一号池空白校正为“否”→按“4”键对移动试样池数进行设置,按“RETURN”键返回到定量测量画面→在一号池位置放入空白溶液,按“A/Z”键对当前工作波长进行零吸光度校正,将测量的样品依次放入设定的使用样品池中,继续按“START/STOP”键测量样品的浓度值。 4.结束

测量结束将比色皿用去离子水冲洗干净倒置晾干,清理台面,关闭电源开关,并及时填写相关记录。

六、紫外分光光度计使用时的注意事项

1.比色皿使用时注意不要沾污或将比色皿的透光面磨损,应手持比色皿的毛面。

2.待测液制备好后应尽快测量,避免有色物质分解,影响测量结果。 3.测得的吸光度A最好控制在0.2~0.8之间,超过1.0时要做适当稀释。 4.开关试样室盖时动作要轻缓。

5.不要在仪器上方倾倒测试样品,以免样品污染仪器表面,损坏仪器。 6.比色皿在盛装样品前,应用所盛装样品冲洗两次,测量结束后比色皿应用蒸馏水清洗干净后倒置晾干。若比色皿内有颜色挂壁,可用无水乙醇浸泡清洗。 7.向比色皿中加样时,若样品流到比色皿外壁时,应以滤纸點干,镜头纸擦净后测量,切忌用滤纸擦拭,以免比色皿出现划痕。 8.测定紫外波长时,需选用石英比色皿。

9.测量过程中不可打开测量室的窗门,否则会影响测量结果的准确性。 七、应用

1.生物医药上的应用

可利用分光光度计进行氨基酸含量的测定、测量未知蛋白溶液的浓度及含量、新生儿血清胆红的测定以及蛋白质与核酸的结构分析等。 2.印染上的应用

可以测定纺织品上的甲醛含量、染料对织物的上染百分率、测定蛋白助剂在

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织物上的均匀程度、测定整理在织物上助剂的浓度、测吸附速率曲线、半吸附时间、吸附饱和值、平衡吸附量、测吸附量与K/S值的关系、吸附助剂量与其他性能的关系(如防毡缩)等。 3.药品分析中的应用.

我国和世界上许多国家的药典都明确规定, 许多药品都要求用紫外可见分光光度计作质量控制。因此, 紫外可见分光光度计已是制药行业和药检行业必备的分析仪器。且规定, 用于药品质控的紫外可见分光光度计, 光谱带宽要求2nm 以下。紫外可见分光光度计在药品检测中的应用已经非常广泛。其中, 使用紫外可见分光光度计分析最多的药物有: 维生素、抗生素、解热药、去痛药、降血压药、安定药、镇咳药、滴眼药、磺胺类药、利尿药、某些妇科药、痢疾药、腹泻药、抗肿瘤药、抗结核药等。 4.石油油品分析

在石油开采、加工过程中, 石油有可能造成污染。在石油工业生产污水中,一般将排水中石油含量规定为10mg/ L。而在地面水中, 最高允许石油含量为0.1~0.3mg/ L。一般石油炼油厂中, 石油所含的芳烃组成是相对稳定的, 所测得标准油品的吸收峰, 都在221~225nm 和251~255nm 处。石油的两个特征吸收峰(225nm 和254nm) 是测定炼油厂污水中的含油量时要选用的吸收波长。另外, 轻油组分( 初馏约180℃) 几乎无明显紫外特征吸收, 而中油( 180~250℃) 和重油(250~280℃) , 以及蒽油( > 280℃) 等组分在225nm 处吸收较强。它代表了石油成分的主峰, 在254nm 处吸收较弱, 有时显示出某种重质油品的特性。这些分析工作, 都用紫外可见分光光度计来进行。还有, 在炼油过程中, 石油在320nm 附近有一个芳烃杂质, 也是必须要用紫外可见分光光度计来检测的。因此, 紫外可见分光光度计是石油工业中非常重要的质量控制仪器。 5.环境中有害物质检测

环境( 包括空气、水、土壤) 中许多的对人有毒有害物质的检测, 都用到紫外可见分光光度计, 如检测自来水中的木素磺酸、木质素、单宁、表面活性剂、黄腐酸、酚类、苯胺类、硝基酚类化合物等对人体有毒害的物质。有些自来水中, 含有氨氮、亚硝酸盐、总酚、总苯胺、硝基酚类等对人体有毒害的物质, 一般也是用紫外可见分光光度计来检测。 6.饲料工业中的应用

饲料的原料、添加剂、混合饲料等中的维生素A、维生素C、维生素E、维生素K、山梨酸、苯甲酸、棉酸、甲酯、乙酸酯、胡萝卜素、烟酸、总氨基酸等微

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量元素钾、铁、硒、碘、铜、磷、锰等都经常用紫外可见分光光度计来检测,常用饲料添加剂中的皮蝇磷、磺胺类药物、灰黄霉素、二甲硝咪唑, 以及普鲁卡因等的测定, 基本上也都可用紫外可见分光光度计来进行检测。 7.农药及其残留物分析

施加的农药进入土壤中, 一部分被农作物吸收( 如六六六可被胡萝卜、花生等吸收)、一部分进入大气、一部分流入水中。农药残留包括农药原体、农药的有毒代谢物、农药的降解物和杂质。人们往往只把农药原体看成农药残留量, 忽略了农药原体的代谢物、降解物和杂质。其实, 代谢物、降解物的毒性与原药一样或更严重。例如, 滴滴涕的代谢物为滴滴依, 工业六六六的代谢物为乙体六六六, 农药1605 的代谢物为1601 , 这些代谢物的毒性都比原体更强。杀虫脒的代谢物的毒性, 比原药大10 倍。许多农药对人体的危害非常大, 如六六六和滴滴涕对人的肝脏组织和肝功能的损害很大, 会引起血液细胞染色体突变, 有机氯农药能透过胎盘进入胎儿体内, 危害胎儿。有机磷农药、氨基甲酸酯类农药等是神经毒物, 它抑制血液和组织中的乙酰胆碱酯酶的活性, 引起神经功能混乱、出汗、精神错乱、语言失常等病症。所以现在人们都很注重对农药及其残留物的检测。

8.水产品质量控制

紫外可见分光光度计在海水、淡水鱼类、贝类、虾类、海蜇类等的质量控制中已得到非常广泛的应用。如苯、总三卤甲烷、甲苯基三唑、多氯联苯、氟、汞等, 目前都采用紫外可见分光光度计作质量控制。因此, 紫外可见分光光度计将是渔业中必不可少的分析工具。

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分光光度计的原理与应用解析

(3)按“3”键可看到标准曲线、曲线方程及相关系数,将线性方程及相关系数记录在原始记录本上,按“RETURN”键返回定量测量参数设置界面。(4)按“F3”键进入试样池设置→再按“1”键选择试样池为5联池→按“2”键可利用数字键对样品池数进行设置,输入完成后按“ENTER”键→继续按“3”键选择一号池空白校正为“否”→按“4”键对移动试样池数进行设置,按“RETURN”键返回到
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