西安工程大学 可见分光光度计的原理与应用 院系：纺织与材料学院 专业班级：轻化工程10（3） 姓名：刘荣 学号：41001020228
紫外可见分光光度计的原理与应用
分光光度计就是利用分光光度法对物质进行定量定性分析的仪器。它是现代实验室检测用的常规仪器。常用于核酸、蛋白定量以及细菌生长浓度的定量。在印染方面，我们可以用分光光度计测量染色时染料的上染百分率，以及整理在织物上助剂的浓度，还可以用于颜色的测量。同时它还广泛地应用于食品检测、农药的检测及工业上石油的检测等。紫外可见分光光度计在实验中的应用非常广泛，故我们要熟悉并掌握它的原理及应用。 一、分光光度计的组成
各种型号的可见分光光度计，就其基本结构来说，都是由五个基本部分组成，即光源、单色器、吸收池、检测器及信号指示系统。
光源 单色器 吸收池 检测器 信号显示系统 可见分光光度计的组成结构示意图
1.光源
在紫外可见分光光度计中，常用的光源有两类：热辐射光源和气体放电光源。热辐射光源用于可见光区，如钨灯和卤钨灯；气体放电光源用于紫外光区，如氢灯和氘灯。 2．单色器
单色器的主要组成：入射狭缝、出射狭缝、色散元件和准直镜等部分。单色器质量的优劣，主要决定于色散元件的质量。色散元件常用棱镜和光栅。 3.吸收池
吸收池又称比色皿或比色杯，按材料可分为玻璃吸收池和石英吸收池，前者不能用于紫外区。吸收池的种类很多，其光径可在0.1～10cm之间，其中以1cm光径吸收池最为常用。 4、检测器
检测器的作用是检测光信号，并将光信号转变为电信号。现今使用的分光光度计大多采用光电管或光电倍增管作为检测器。
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5、信号显示系统
常用的信号显示装置有直读检流计，电位调节指零装置，以及自动记录和数字显示装置等。 二、分光计的分类
国际上一般按紫外可见分光光度计的仪器结构将其分为单光束、准双光束、双光束和双波长四类。
单光束可见分光光度计光度准确度差。常见的721、751、753、754 等可见分光光度计都是单光束仪器，因为他们的分析误差较大，所以, 它们在使用上受到限制。一般来讲, 对要求较高的制药行业、质量检验行业、科研等行业不适宜使用单光束紫外可见分光光度计。
准双光束紫外可见分光光度计有两种类型: 一种是两束单色光, 一只比色皿, 两只光电转换器; 另一种是一束单色光, 一束复合光, 一只比色皿, 两只光电转换器。常见类型有TU-1800、TU-1800S、TU-1800PC、TU-1800SPC、UV-762、UV-1600 等。
双光束紫外可见分光光度计就是有两束单色光的紫外可见分光光度计。它有两种类型: 一种是两束单色光, 两只比色皿, 两只光电转换器; 另一种是两束单色光, 两只比色皿, 一只光电转换器。目前, 国内外的双光束紫外可见分光光度计中, 两只光电转换器的双光束紫外可见分光光度计仪器已很少见。
双波长紫外可见分光光度计都采用两个单色器。光源发出的光被两个单色器分别分离出波长为λ1 和λ2, 通过斩波器将两束单色光λ1 和λ2 交替入射到同一试样中, 光电倍增管交替地接收到经过试样吸收后的这两束单色光, 并把它们变成电信号。常见的类型有WFZ800-5，UV-265。 三、原理及测试方法
原理：朗伯-比尔定律：当一束平行单色光通过含有吸光物质的稀溶液时，溶液的吸光度与吸光物质浓度、液层厚度乘积成正比，即
A= εLc
式中比例常数ε与吸光物质的本性，入射光波长及温度等因素有关。c为吸光物质浓度，L为透光液层厚度。 测试方法：
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分光光度计的原理与应用解析
