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2019年攻读硕士学位研究生入学考试试题参考答案 科目名称：分子生物学（□A卷■B卷）科目代码：616 注意：所有答题内容必须写在答题纸上，写在试题或草稿纸上的一律无效；考完后试题随答题纸交回。 一、将下列名词翻译成中文，并简要解释 (共6小题，每小题5分，共30分) 1. Transcription：转录：生物体以DNA为模板合成RNA的过程称为转录。 2. TATA box：TATA盒：在真核生物RNA聚合酶II转录单位起始点前25bp处发现的保守的富含AT的七联体，可能涉及RNA聚合酶的正确起始定位。 3. RNA interference：RNA干扰：siRNA是一类长21-25个核苷酸的双链RNA，产生于病毒感染或其他双链RNA诱导以后，其功能是引起特异的靶mRNA降解，以维持基因组稳定，保护基因组免受外源核酸入侵和调控基因表达等，这一细胞反应过程叫做RNA干扰（RNAi）。 4. Missense mutation：错义突变：基因突变使某一密码子编码的氨基酸发生改变，多肽链中的氨基酸序列相应改变。 5. Ribosomal binding site：核糖体结合位点：细菌mRNA上的含起始密码子的序列，在蛋白质合成的起始阶段，它能被30S亚基结合。 6. Northern blot hybridization: Northern杂交：是一种将RNA从琼脂糖凝胶中转印到硝酸纤维素膜上的方法。主要用于检测某一组织或细胞中已知的特异mRNA的表达水平以及比较不同组织和细胞的同一基因的表达情况。 第 1 页 共 7 页
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二、简答题(共6小题，每小题15分，共90分) 1. 简述真核生物转录水平的调控机制。 答：真核生物在转录水平的调控主要是通过反式作用因子,顺式作用元件和RNA聚合酶的相互作用来完成的，主要是反式作用因子结合顺式作用元件后影响转录起始复合物的形成过程。 （1）转录起始复合物的形成：真核生物RNA聚合酶识别的是由通用转录因子与DNA形成的蛋白质-DNA复合物,只有当一个或多个转录因子结合到DNA上,形成有功能的启动子,才能被RNA聚合酶所识别并结合.转录起始复合物的形成过程为:TFⅡD结合TATA盒;RNA聚合酶识别并结合TFⅡD-DNA复合物的结合；促进或抑制转录起始复合物的形成。（5分） （2）反式作用因子：一般具有三个功能域(DNA识别结合域,转录活性域和结合其他蛋白结合域)；能识别并结合上游调控区中的顺式作用元件；对基因的表达有正性或负性调控作用。（5分） （3）转录起始的调控: 1）反式作用因子的活性调节:a、表达式调节——反式作用因子合成出来就具有活性；b、共价修饰——磷酸化和去磷酸化,糖基化;c、配体结合——许多激素受体是反式作用因子;d、蛋白质与蛋白质相互作用——蛋白质与蛋白质复合物的解离与形成。2）反式作用因子与顺式作用元件的结合:反式作用因子被激活后,即可识别并结合上游启动元件和增强子中的保守性序列,对基因转录起调节作用。3）反式作用因子的作用方式——成环,扭曲,滑动,Oozing.4) 反式作用因子的组合式调控作用:每一种反式作用因子结合顺式作用元件后虽然可以发挥促进或抑制作用，但反式作用因子对基因调控不是由单一因子完成的而是几种因子组合发挥特定的作用。（5分） 2. 简述乳糖操纵子的结构及其正、负调控机制。 答：A、乳糖操纵子的组成：大肠杆菌乳糖操纵子含Z、Y、A三个结构基因，分别编码半乳糖苷酶、透酶和半乳糖苷乙酰转移酶，此外还有一个操纵第 2 页 共 7 页
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序列O，一个启动子P和一个调节基因I。（3分）B、阻遏蛋白的负性调节：没有乳糖存在时，I基因编码的阻遏蛋白结合于操纵子序列O处，乳糖操纵子处于阻遏状态，不能合成分解乳糖的三种酶；有乳糖存在时，乳糖作为诱导物诱导阻遏蛋白变构，不能结合于操纵序列，乳糖操纵子被诱导开放合成分解乳糖的三种酶。所以，乳糖操纵子的这种调控机制为可诱导的负调控。（6分）C、CAP的正性调节：在启动子上游有CAP结合位点，当大肠杆菌从以葡萄糖为碳源的环境转为以乳糖为碳源的环境时，cAMP浓度升高，与CAP结合，使CAP发生变构，CAP结合于乳糖操纵子启动序列附近的CAP结合位点，激活RNA聚合酶活性，促进结构基因转录，调节蛋白结合于操纵子后促进结构基因的转录，对乳糖操纵子实行正调控，加速合成分解乳糖的三种酶。D、协调调节：乳糖操纵子中的I基因编码的阻遏蛋白的负调控与CAP的正调控两种机制，互相协调、互相制约。（6分） 3. 简述Sanger双脱氧链终止法的原理。 答：原理是采用核苷酸链终止剂—2，，3，-双脱氧核苷酸终止DNA的延长。由于它缺少形成3/5/磷酸二脂键所需要的3-OH，一旦参入到DNA链中，此DNA链就不能进一步延长。（5分）根据碱基配对原则，每当DNA聚合酶需要dNMP参入到正常延长的DNA链中时，就有两种可能性，一是参入ddNTP,结果导致脱氧核苷酸链延长的终止；二是参入dNTP,使DNA链仍可继续延长，直至参入下一个ddNTP。根据这一方法，就可得到一组以ddNTP结尾的长短不一的DNA片段。（7分）方法是分成四组分别为ddAMP、ddGMP、ddCMP、ddTMP反应后，聚丙烯酰胺凝胶电泳按泳带可读出DNA序列。（3分） 4. DNA在复制过程中如何保持准确性？ 答：双链DNA的复制是一个非常复杂的过程，在复制的起始、延伸、终止三个阶段，无论是原核生物还是真核生物都需要有多种酶和蛋白质的协同参与。（5分） 第 3 页 共 7 页
武汉科技大学616 分子生物学-2019(B卷)答案
