检验科生化抗环瓜氨酸肽CCP抗体的检测标准操作规程

由天下分享时间：2025/2/23 18:25:01 加入收藏我要投稿点赞

抗环瓜氨酸肽抗体的检测标准操作规程

【目的】

体外检测血清抗环瓜氨酸抗体（CCP）。【职责】

1.实验室工作人员均应熟知并严格遵守本SOP，室负责人监督落实。 2.本SOP的改动，可由任一使用本SOP的工作人员提出，并报经下述人员批准签字：室负责人、科主任【标本类型及实验前准备】

1.静脉采血不加抗凝剂,自然析出的血清析出血清体积应在200ul以上。 2.血清样本可在2-8℃保存一周否则需保存在-20℃以下勿反复冻融。 3.严重溶血和高脂血清的样本不宜。【检验原理】

采用胶体金免疫层析技术,以间接法检测血清中的自身抗体,其原理:以硝酸纤维素膜作为固相载体,分别在检测区(T)和质控区(C)划线包被CCP抗原和质控物组成层析膜。测试时,样本滴入加样孔后,血清中的lgG与包被在聚酯膜上的胶体金标记的抗体结合,结合物随之在毛细效应下横向层析。当血清中含有特异性抗CCP抗体时,泳动到T线时被CCP抗原捕获,出现阳性条带,游离标记物继续向前移动与结合标记物自动分离,泳动至质控区被捕获形成阳性质控线(C),判为阳性结果。若样本中不含抗CCP抗体, 则检测线(T)线处不发生特异性结合反应,胶体金标记物继续层析向前与包被于质控线(C)处质控抗体结合而形成阳性条带,多余的金标记物继续层析到吸水垫上,因此仅在质控线(C)上出现阳性条带,判为阴性结果。作为质控线(C),无论T线是否出现条带,若C线未出现条带,则判试纸条无效。

【主要组成成分】

卡型: 1.抗环瓜氨酸肽(CCP)抗体胶体金检测板(结合垫、样品垫、PVC胶板、层

析膜、吸水垫、塑料卡)

2.干燥剂

3.一次性塑料吸管和使用说明书【储存条件】

试剂盒自生产之日起应于4-30℃避光保存,不得冻存,自检定合格之日起有效期为18个月。【检验方法】一、准备工作

1.样本按照上述要求准备,冻存的血清样本需在室温平衡30分钟恢复至室温。 2.从包装袋中取出抗环瓜氨酸肽(CCP)抗体胶体金检测板试纸条尽快的进行检测,如果室温高于30℃或者室内湿度较高的情况下应尽快完成检测。二、实验步骤

1.将检测板摆放在试验台上,使用一次性塑料吸管吸取血清样本,逐滴滴入4滴样本至检测板的加样孔中或试纸条的样品垫下端；避免气泡加入导致加样体积误差。

2.5分钟后判读结果,并做好记录,最长不超过8分钟,8分钟后可能会出现假阳性。

三、质量控制方法: 每次测试判读结果时观察质控线(C),无论T线是否出现条带, 现条带,则判试纸条无效。须重新进行实验,每份样本复测可以提高实验结果的可靠性。

【检验结果的解释】

正常人为阴性,即血清中抗CCP抗体浓度小于25RU/ml试剂盒最低阳性检出量应不高于50RU/m,当血清中抗体浓度高于此值时,结果为阳性但该试剂盒为定性产品,在浓度位于临界值附近时,其结果可能出现阴性或阳性临床敏感性与特异性。【产品性能】