重组Mash1慢病毒表达载体的构建
张瑞;许予明;赵国强;郭建新;宋波;张世杰;韩志强
【期刊名称】《神经损伤与功能重建》 【年(卷),期】2006(001)002
【摘要】目的:克隆小鼠Mash1基因的全长cDNA,构建其慢病毒表达载体Lentivirus-Mash1, 为进一步研究Mash1在神经发育及干细胞神经分化中的作用奠定基础. 方法: 应用RT-PCR从小鼠13 d胚胎中扩增出Mash1 cDNA片段,经回收纯化与pGEM-T载体连接并转化感受态细菌JM109,通过蓝白筛选、PCR扩增和双酶切鉴定出阳性菌落,并对其进行基因测序.BamHⅠ和XholⅠ双酶切pGEM-T-Mash1和Lentivirus获得的目的基因双粘片段与Lentivirus双粘线性质粒相连接,转化JM109,酶切方法鉴定重组阳性菌落.结果:PCR扩增、酶切分析及序列测定证实成功获取Mash1cDNA克隆;酶切鉴定证实Lentivirus-Mash1含有大小正确的正向Mash1cDNA片段.结论:成功建立了小鼠Mash1cDNA克隆并构建了慢病毒表达载体Lentivirus-Mash1. 【总页数】3页(105-107)
【关键词】Mash1;慢病毒表达载体;RT-PCR
【作者】张瑞;许予明;赵国强;郭建新;宋波;张世杰;韩志强
【作者单位】郑州大学第一附属医院神经内科,郑州,450052;郑州大学第一附属医院神经内科,郑州,450052;郑州大学基础医学院微生物与免疫学教研室,郑州,450052;郑州大学第一附属医院神经内科,郑州,450052;郑州大学第一附属医院神经内科,郑州,450052;郑州大学基础医学院微生物与免疫学教研室,郑州,450052;郑州大学第一附属医院临床药学部,郑州,450052
重组Mash1慢病毒表达载体的构建
