2010选修1《生物技术实践》一轮复习知识梳理
专题1 传统发酵技术的应用
课题1 果酒和果醋和制作
【补充知识】发酵
1、概念：利用微生物或其他生物的细胞在有氧或无氧条件下繁殖或积累其代谢产物的过程。 2、类型：
（1）根据是否需要氧气分为：需氧发酵和厌氧发酵。
（2）根据产生的产物可分为：酒精发酵、乳酸发酵、醋酸发酵等。 一、基础知识
（一）果酒制作的原理
1．菌种是酵母菌，属于真核生物，新陈代谢类型异养兼性厌氧型，有氧时，进行有氧呼吸，大
6CO+12HO+能量；无氧时，能进行酒精发酵，反量繁殖，反应式为：C6H12O6+6H2O+6O2 酶→22
应式为：C6H12O6 → 2C2H5OH+2CO2+能量。
2．酵母菌繁殖的最适温度20℃左右，酒精发酵一般控制在18～25℃。
3．自然发酵过程中，起作用的主要是附着于葡萄皮上的野生型酵母菌。也可以在果汁中加入人工培养的酵母菌。
（二）果醋制作的原理
1．菌种是醋酸菌，属于原核生物，新陈代谢类型为异养需氧型。只有在氧气充足时，才能进行旺盛的生命活动。变酸的酒表面观察到的菌膜就是醋酸菌在液面大量繁殖形成的。
2．当氧气、糖源都充足时，醋酸菌将葡萄汁中的糖分解成醋酸，当缺少糖源时，醋酸菌将乙醇变为乙醛，再将乙醛变为醋酸，反应简式为C2H5OH+O2 → CH3COOH+H2O。 3．醋酸菌的最适合生长温度为30～35℃。
4．菌种来源：到生产食醋的工厂或菌种保藏中心购买，或从食醋中分离醋酸菌。 二、实验设计 1、流程图
挑选葡萄 ? 冲洗 ? 榨汁 ? 酒精发酵 ? 醋酸发酵
酶 酶
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2、制作实例 实验材料
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果酒 果醋
葡萄、榨汁机、纱布、醋酸菌（或醋曲）、发酵瓶（如右图）、气泵、体积分数为70%的酒精等。 实验步骤
1．对发酵瓶、纱布、榨汁机等实验用具进行清洗并消毒。先用温水反复冲洗几次，再用体积分数为70%的酒精擦拭消毒，晾干待用。 2．取葡萄500g，去除枝梗和腐烂的子粒。
3．用清水冲洗葡萄1－2遍除去污物。（注意不要反复多次冲洗。）
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4．用榨汁机榨取葡萄汁后，将其装入发酵瓶中。（如果没有合适的发酵装置，可用500mL的塑料瓶替代。但注入的果汁量不要超过塑料瓶总体积的2/3。） 5．将发酵瓶置于适宜的温度（18－25℃）下发酵。
6．由于发酵旺盛期CO2的产量非常多，因此需要及时排气，以防止发酵瓶爆裂。（如果是简易发酵装置，每天拧松瓶盖2～4次。进行排气。）
7．10天后，取样检验。例如，可以检验酒味、酒精的含量、进行酵母菌的镜检等工作。 8．当果酒制成以后，可在发酵液中加入醋酸菌（或醋曲），然后移至30－35℃条件下发酵，适时用气泵向发酵液中充气。（如果没有充气装置，可以将瓶盖打开，在瓶口上盖上纱布。） 三、课题延伸
果汁发酵后是否有酒精产生，可以用重铬酸钾来检验。在酸性条件下，重铬酸钾与酒精反应呈现灰绿色。
检测时，先在试管中加入发酵液2mL，再滴入物质的量的浓度为3mol/L的H2SO43滴，振荡混匀，最后滴加常温下饱和的重铬酸钾溶液3滴。
课题2 腐乳的制作
一、基础知识 腐乳制作的原理
1．腐乳的发酵有多种微生物的协同作用，其中起主要作用的是毛霉，它是一种真核生物，新陈代谢类型是异养需氧型。
2．毛霉等微生物产生的蛋白酶可以将豆腐中的蛋白质分解成小分子的肽和氨基酸；脂肪酶可以将脂肪水解成甘油和脂肪酸。
3．现代的腐乳生产是在严格的无菌条件下，将优良毛霉菌种直接接种在豆腐上，这样可以避免其他菌种的污染，保证产品的质量。 二、实验设计 1、实验流程
让豆腐长出毛霉→加盐腌制→加卤汤装瓶→密封腌制。
2、制作实例
实验材料：含水量70%的豆腐，粽叶，盘子，盐，黄酒，米酒，糖，香辛料等，广口玻璃瓶，高压锅等。 实验步骤
1．将豆腐切成3cm×3cm×1cm若干块。
2．将豆腐块平放在铺有干粽叶的盘内（粽叶可以提供菌种，并能起到保温的作用），每块豆腐等距离排放，周围留一定的空隙。豆腐上面再铺上干净的粽叶。气候干燥时，将平盘用保鲜膜包裹，但不要封严，以免湿度太高，不利于毛霉的生长。
3．将平盘放在温度为15～18 ℃的地方，毛霉逐渐生长，大约5d后，豆腐表面丛生直立菌丝。
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4．当毛霉生长旺盛，并呈淡黄色时，去除保鲜膜及铺在上面的粽叶，使豆腐块的热量和水分能够迅速散失，同时散去霉味，这一过程一般持续36h以上。
5．豆腐凉透后，将豆腐间的连在一起的菌丝拉断，并整齐排在容器内，准备腌制。
6．长满毛霉的豆腐块（以下称毛坯）分层摆放，分层加盐，并随层高而增加盐量，在接近瓶口表面盐要铺厚一些，以防止杂菌污染，约腌制8d。（豆腐与盐质量分数比为5︰1）
7．将黄酒、米酒和糖、香辛料等混合制成卤汤。卤汤酒精含量控制在12%左右为宜。
8．将广口玻璃瓶刷洗干净，用高压锅在1000C蒸汽灭菌30min，将腐乳成坯摆入瓶中，加入卤汤和辅料后，将瓶口用酒精灯加热灭菌，用胶条密封。在常温下，一般六个月即可以成熟。 三、操作提示
（一）控制好材料的用量
1、用盐腌制时，注意控制盐的用量。盐的浓度过低，不足以抑制微生物的生长，可能导致豆腐腐败；盐的浓度过高，会影响腐乳的口味。
2、乳汤中酒的含量应控制在12%左右。酒精含量过低，不足以抑制微生物生长，可能导致豆腐腐败；酒精含量过高，腐乳成熟的时间将会延长。 （二）防止杂菌污染
1、用来腌制腐乳的玻璃瓶，刷干净后要用沸水消毒。
2、装瓶时要迅速小心；加入乳汤后要用胶条将瓶口密封；封瓶时，最好将瓶口通过酒精灯的火焰，防止瓶口被污染。
专题4 酶的研究与应用
课题1 探讨加酶洗衣粉的洗涤效果
一、基础知识
1．加酶洗衣粉是指含有酶制剂的洗衣粉，目前常用的酶制剂有四类：蛋白酶、脂肪酶、
淀粉酶和纤维素酶。其中，应用最广泛、效果最明显的是碱性蛋白酶和碱性脂肪酶。碱性蛋白酶能将血渍、奶渍等含有的大分子蛋白质水解成可溶性的氨基酸或小分子的肽，使污迹从衣物上脱落。同样道理，其他酶也是将大分子物质分解为小分子物质，从而使洗衣粉具有更好的去污能力。
2、使用加酶洗衣粉时，影响酶活性的因素有温度 、酸碱度、表面活性剂等，为此，科学家通过基因工程生产出了特殊的酶，并制成酶制剂，解决了这个问题。
3、加酶洗衣粉可以降低表面活性剂和三聚磷酸钠的用量，使洗涤剂朝低磷无磷的方向发展，减少对环境
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的污染。
二、实验设计
实例1．探究普通洗衣粉和加酶洗衣粉对衣物污渍的洗涤效果 实验原理：
加酶洗衣粉中含有一种或多种酶，可以将相应的大分子物质分解为小分子物质，从而使污迹容易从衣物上脱落，这是普通洗衣粉难以做到的。 实验材料
1000mL大烧杯2只，量筒，水浴锅，2块相同的污染布（同种布料、同样大小、滴入等量、同种的污染物），玻璃棒，秒表、普通洗衣粉、加酶洗衣粉等。 实验过程：
①取2只1000mL大烧杯，编号为1、2。
②用量筒分别量取500mL蒸馏水分别放入2只烧杯中，将烧杯放入400C的水浴锅中保温。
③将2块相同的污染布分别同时放入2只烧杯中浸泡相同时间，然后分别同时在1、2号烧杯中加入等量的普通洗衣粉和加酶洗衣粉。
④用玻璃棒同时、同样强度搅拌相同时间。
⑤观察并记录1、2号烧杯中污染布上的污迹残留情况。 （注：或分别将污迹洗净，记录洗涤所需时间。） 实例2．探讨温度对加酶洗衣粉洗涤的影响 实验原理：
酶的活性受温度影响，在最适温度时，酶的活性最高，高于或低于最适温度时，酶的活性下降。 实验材料
1000mL大烧杯4只、量筒、冰箱、水浴锅、4块相同的污染布（同种布料、同样大小、滴入等量、同种的污染物），玻璃棒，秒表、加酶洗衣粉等。 实验过程：
①取4只1000mL烧杯，，编号为1、2、3、4。
②用量筒分别量取500mL蒸馏水放入4只烧杯中，将烧杯分别放在50C、150C、250C、350C的冰箱或水浴锅中保温。
③将4块相同的污染布同时放入4只烧杯中浸泡相同时间，然后分别同时加入等量的同种加酶洗衣粉。 ④用玻璃棒同时、同样强度充分搅拌相同时间。
⑤观察并记录1、2、3、4号烧杯中污染布上的污迹残留情况。 （注：或分别将污迹洗净，记录洗涤所需时间。） 实例3．不同种类的加酶洗衣粉对同一污渍的洗涤效果
实验原理：不同种类的加酶洗衣粉所加的酶不同，而酶具有特异性，所以对不同污渍的洗涤效果不同。 实验材料
1000mL大烧杯5只、量筒、水浴锅、5块相同的污染布（同种布料、同样大小、滴入等量、同种的奶渍、油渍或番茄汁），玻璃棒，秒表、5种洗衣粉（蛋白酶洗衣粉、脂肪酶洗衣粉、淀粉酶洗衣粉、复合酶
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洗衣粉和普通洗衣粉）等。 实验过程：
（注：每个实验小组的污染布是同一类型的，若某小组的拿到的是滴入奶渍的污染布，请设计该小组的实验步骤。）
①取5只1000mL烧杯，，编号为1、2、3、4、5。
②用量筒分别量取500mL蒸馏水放入5只烧杯中，并将烧杯放在400C的水浴锅中保温。
③将4块滴入奶渍的污染布同时放入5只烧杯中浸泡相同时间，然后分别在1、2、3、4、5号烧杯中同时分别加入等量的蛋白酶洗衣粉、脂肪酶洗衣粉、淀粉酶洗衣粉、复合酶洗衣粉和普通洗衣粉。
④用玻璃棒同时、同样强度充分搅拌相同时间。
⑤观察并记录1、2、3、4、5号烧杯中污染布上的污迹残留情况，填入下表。
（注：或分别将污迹洗净，记录洗涤所需时间。） 组别 1 2 3 结果分析
思考：将不同小组的实验结果都作统计并记入上表后，可以得到哪些结论？
课题2 酵母细胞的固定化
课题背景
1、问题：酶对环境条件敏感，易失活；溶液中的酶很难回收，不能再次利用，提高了生产成本；反应后
的酶会混合在产物中，如不除去，会影响产品质量。 设想：将酶固定在不溶于水的载体上。
优点：使酶既能与反应物接触，又能与产物分离，同时，固定在载体上的酶还可以反复利用。 2、问题：一种酶只能催化一种化学反应，而在生产实践中，很多产物的形成都是通过一系列的酶促反应
才能得到的。 设想：将合成酶的细胞直接固定。 优点：成本更低，操作更容易。 一、基础知识
（一）固定化酶的应用实例
1、高果糖浆是指果糖含量为42%左右的糖浆，能将葡萄糖转化为果糖的酶是葡萄糖异构酶。
2、使用固定化酶技术，将这种酶固定在一种颗粒状的载体上，再将这些酶颗粒装到一个反应柱内，柱子底端装上分布着许多小孔的筛板。酶颗粒无法通过筛板的小孔，而反应溶液却可以自由出入。生产过程中，将葡萄糖溶液从反应柱的上端注入，使葡萄糖溶液流过反应柱，与固定化葡萄糖异构酶接触，转化成果糖，
污渍 类型 奶渍 油渍 番茄汁 洗衣粉类型 蛋白酶 洗衣粉 脂肪酶 洗衣粉 淀粉酶 洗衣粉 复合酶 洗衣粉 普通 洗衣粉 5
生物专业技术实践知识梳理解读
