打印报告、输出统计数值
9. 从屏幕上方File菜单中选择Print One，可以打印工作中实验文件。
10. 点选四象限统计表，从屏幕上方File菜单中选择Export Statistics可输出统计数值
至Excel档案。在出现方框中命名档案，并决定欲存放档案匣，点击Save。
11. 如欲接着分析存在同一档案匣之系列档案，可用鼠标以拖曳方式选取所有图表 (文件中所有图谱的四角会出现黑色方块，表示被选择上) ，接着从Plots菜单选择Next Data File，软件会自动以新档案来替换现有档案，您只要确认圈选范围、与 Quadrant Marker 的位置是否恰当，即可打印报告、或输出统计数值。
4.3 开启其它List Mode Data
12. 对于存在不同档案匣之系列档案，可用鼠标以拖曳方式选取所有图表 (文件中所有
图谱的四角会出现黑色方块，表示被选择上) ，接着从Plots菜单选择Change Data Files，并在随后出现之对话方框，选择所在新目录与欲分析档案。点击OPEN。可调整圈选区域，Markers界限，软件会重新计算、统计报告。
13. 常规使用之实验文件 (内含散点图、圈选区格、四象限分界、以及统计报告) ，我
们建议您将它另存新档 File – Save As，以备后需，分析其它档案便轻而易举。
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FACS101 Handbook
五、错误信号、疑难排除
5.1 仪器状态（Status）：
在CELLQuest菜单位于Cytometer菜单中。用来在收取的任何时候查看流式细胞仪的运行状态，以利解决仪器运行中出现的问题。
状态：显示仪器运行模式
Not Ready：激光器正在预热、鞘液桶空、废
液桶满。
Ready：样本管放置在进样区，且支撑臂位于中位，样本管加压，仪器在RUN
状态。
Standby：仪器在Standby 状态、或仪器在Run 状态而无样本管在进样区上、
或支撑架位于侧位、或样本管未完全加压。Standby时仪器的雷射电源降低。
5.2 常见故障排除程序
5.2.1 样品试管上不去
? ? ?
5.2.2 仪器处于N0T READY状况 检查以下情况：
? ? ? ?
5.2.3 仪器处于STANDBY状况（仪器失压）
如果仪器未加压，上样管放好后，虽然控制面板处于RUN模式，但仪器仍未能达到READY状况，此时仪器仍处于STANDBY状况。这可能是由于鞘液筒盖漏气、压力阀未加压，样本管不能被加压等原因造成的压力问题。此时，样本不能良好地进入流动室，无法检测。
FACS101 Handbook
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误用不适合的试管。（请用BD Falcon 352052）
试管支持架需调整。旋转调整试管支持架（顺时钟向下、逆时钟向上）。 Bal Seal 磨损。（汰换 Bal seal）
鞘液筒中的鞘液是否用完。 废液筒中的废液是否已装满。 开机需要5分钟时间预热。
鞘液筒的液面检测器连接是否松动、或未连接。
此时，检查以下情况： ? 压力阀未加压。
? 鞘液筒是否漏气（盖紧鞘液筒盖）。 ? 样本管是否有破损。
? 上样针上的Bal seal是否己磨损。 ? 鞘液筒上的蓝色接头是否连接好。
5.2.4 仪器讯号噪声过高
鞘液过滤器中有气泡，仪器记录了气泡产生的信号，造成了噪声数据的干扰。气泡还可以改变样本流，造成检测结果不理想；此时，仪器需要做PRIME，排除液路中的气泡干扰。如果鞘液筒吸干了，应该重新装满鞘液，然后先取下样品管进行5-10次PRIME，再换上3ml dH2O上样管HI RUN 30分钟，待鞘液流中的气泡排除之后，再进行样本测定。
5.2.5 计算机屏幕上见不到细胞显示 检查以下情况：
? 如果仪器一直处于STANDBY状态，则检查System Status。
? 如果STATUS窗日显示READY，则检查样本管中细胞浓度是否够，上样前
是否混匀了。
? 检查实验的Instrument Settings是否正确。 ? 检查阈值是否设置过高，导致无法检测目标细胞群。
? 检查CELLQuest软件Cytometer目录下的Status窗口，是否己被更新。如
果未更新，说明仪器与计算机之间的通讯发生了故障，此时，应关闭计算机和FACSCalibur，重新打开仪器，继续实验。
? PRIME仪器液流，去除流动室中可能存在的气泡。若流动室中存在气泡，可
能使样本流的位置偏离激光束，导致无细胞信号。
5.2.6 加样针有鞘液反流 检查以下情况：
? 检查上样针外管是否安好，可以将外管旋下，向上推动，重新拧紧。 ? 更换上样针上部的O型胶环。
? 检查液流保存系统的真空帮浦是否工作。如果样本管支撑架位于旁位时，听
不到真空帮浦的工作声音，可能是真空帮浦停了，关闭FACSCalibur，再启动；移开支撑架时，如果马达仍然不动，请致电BD客户服务部门寻求帮助。
FACS101 Handbook - 23 –
实验文件1：2 Color ACQ
FACS101 Handbook - 24 –
实验文件2：2 Color ANA
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FACS101 Handbook
BD FACSCalibur流式细胞仪操作手册
