血清淀粉样蛋白 A 检测试剂SOP
一、 目的
规范实验室人员的操作，以保证临床检验结果的准确性。
二、预期用途
本产品用于检测人血清/血浆/全血中的淀粉样蛋白 A 的含量，主要作为一种非特异性炎症指标。
血清淀粉样蛋白 A 是一类多基因编码的多形态蛋白家族，组织淀粉样蛋白 A 的前体物质，属于急性时相反应蛋白。炎症或感染急性期其在 48～72h 内即迅速升高，并且在疾病的恢复期迅速下降，目前，细菌、病毒感染、动脉粥样硬化、冠心病、急性移植排斥反应等疾病中均检测到血清SAA升高。目前，国内检测 SAA 的方法有胶体金法、免疫荧光法、散射比浊法、免疫比浊法等。
三、检验原理
本产品采用双抗体夹心法，以固相免疫层析形式进行检测。待检样本（血清/血浆/全血）在加样端由毛细作用力向上扩散，经过结合物垫时样本中的 SAA 抗原与标记物结合为标记抗体-抗原的复合物；复合物随样本扩散到硝酸纤维素膜上，被包被有 SAA 抗体的区域（检测线）拦截，形成标记抗体-抗原-包被抗体的免疫复合物，标记物沿着膜继续向前移动至质控线时反应，检测线处荧光显色强度与 SAA 含量成正比，根据荧光强度定量测定 SAA 浓度。
配套仪器原理：样本中 SAA 与标记抗体和包被膜上捕获抗体结合产生荧光强度，测量系统运用光电扫描获得信号值，再通过对光电信号测量处理，定量分析出 SAA 浓度。
四、主要组成成分
编号 名称 25 人份/盒 1 2 检测卡 样本缓冲液 3 ID 卡 1 个 25 袋 25 支 50 人份/盒 50 袋 50 支 100 人份/盒 100 袋 100 支 说明：不同批号试剂中各组分不可以互换，组分所标示试剂量为最低分装量。
1
五、储存条件及有效期
2℃～30℃保存，有效期 12个月；铝箔袋拆封后，有效期 1h。
六、适用仪器
适用于中秀科技股份有限公司的 ZOS-F1000 和 ZOS-F2000 干式荧光免疫分析仪，广州蓝勃生物科技有限公司的 AFS-1000、AFS2000A 干式荧光免疫分析仪。
七、 样本要求
1、 采用正确医用技术收集血清/血浆/全血样本。一般以清晨空腹抽血为宜（急症项
目除外）。采血部位应无炎症或水肿，除特殊情况外，不要在耳垂采血。
2、 3、 样本中的沉淀物和悬浮物可能会影响实验结果，应离心除去。
抗凝剂：使用 EDTA–K2、EDTA–K3、肝素锂、肝素钠或枸橼酸钠抗凝的血浆或全
血对检测结果无显著影响。
4、 干扰物：检测结果不受血红蛋白<800mg/dL、胆红素<30mg/dL、甘油三酯
<1000mg/dL 的影响。
5、 样本处理：收集后在室温放置不可超过 8h；如果不在 8h 内检测需将样本放置在
2℃～8℃的冰箱中；若需 48h 以上保存或运输，则应冻存于-20℃以下，不得超过 6 个月，避免反复冻融。使用前恢复到室温，轻轻摇动混匀。全血样本不得冻存，2℃～8℃下保存，不得超过 48h。避免加热灭活样本，溶血样本应弃用。
八、检验方法
1、试剂准备及配制
① 、 将试剂、样本放置室温（18℃～28℃）平衡至少 30min。
② 、质控：确认 ID 卡与检测卡批号匹配，进行 ID 卡质控（详见仪器说明书）。 2、实验操作
① 、 打开检测试剂包装，取出检测卡和样本缓冲液并编号。 ② 、加样：干式荧光免疫分析仪（半自动单通道、多通道）
根据样本类型，在干式荧光免疫分析仪上选择样本模式：“血清/血浆”模式或“全血”模式（详见干式荧光免疫分析仪说明书）。血清/血浆/全血：用加样枪吸取 5μL 样本加入到 750μL 样本缓冲液中，充分混匀后，吸取 60μL混合液加入到检测卡的加样
2
孔中，开始计时。 ③ 、检测：
“即时测试”模式：检测卡加样 3min 后，立即将检测卡插入仪器中，点击“测试”按钮，系统自动读卡并显示测试结果。
“标准测试”模式：检测卡加样时即点击“测试”按钮，将检测卡插入仪器中，系统将自动倒计时，并自动读卡显示测试结果。
九、参考区间
检测 246 例正常人群样本，采用百分位数法取 99%可信限确定血清淀粉样蛋白 A 参考区间为 < 10mg/L。由于地理、人种、性别及年龄等差异，建议各实验室建立自己的参考值区间。
十、 检验结果的解释
1、 浓度值超过 200mg/L 的样本，其结果是通过定标曲线外延得出的，如果要获得更准
确的结果，需用生理盐水对样本进行稀释后重新检测，最大稀释比例为 1：7。
2、 3、 用本产品检测结果为参考区间附近的可疑样本，建议重新检测，动态观察。 由于方法学或免疫特异性等原因，使用不同生产商的试剂对同一份样本进行检测可
能会得到不同 的检测结果，因此不同试剂检测所得结果不应直接相互比较，以免造成错误的医学解释，建议实验室在检测报告中注明所用试剂特征。系列监测中，如果改变试剂类型，则应进行额外的连续性检测并与原有试剂结果进行平行比较以重新确定基线值。
十一、检验方法的局限性
1、本产品检测结果仅供临床参考，不应作为临床诊治的唯一依据，对患者的临床管理应结合其症状/体征、病史、其他实验室检查、治疗反应等信息综合考虑。
2、样本中的异嗜性抗体或类风湿因子可能会干扰检测结果，须结合患者病史、临床检查和其他临床资料来综合评估检测结果。
3、严重溶血、脂血或浑浊的样本可能会造成不正确的检测结果，避免使用此类样本。 4、浓度高达 250mg/L 的 SAA 样本检测结果不产生 HOOK 效应。
十二、产品性能指标
1、
最低检出限：不大于 5mg/L。
3
2、 3、 4、 5、 线性：在（5～200）mg/L 区间内，试剂线性相关系数 r 不低于 0.9900。 准确度：回收率在（85%～115%）区间内。 重复性：变异系数不大于 15.0%。
干扰物：血红蛋白<800mg/dL、胆红素<30mg/dL、甘油三酯<1000mg/dL 对检测结果
无显著影响。
6、 批间差：变异系数不大于 15.0%。
十三、注意事项
1、 2、 3、 4、 本产品仅用于体外诊断。
本产品为一次性使用产品，使用后的不可回收再次利用。 操作前仔细阅读使用说明书，严格按照试剂说明书进行实验操作。
避免在恶劣的环境（如含有 84 消毒液、次氯酸钠、酸碱或乙醛等高浓度腐蚀性
气体及灰尘的环境）条件下进行实验，实验室消毒应在实验结束后进行。
5、 6、 样本缓冲液为无色透明澄清液体，且不可混用，以免交叉污染。
所有样本及使用后的试剂应视为潜在传染性物质，废弃处理时，应按照《临床实
验室废物处理原 则》和《医疗废物管理条例》等有关规定处理。
7、 试剂请在外包装标示的有效期内使用，检测卡从铝箔袋取出后应尽快使用，防止受
潮。
十四、参考文献
[1] 、De Buck M, Gouwy M, Wang JM, et al. Structure and expression of
different serum amyloid A ( SAA) variants and their concentration dependent functions during host insults[J]. Curr Med Chem, 2016, 23(17): 1725-1755.
[2] 、陈长强, 顾志冬, 樊绮诗. 血清淀粉样蛋白 A 在疾病应用中的研究进展[J]. 检
验医学, 2012(9).
[3] 、罗国忠, 贺海文, 杨永成, 等. 血清淀粉样蛋白 A 和 C-反应蛋白在小儿感染
性疾病早期诊断中的价值[J]. 检验医学与临床, 2015, 11(22):3368-3370.
[4] 、费凤英, 衣萍, 林见敏. 血清淀粉样蛋白A 与C 反应蛋白联合检测的临床应用
价值[J]. 检验医学, 2014, 29(10):1031-1033.
4
5
血清淀粉样蛋白A检测试剂SOP
