人体解剖生理学实验
反射时测定和反射弧分析 神经干动作电位的测定
1.实验的对象和材料
1.1.实验对象：蛙(frog)或蟾酴(toad)
1.2.实验材料：常用手术器械（手术剪、手术镊、手术刀、金冠剪、眼科剪、眼科镊、毁髓针、玻璃分针）、蜡盘、蛙板，玻璃板、固定针、锌铜弓、培养皿或不锈钢盘、污物缸、滴管、纱布、粗棉线、任氏液、2%普鲁卡因、0.5%及1%硫酸溶液、滤纸片支架、蛙嘴夹、小烧杯、秒表、神经屏蔽盒 PowerLab 10T、刺激线、USB线、电脑 2.实验方法和步骤 2.1.手术
脊蛙（只毁脑），分离右侧股部坐骨神经穿线备用 2.2.反射时的测定与反射弧分析
2.2.1.将脊蛙的上颌夹在支架上，右后肢最长趾浸入0.5%硫酸溶液中2~3mm(<10s),测屈反射时3次，同样测左后肢最长趾的。 2.2.2.损毁感受器实验 2.2.3.对照没损毁感受器实验 2.2.4.测擦或抓反射（搔扒反射）
2.2.5.麻醉坐骨神经，加药后每隔2min重复步骤（4）（记录加药时间） 2.2.6.屈反射什么时候停止？立即重复步骤（4），每隔2min重复一次步骤（4）直到抓反射消失，记录时间。
2.2.7.左侧后肢最长趾反射时有无变化。 2.2.8.毁坏脊髓后重复实验2.2.7。 2.3.坐骨神经干标本的制备 2.3.1.洗干净实验动物
2.3.2.双毁髓->剥制后肢->分离两后肢 2.3.3.分离坐骨神经到踝关节附近
2.4.连接实验装置，设置CH3 BioAmp和Stimulator，按照仪器的操作方法进行实验。并且记录好相关时间和图像变化。 3.实验结果
3.1反射弧的测定和分析 实验项目 1、用装有2-3mm厚的0.5%硫酸碰一下蛙的左、右后肢最长趾，测蛙左、右后肢最长趾屈反射，记录右后肢屈反射时间 2、环剪右后肢最长趾基部，去趾上皮肤后侧屈反射 3、测右后肢其他趾屈反射 蛙右后肢非最长趾屈反射时 1 2.56 4、测右后侧背抓反射 2 3.32 3 3.95 平均值 3.27 无 实验指标 蛙右后肢最长趾的屈反射时 1 1.73 2 2.74 3 3.02 平均值 2.49 蛙右后测背抓反射 1 1.34 2 3.62 3 4.06 平均值 3.01 5、右侧坐骨神经滴加普鲁卡因，加药是开始计时，每隔2分钟重复步骤3，记录每次重复反射时的变化 6、屈反射不能出现时，每隔2min重复步骤4，记录每次发重复反射时的变化 7、测左右肢最长趾屈反射 加药后，屈反射即消失 反射时无法测定 加药后，抓反射即消失 反射时无法测定 左后肢最长趾屈反射时 1 5.25 2 4.78 3 7.45 平均值 5.83 8、毁坏脊髓，重复步骤7 无
3.2坐骨神经干标本的制备以及双相和单相动作电位的观察
3.2.1.双相电位
Delay:200ms Dural:10ms Ampl:2V 图一 3.2.2.单相电位
Delay:200ms Dural:10ms Ampl:2V 图二
4.分析与讨论
4.1. 反射时的测定和反射弧分析
4.1.1.从刺激开始至反射出现所需要的时间，即反射通过反射弧的时间，称为反射时。随着施加刺激次数的增多，每次发生反射现象的时间逐渐变长，原因可能是青蛙对硫酸开始习惯化，经过多次浓硫酸刺激后，皮肤上的感受器已经对该刺激有了一定的适应性，所以敏感度也下降，使得反射时逐渐变长。
4.1.2.反射弧由感受器、传人神经、神经中枢、传出神经和效应器5个部分组成。一旦其中任何一个环节的解剖结构和生理完整性受到破坏，反射活动就无法实现。当环剥长趾皮肤后用0.5%硫酸刺激蛙时，无屈反射现象发生，这是因为皮肤相当于反射弧的感受器，剥了皮肤后反射弧中缺少感受器，反射弧不完整，所以没有任何屈反射现象，而刺激其它趾，由于无损伤，仍可以形成一个完整的屈反射。 测右侧背抓反射时，虽然长趾皮肤受损，但背侧的的皮肤完好，所以也是可以形成一个完整的抓反射。
4.1.3.测左右两后肢最长趾屈反射时，理论上两后趾的反应时间应该相当，但是本实验中明显测得的结果是左肢比右肢灵活，本小组采取的蛙脚趾都是完好的，这可能因为左右后肢的最长趾对硫酸的敏感度不同而导致的实验误差。 4.1.4.右侧坐骨神经滴加普鲁卡因，然后用0.5%硫酸刺激有皮肤的最长趾理论上来说一开始是有反应的，因为传入神经是由多根神经组成的，细的先被麻醉，粗的后麻醉，一段时间后屈反射才会消失。而当屈反射不再出现时，擦或抓反射仍存在，这是因为屈反射的传出神经在坐骨神经，而抓反射的传出神经不在坐骨神经，为脊神经，而且髓鞘在不同的神经厚度也不同，在传入神经较薄，在传出神经较厚，所以普鲁卡因先麻醉传入神经，再麻醉传出神经，所以理论上是屈反射现象比抓反射现象先消失。但是本实验 刚滴进普鲁卡因，蛙就没有了屈反射和抓反射，本小组分析原因是麻醉剂即普鲁卡因的浓度太高了，以至于对神经的麻醉作用过强，因此会测不出有相关的反应，从而得不到反射时。
若捣毁脊髓，即毁反射弧的神经中枢，无法形成一个完整的反射弧，所以蛙对任何刺激都完全没有反应
4.2神经干的双相动作电位和单相动作电位
4.2.1.神经在受到有刺激以后可以产生复合动作电位，标志着神经发生兴奋。如果在离体神经干的一端施加刺激，从另一端引导传来的兴奋冲动，可以记录出双相动作电位。经过本小组的调试，最终采取的是以“Delay:200ms Dural:10ms Ampl:2V”来对蛙的坐骨神经进行刺激，记录双相动作电位如上图一。这里的双相动作电位随刺激强度的增大而增大是因为所测的不是单个细胞，而是神经干。在神经干上记录到的动作电位，是组成神经干的各
种神经纤维的总和，称复合动作电位。
4.2.2.在引导的两个电极之间将神经干麻醉或者损坏，阻断其兴奋的传导能力，这时候记录出的动作电位就是为单相动作电位。
神经纤维兴奋传导要求保持生理完整性，包括结构和功能两方面的完整性。本小组采用棉线缠住神经，其结构完整性遭到破坏，神经冲动的传导受到阻滞。当缠住两电极之间的神经时，冲动无法到达后一个电极，只能记录到单相动作电位。但实际上本小组在测第一第二次时测到的都为双相动作电位，分析为绑得不过紧，没有吸干任氏液，都有可能导致神经冲动出现双向传导。 5.实验结论
5.1完整的反射弧由感受器、传入神经、神经中枢、传出神经、效应器五部分组成，只有这五部分都完整才能保证反射活动的顺利进行，其中任何一个部分的生理结构遭到破坏都会使反射活动就无法实现。
5.2. 神经干细胞外记录的动作电位波形呈双相，神经干细胞外记录的动作电位波形呈双相。
反射时的测定--动物生理学实验报告
