机能实验设计
影响尿液生成的因素 【H的和原理】
尿生成的过程包括肾小球的滤过、肾小管和集合管的重吸收和分泌三个过程。 凡能影响上述过程的任何因素，均可影响尿的生成并可引起尿量及尿的性质、成分 的改变。本实验以家兔为实验对象，采用膀胱插管术收集并记录尿量，主要观察不 同因素或药物对尿量的影响。实验LI的：
1 （学习膀胱插管术、尿量记录及尿糖鉴定等泌尿实验的方法。 2（进一步学习并熟悉大动物实验的基本方法和技术。 3（观察影响尿生成的若干因素，加深理解尿生成的机理。 【实验材料】 1（动物家兔
2（试剂和药品生理盐水、20,氨基屮酸乙酯溶液、20,葡萄糖注射液、100单位, 毫升肝素生理盐水（或6,枸椽酸钠）、1?10, 000去中肾上腺素、垂体后叶素、速 尿、20,甘露醇、班氏（Benedict）尿糖定性试剂。
3（装置和器材 微型讣算机及生物信号采集与处理系统、血压换能器、保护电 极、兔手术台和手术器械、动脉插管、动脉夹、膀胱漏斗、注射器（2ml、5ml、 10ml、20ml）及针头、酒精灯、试管架、试管和试管夹、输液装置、手术灯、纱 布、丝线等。
【实验方法】
1（麻醉固定将兔称重后，自耳缘静脉缓慢注入20%氨基甲酸乙酯（5ml/kg）,待 动物麻醉后仰卧固定于兔手术台上，剪去颈部和下腹部手术野的毛。
2（手术
1） 颈总动脉插管 在颈部正中切开皮肤6, 7厘米，分离皮下组织及肌肉，暴露 出
气管。在气管的两边分别分离出左颈总动脉和右迷走神经，在其下穿线备用。按 颈动脉插管方法将充满肝素生理盐水的动脉插管插入左颈总动脉，动脉插管的另一 端经血压换能器连接于生物信号采集、处理系统的某一通道上，用于观察动脉血压 的变化。手术完毕后用温的生理盐水纱布覆盖创面。
2） 膀胱插管 在下腹部正中线脐下方作一长约3,4厘米的皮肤切口，其下端直 达耻骨联合。分离皮下组织并沿腹口线切开腹壁。将膀胱翻出腹外，辨认清楚输尿 管，并向肾侧仔细地分离两侧输尿管2, 3厘米，在其下方穿一条线，将膀胱上翻用 线结扎膀胱颈部以阻断它同尿道的通路;然后在膀胱顶部选血管较少处，做一环形 的荷包缝合，缝合线两端要足够长，暂不结扎;在荷包缝合的中央剪一纵行小切 口，插入膀胱漏斗，然后用荷包缝合线将切口边缘固定于膀胱漏斗的凹槽上，膀胱 漏斗的延伸管与引流导管相连。动物所产生的尿液经膀胱漏斗、引流导管流出后直 接观察。手术完毕用温热的生理盐水纱布覆盖腹部创口。3（实验记录
生物信号采集与处理系统:与上次实验相同 4.观察项目
待尿量和血压稳定后，即可进行下列各项观察。注意每项实验开始前都必须先 记录一段正常尿量和血压曲线作为对照，然后进行注射或刺激，并连续观察和记录 至效应明显后再等待恢复至原来水平时，才能开始下一项实验。
1）耳缘静脉快速注射37OC生理盐水20ml,观察血压和尿量的变化。2）结扎 并剪断右侧迷走神经，用中等强度的电流刺激其外周段20, 30秒，使血压维持在 40, oOmniHg,观察尿量的变化。
3） 先收集尿液2滴进行尿糖定性实验*作为对照，然后自耳缘静脉注射20%葡萄 糖溶液10ml,观察血压和尿量的变化，在尿量变化最明显时，再收集尿液2滴作 尿糖定性实验。
4) 自耳缘静脉注射1?10, 000去甲肾上素0. 5ml,观察血压和尿量的变化。5) 自
耳缘静脉注射速尿0. 5ml/kg,观察血压和尿量的变化。
6) 自耳缘静脉注射垂体后叶素4单位，观察血压和尿量的变化。
7) 自耳缘静脉注射20%甘露醇2, 3ml/kg，观察血压和尿量的变化。8)在动物 的一侧大腿的股三角区，切开皮肤，分离出一侧股动脉，并插入硬塑料管进行放
血，使血压降至40, 50mmHg ,观察尿量的变化。然后再迅速补充生理盐水，观 察血压和
尿量的变化。
9)保存实验结果，通过反演功能将结果调出并进行整理、编辑、打印。对记录 到的动脉血
压、尿量及尿糖定性实验进行分析、讨论，得出实验结论。影响尿生成的因 素一实验结果记录表格如下
家兔血压与尿量 血压(mmHg)尿量(ml) 正常 --- 20ml生理盐水iv 刺激迷走神经外周端 20%葡萄糖5ml iv
1:10 000 去中肾 iv 速尿 5mg/kg iv 垂体后叶素2单位iv 结果解释
(1) IV生理盐水20 ml?血量增加？ 刺激心肺感受器？抑制ADH释放 (2) 电刺激迷走神经外周端？ BP下降？ 压力感受器上传冲动减少？ ADH释放增加
(3) IV 20,葡萄糖5ml:渗透性利尿 (4) NA:
,肾血管平滑肌a受体？肾血管收缩？ 肾血流量/毛细血管血压下降？ GFR减少 近球细胞0受体？肾素释放,肾素、血管紧张素、
醛固酮系统？肾小管/集合管对水和钠重吸收增加(5)速尿:抑制髓祥升支粗 段 N&+-K+-2C1,同向
转运，降低外髄肾小管内外渗透压 梯度，水重吸收减少。
(6)ADH:远曲小管和集合管上皮的V2型受体结合， 增加管腔膜水通道数U ,水重吸收增加 【注意事项】
1(实验询应给兔子多喂青菜，或在麻醉后立即给动物进行适量的输液，以增加 其基础尿流量。
2(实验中需多次静脉注射，应注意保护兔的耳缘静脉。注射时，先从末梢端开 始，逐渐向耳根端移近;或选用小儿头皮针刺入耳缘静脉，用胶布固定，用生理盐 水维持使形成一静脉通路以便于多次注射使用。
3(各项实验顺序的安排是:在尿量增多的基础上进行减少尿生成的实验，在尿 量少的基础上进行促进尿生成的实验。
【讨论思考】
1. 试分析产生上述各实验结果的机理。 2. 血压的高低与尿量之间有什么关系，为什么，
3. 分析本实验中，哪些因素可影响肾小球的滤过,哪些因素可影响肾小管和集 合管的转运功能，
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