《生物技术》练习题
选择题（15’）
1、PCR反应常用于扩增 （ C ）。
A RNA B 蛋白质 C DNA D 以上都是 2、 脐带血干细胞是一种（ A ）。
A．多能性干细胞 B．全能性干细胞 C．胚胎干细胞 D．专一性干细胞 3、植物中转入（ C ）基因可用于抗病虫。 A．紫杉醇 B．胰岛素 C．几丁质酶 D．凝乳酶
4、 氮和磷是水体富营养化的主要因子，生物脱氮是利用微生物（ C ）的原理实现的。 A．光合作用 B．超量摄取N C．硝化-反硝化 D．固氮作用
5、 （ D ）就是在试管中模拟达尔文的进化理论，构建突变的基因文库，并进行高通量筛选突变体。
A．定向突变 B．定点进化 C．定点突变 （改变蛋白质结构） D．定向进化 名词解释
① 生物技术：人们以现代生命科学为基础，结合其他基础学科的科学原理，采用先进的
工程技术手段，按照预先的设计改造生物体或加工生物原料，为人类生产出所需产品或达到某种目的
填空题（25’）
1、
按分化潜能的高下，干细胞基本上可分为3种类型： 全能性干细胞 、 多能性干细胞 、 专一性干细胞 。
全能性干细胞，即 胚胎干细胞 的原始干细胞，具有自我更新、高度增殖和多向分化发育成为人体全部206种组织和细胞甚至形成完整个体的分化潜能。 多能性干细胞：骨髓造血干细胞、专一性干细胞：上皮组织基底层的干细胞 发酵工艺基本上包括了 菌体制备、种子培养、发酵、提取精制 等几个过程。 液体深层发酵主要有 分批发酵、连续发酵、补料分批发酵 等3种类型。
所需时间总和为一个发酵周期。
2、
3、 4、 5、
6、 发酵周期包括 空罐灭菌、加入灭过菌的培养基、接种、发酵过程、放罐和洗罐 等，
7、
下游加工过程由许多化工单元操作组成，通常可分为 发酵液预处理和固液分离、提取、精制、成品加工 四个阶段。提取的目的是 浓缩及纯化 。
8、 微生物分批培养的生长曲线包括 延滞期 、加速生长期、指数生长期 、减速期 、稳定期 、衰亡期 等阶段。
9、
青霉素发酵生产的菌种是一种 产黄青霉 。
10、 目前世界上最大的工业酶制剂生产厂商是 丹麦诺维信 公司。
11、 传统酶的发酵生产方式有两种，分别是 固体发酵、液体深层发酵。 固体 发酵
法主要用于真菌的酶生产，其中米曲霉生产 淀粉酶 ，以及用曲霉和毛霉生产
蛋白酶 在我国已有悠久的历史。
12、 酶的分离纯化方法基本上包括抽提、纯化和制剂这3个环节
13、 酶制剂的制备流程一般包括破碎细胞、溶剂抽提、离心分离、过滤、浓缩、干燥这
几个步骤。
14、 酶制剂包括两类：固体酶制剂和液体酶制剂
15、 酶制剂保存条件应有利于维护酶的天然结构：温度（一般
0-4℃）、缓冲液（在特定
的pH范围内温度）、氧化/还原、浓度及纯度
16、 酶的比活力是 每毫克蛋白质所具有的酶活力单位数 。
17、 改变酶特性主要有两种方法，一种是 酶分子修饰 ，即通过分子修饰的方法来改变已分离的天然酶的结构；另一种是 酶的蛋白质工程 ，即通过生物工程方法改造编码酶分子的基因从而达到改造酶的目的。
18、 酶的 定向进化 技术是在 试管中模拟自然进化过程 ，通过 易错
PCR、交错
延伸技术、DNA改组 等分子生物学技术构造人工突变酶库，结合高通量的筛选技术来获得具有某种预期特征的优化酶。
19、 被限制在一定的空间但仍具有催化活性的酶 称为固定化酶。经固定化后的酶不但
保持了它固有的催化性质，又兼有一般化学催化剂能回收、反复使用的优点，并在生产工艺上可以实现连续化和自动化。
20、 固定化酶的半衰期指的 固定化酶的活力下降到为初始活力
1/2所经历的连续工作
时间，用t表示 。它是衡量固定化酶 操作稳定性 的关键。
21、 酶的固定化方法大致可分为四类：吸附法、共价结合法、共价交联法和包埋法。 22、 细胞固定化方法：包埋法和吸附法 23、 举出酶的应用及产品举例
① 蛋白酶类 饼干 ② 淀粉酶类 洗涤剂 ③ 凝乳酶 奶酪
24、 生物技术与其他高新技术一样具有“六高”的基本特征，即 高效益 高
智力 高投入 高竞争 高风险 高势能
25、 现代生物技术是以 20世纪
70年代DNA重组 技术的建立为标志的。
26、 生物工程产品生产的一般过程包括上游过程 生物反应过程（中游过程） 及 下游
过程
27、 组成DNA的碱基有A、T、G、C四种，中文名称分别是 腺嘌呤A 、 胸腺嘧啶T 、
鸟嘌呤G 、 胞嘧啶C 。
28、 一个基因或一个操纵子能否有效转录，首先取决于其上游是否存在 有效的启动子 ， 启动子 是RNA聚合酶识别和结合的位点，其序列具有相对的保守性。
29、 真核生物的转录区，一个启动子只控制转录一个基因的编码区，但是编码区内除了
各种编码序列外，往往含有一个或几个长度各异的非编码间隔序列区，称为 内含子 ，被内含子分割的编码序列小区，称为 外显子 。
30、 DNA体外重组，首先必须获得需要重组和能够重组的DNA片段。用 限制性内切核酸
酶 酶切DNA分子是获得这种DNA片段的主要途径。
31、 引物是 PCR ，并能引导模板
DNA互补DNA链合成的 脱氧核苷酸寡聚体 ，其3’
端具有游离的-OH，一般由20-30个核苷酸组成。
① DNA连接酶 能催化双链DNA片段紧靠在一起的3’-OH与5’-P之间形成磷酸
二酯键，使两末端连接。目前用于试管中连接DNA片段的DNA连接酶主要是 E.coli DNA连接酶 和 T4DNA连接酶 。 32、 获得不同目的基因，常采用的方法主要有 酶切直接分离法、PCR
扩增法、构建基因
组文库或cDNA文库分离法、化学合成法 等。
33、 目的基因导入受体细胞，常用的原核生物细胞有 大肠杆菌 、乳酸菌、 枯草杆菌
等，真核细胞有 真菌细胞（酵母菌） 、植物细胞（水稻）、 动物细胞（猪） 等。
34、 目前常用的基因诊断方法有 限制性片段长度多态性（RFLP）分析方法、聚合酶链
反应（PCR）技术 、DNA测序技术（DS）、基因芯片技术 。
35、 工业化植物细胞培养系统主要有两大类：悬浮细胞培养系统、固定化细胞培养系统 。 36、 植物细胞原生质体是指 已去除全部细胞壁的细胞 ，这时细胞外仅由细胞膜包裹，
呈圆形，要在高渗液中才能维持细胞的相对稳定。在酶解过程中残存少量细胞壁的原生质体称为 原生质球或球状体 。
37、 原生质体 化学法诱导融合 无需贵重仪器，试剂易于得到，尤其是 聚乙二醇（PEG）
结合高钙高pH诱导融合法 已成为化学法诱导细胞融合的主流。
38、 人工种子由
3部分构成，包括 人工种皮 、 人工胚乳 、 胚状体 ，胚状体是
由组织培养产生的具有 胚芽 、 胚根 的结构。
39、 动物细胞 液氮保存法 中需要缓慢降温。 40、 哺乳动物和人体内主要有两类淋巴细胞： T
淋巴细胞 、 B淋巴细胞 。前者
能分泌淋巴因子，发挥细胞免疫的功能；后者能分泌抗体，具有 体液免疫 作用。
41、 从 某个特定
B淋巴细胞 培养繁殖出大量的细胞群体，这样克隆出的细胞其遗传
性质高度一致，由它们分泌出的抗体即叫 单克隆抗体 。
42、 1975
年，Kohler和Milstein将 肿瘤细胞 和 B淋巴细胞 融合，终于获得了
既能产生单一抗体又能在体外无限生长的杂合细胞，荣获1984年的诺贝尔生理学
或医学奖。
43、 多莉绵羊克隆过程中，细胞核来源于白脸绵羊的 乳腺细胞 ，细胞质来源于黑脸
绵羊的 去核卵细胞，通过电激卵质融合后，形成的易核卵在体外进行早期胚胎发育后再植入代孕绵羊子宫内，经自然分娩产下多莉绵羊。
44、 克隆哺乳动物存在易核卵 发育成功率低 ，出生后对 环境 适应性较差，以及可能早衰。且多数实例中克隆幼畜把亲本的 年龄 也继承了下来。
45、 干细胞是 动物（包括人）胚胎及某些器官中具有自我复制和多向分化潜能
的原始细胞，是构建、修复病损或衰老组织、器官功能的理想种子细胞。
46、 根据微生物的种类不同，微生物的发酵过程可以分为 好氧性发酵过程 和 厌
氧性发酵过程 两大类。
厌氧性发酵的例子： 乳酸杆菌引起的乳酸发酵 。 好氧性发酵的例子：黑曲霉引起的柠檬酸发酵 47、 酵母在 缺氧 条件下发酵积累乙醇，而在 有氧 条件下则大量繁殖菌体细胞，
因此称为 兼氧性 发酵。
48、 生物传感器大致分为
4大类： 酶传感器、组织传感器、微生物传感器、免疫传感
器 。生物敏感膜又称为 分子识别原件 。(没组织、微免疫)
49、 生物传感器怎么转化：将浓度（非电物理量）转化为电信号（电学量）
50、 蛋白质组成经元素分析，均含有 C、H、O、N 及少量的硫元素。氮的含量为 15%~17% 。 51、 蛋白质的 一级 结构是其最基本的结构，它包含着决定蛋白质的高级结构的关键性
因素。
52、 改变蛋白质结构的核心技术是基因的人工定点突变 ，目前常用的方法主要有
M13载体法 、 PCR法 。
53、 先进的工程技术手段是指基因工程（核心）、细胞工程（平台）、发酵工程、酶工程、
蛋白质工程等新技术。
简答题（10个*4=40’）
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中国仓鼠卵巢细胞（CHO）
? ?
黄金水稻——富含β-胡萝卜素的水稻新品种 单细胞蛋白（SCP）（蛋白质的快速生产）
指“生产”蛋白质的生物大都是单细胞或丝状微生物个体，而不是多细胞复杂结构的生物，如动物植物等。（核酸含量高） ? 人绒毛膜促性腺激素(HCG) 原理 1、在样品区加尿后,尿液借助毛细作用泳动到玻璃纤维膜处(胶体金垫)，尿液中的HCG与胶体金标记的HCGβ亚基抗体结合形成复合物
2、复合物继续泳动到硝酸纤维素膜的检测区,与固定在该区域的HCGα亚基抗体结合形成三明治式结构,由于胶体金在该区域的集中而使检测线呈现红色
3、如果样品中没有HCG,则胶体金不会在检测区集中,检测线也就不会呈现红色 4、当样品继续泳动到控制线时,该区域固定有抗抗体,无论样品中有无HCG,胶体金标记的HCGβ亚基抗体都会与抗抗体结合而呈现红色，如无，则检测失败
乙醇在人体内的代谢途径
乙醇（乙醇脱氢酶ADH）→乙醛（乙醛脱氢酶ALDH）→乙酸 ? 抗体的结构
生物技术复习资料
