新生儿溶血病检测的设计性实验
1．发病机制：
1.胎儿期妊娠后期胎盘出血，胎儿红细胞进入母体循环系统。
2.胎儿红细胞被母体免疫系统识别。
3.刺激母体产生抗体。
4.抗体通过胎盘引起新生儿溶血病
Rh新生儿溶血病：
1. 2. 3.
二 实验原理
由于母婴Rh血型不合，母体产生相应的IgG类Rh抗体，经过胎盘进入胎儿体内，与胎儿红细胞发生特异性的抗原抗体反应，从而破坏胎儿红细胞并引起一系列的临床症状。运用直接抗球蛋白试验和间接抗球蛋白试验可检测出婴儿体内是否有来自母体的与婴儿相对应的IgG类Rh抗体。
三 标本、试剂与器材
1 标本
（1） 待检标本 取婴儿抗凝血3~5ml，分离出血清和红细胞。用生理盐水洗涤红细胞，混匀，以1000×g离心1min，去除上清液，再加入生理盐水，充分混匀，离心洗涤，如此反复洗涤4次。第四次洗涤后尽量去除上清液，取试管底部的婴儿压积红细胞2滴用生理盐水配成2%~5%婴儿红细胞悬液，余下的婴儿压积红细胞备用；
（2） 阳性对照 IgG抗D抗体致敏的2%~5%RhD阳性红细胞悬液;
（3） 阴性对照 正常人2%~5%红细胞悬液;
2 试剂
多特异性抗球蛋白试剂、但特异性抗IgD试剂、单特异性抗C3d试剂、0.5%菠萝酶或1%木瓜酶、谱红细胞、5%（A、B）指示红细胞、生理盐水、化学纯乙醚、0.2mol/L巯基乙醇货0.01mol/L二硫苏糖醇；
3 器材
试管、滴管、37水浴箱、56水浴振荡箱、台式离心机、显微镜等 。
（一） 婴儿红细胞直接抗球蛋白试验
1) 实验目的 检测新生儿红细胞上是否存在不完全抗体。
2) 实验原理 不完全抗体多与其相应的红细胞结合，在盐水介质中不出现凝集反应。Coomb试验利用抗球蛋白抗体作为第二抗体，通过连接致敏红细胞表面的特异性Rh抗体，使致敏红细胞出现特异性凝集。
3) 操作步骤
1 取三只试管，表明待测标本管、阳性对照管、阴性对照管；
2 待测标本管加入1滴2%~5%婴儿红细胞悬液，阳性对照管加入IgG抗
D抗体致敏的2%~5%RhD阳性红细胞悬液，阴性对照管加入1滴正常人
2%~5%红细胞悬液；
3 各管加入抗球蛋白试剂2滴，混匀，1000r/min离心1min；
4 判断结果 斜持试管轻轻摇动或轻轻弹动，肉眼观察红细胞凝集情况。若有可疑的，可讲混悬液倒在玻片上，在显微镜下观查结果。如阳性对照管出现凝集，阴性对照管不出现凝集，说明被检测管的结果可信；若被检测管出现凝集，为RhD阳性，反之为RhD阴性。
5 报告方式 直接抗球蛋白试验阳性或阴性。
（二） 婴儿血清中游离抗体检查
1） 实验目的 检测新生儿血清中是否存在不完全抗体。
新生儿溶血病检测的设计性实验
