鹅源新城疫病毒拯救体系的建立

鹅源新城疫病毒拯救体系的建立

作者：胡顺林;张艳梅;孙庆;刘玉良;吴艳涛;刘秀梵

作者机构：扬州大学,农业部畜禽传染病学重点开放实验室,扬州,225009;扬州大学,农业部畜禽传染病学重点开放实验室,扬州,225009;扬州大学,农业部畜禽传染病学重点开放实验室,扬州,225009;扬州大学,农业部畜禽传染病学重点开放实验室,扬州,225009;扬州大学,农业部畜禽传染病学重点开放实验室,扬州,225009;扬州大学,农业部畜禽传染病学重点开放实验室,扬州,225009 来源：微生物学通报 ISSN：0253-2654 年：2007 卷：034 期：003 页码：426-429 页数：4 中图分类：Q93 正文语种：chi

关键词：新城疫病毒;cDNA;转染;拯救

摘要：参照GenBank上公布的鹅源新城疫病毒ZJI株全序列,设计8对引物,经RT-PCR法从尿囊液中扩增目的片段后,分别克隆进pCR2.1载体,将Ⅰ～Ⅶ7对引物的扩增片段依次亚克隆到TVT7R转录载体中,构建了含NDV全基因组cDNA的转录载体(pNDVZJI),将Ⅴ、Ⅵ和Ⅷ3对引物的扩增片段分别克隆进pCR2.1载体,并亚克隆到表达质粒pCI-neo上,构建了L基因的真核表达载体(pCI-L),pNDVZJI、pCI-L与另外两个辅助表达质粒(pCI-NP和pCI-P)共转染BSR-T7/5细胞,成功拯救出了具有血凝性的鹅源新城疫病毒,ZJI株鹅源新城疫病毒的成功拯救为后续相关研究工作的开展打下了基础.