农残快速检测培训资料
一、农产品质量安全监测抽样技术
采样是选取有代表性的果蔬样品。应根据样本种类实际情况确定采样方法，通常有随机法、对角线法、五点法、“Z”形法、“S”形法、棋盘式法、交叉法等。应避免采有病、过小或未成熟的样本。取样本时，需在植株各部位 (上、下、内、外、向阳和背阴面) 采取。擦去表面泥土或洗净后待检测。 1.1采样的总体原则 “一三五”原则：
“一”即一个样品一个袋子，独立包装；
“三”即茄果瓜类等大果型蔬菜至少采不同地方的三个； “五”即叶菜类蔬菜至少采不同地方五棵。 1.2检测时要从每棵蔬菜上取样 具体的取样方法
① 叶菜类：青菜、小青菜、菜心、菜苋、米苋、生菜、菠菜、蕹菜、大白菜、杭白菜、黄芽菜、空心菜、娃娃菜、鸡毛菜、油麦菜、塔菜、芥兰、草头、紫角叶、荠菜、蓬蒿、黄心菜、甘蓝、卷心菜、牛心菜、菊花菜、芹菜、美芹、水芹、黄心芹、香菜、豆苗、金丝芥、芥菜、马兰、韭菜、韭黄、大葱、小葱、大蒜、蒜苗、洋葱等； 叶菜类取1克样品时，不易太碎，以叶为主。葱蒜等特殊菜注意假阳性，样品比对是用标准对照库。 ② 花菜类：花菜、白花菜、青花菜等；
花菜类选取3棵样品，取叶1克（1厘米长宽，不要剪的太碎）。 ③ 果菜类：茄子、番茄、青茄、红茄、辣椒、尖椒、甜椒、杭椒、青椒、黄瓜、西葫芦、冬瓜、瓠瓜、苦瓜、丝瓜、南瓜、节瓜、
金瓜、佛手瓜、豇豆、刀豆、芸豆、扁豆、白扁豆、毛豆、蚕豆、豌豆、荷兰豆等；
果菜类可以采取顺皮削取1克的方法。具体用带刮皮器的水果刀顺皮削下一片，然后切成1厘米左右见方碎片。
④ 食用菌：蘑菇、香菇、平菇、袖珍菇、金针菇、茶树菇等； 食用菌类可以采取整株浸泡的方法。 二、农残快速检测过程的关键控制点 2.1标准实施的必要性
我国是农药使用的第一大国（年使用量100万吨以上），由农药残留引起的食物中毒事故屡有发生，这主要分为在蔬菜、瓜果上使用高毒农药后，短时间内采摘和食用所引起的急性中毒事故和农药残留量超过最高允许限量（MRL值），长期食用引起的慢性中毒两种。由于农药品种结构不合理，加上一些人为不合理的使用，以及农药残留监管力度不够，致使我国农药残留问题比较突出。
农残超标的主要原因：一是生产者不严格按农药安全使用准则的要求进行生产,使用违禁农药或使用量和安全期掌握不好。二是施药器具喷洒的均匀性欠佳,易导致局部给药超量所致。
由于高毒、高残留的有机磷农药如：对硫磷、甲基对硫磷、乐果、氧乐果、敌敌畏及甲胺磷等占据了杀虫剂产量的70％以上，并且其中70％以上的中毒事故都是由有机磷农药引起的。 2.2标准操作的可行性
酶抑制法是研究最多且相对成熟的一种对部分农药进行残留快速检测技术。酶抑制法是利用有机磷与氨基甲酸酯类农药可特异性地抑制昆虫中枢和周围神经系统中乙酰胆碱酯酶(AChE)的活性，破坏神经的正常传导，使昆虫中毒致死这一毒理学原理，将AChE与样品反
应，根据AChE活性受到抑制的情况，可判断出样品中是否含有有机磷与氨基甲酸酯类农药。为了提高检测的灵敏度和准确度，将提取液用比色法进行分析，从而研制出各种农药残留快速检测仪。残留农药对乙酰胆碱酯酶活性有抑制，浓度越高，抑制率越高。仪器通过测定酶与底物、显色剂显色反应变色速率，并与空白对照比较求得酶抑制率，从而判定农药残留量是否超标。 2.4检测过程的关键控制点
① 检测过程中温度与提取时间对结果的影响
以生菜为样品，通过检测不同温度、不同提取时间，所得到的抑制率来判断最佳环境条件，样品的提取温度在10-30℃范围抑制率变化较小，高于30℃时抑制率有所降低，而静置制备样品提取时间达6分钟后，抑制率不再增加。 ② 关键点假阳性的控制
假阳性的产生：一方面，由于各蔬菜品种间（如：葱蒜类、香菜、韭菜等容易出现假阳性的蔬菜）对检测抑制率有不同干扰和影响，使一般的快速检测方法难以区分与农残抑制作用的比例关系容易造成误判（假阳性）；另一方面，因色素的干扰可能影响检测结果的准确性。当待测样品的色素（如：叶绿素、胡萝卜素等）含量较高时，会使测得的透过率非常低，从而造成对吸光度随时间变化值计算的错误，影响检测结果的可靠性。
《果蔬农药残留比对数据库》：2004年，上海博纳新技术研究所与农业部农产品质量监督和检测中心（北京）及中国农业大学农药残留与环境毒理教研室共同合作，依据GB/T5009.199-2003的标准，在CL-BⅢ农残快速测定仪的基础上成功研发了《果蔬农药残留比对数据库》，初步解决了应用“酶抑制率法+分光光度法”检测有机磷和氨基
甲酸酯类农药残留时存在的部分“检测盲区”，在一定程度上避免了检测结果的假阳性，并实现了检测过程中对吸收光谱的自动校准。利用这一科研成果，可使非专业人员能较快掌握相应的操作技能，从而达到复杂原理与简易操作的有机统一。 如何处理和避免假阳性？
A．由于果蔬细胞液中存在有抑制胆碱酯酶的物质，在检测取样时，最好不要将果蔬样品切的太碎，以免果蔬细胞液流入检测液中，影响实验结果。
B．大多果蔬由于剪得太碎，或浸提时间过长，使得提取的样品溶液中，含有较多叶绿素，干扰实验结果的准确性。
C．韭菜、生姜、葱、辣椒、胡萝卜等蔬菜中，含有破坏酶活性的物质，处理这类样品时，必要时可采取整株蔬菜浸提。
D．用CL-BⅢ残留农药测定仪的软件中，“保存对照”和“装入对照”的功能，我们能分别建立相应果蔬品种的空白对照库。并能用相应果蔬品种的空白对照同该果蔬品种的样品进行测定。这样就有可能对如：韭菜、生姜、葱、辣椒、胡萝卜等蔬菜进行更好地检测。 三、使用农残仪的注意事项与故障排除 3.1仪器的维护、保养
① 存放仪器的地方必须保持干燥、防尘、防振动。
② 仪器内部通道应保持干净，无灰尘，若有污物，可用棉质物拭净。
③ 仪器操作时，必须注意比色皿通光面不能受到手指或油迹等污染，如有污物或液体可用过滤纸檫净。
④ 仪器所配套的各个检测项目所需的辅助设备、检测试剂和检测用品器具。每次检测完毕后，应注意进行维护和保管。
⑤ 禁止在仪器DC输入孔插入非本公司配套的其他电源。 ⑥ 仪器使用前必须先仔细阅读仪器使用说明书，根据说明书上的操作步骤进行操作。如仪器出现不正常现象时，应通知销售商或送到特约维修点维修。用户不得自行拆卸修理，否则将影响销售商按照仪器维修条款提供优质服务。 3.2常见问题及解决方法
1．仪器开机，为什么液晶屏不亮？
解决方法：检查电压如果高于220V，则仪器及其稳压电源可能被烧坏，请更换稳压电源；若更换稳压电源后，仍然无法开机，请将仪器寄送回我公司修理。
2．联机操作调0/100时，无红线，软件为何显示“没有检查到指定的设备，请检查仪器连接”？
解决方法：首先检查仪器与电脑间的数据线是否连接好。若连接正常，请检查仪器是否调整为“受控工作模式”，然后在食品质量安全检测软件中的设备设置中，选择相应的仪器型号。如果还是不行，则换一台电脑试试，有可能是电脑的串口出故障。
3．在调0和100后为何会出现“您调0/100有误”，出现800或是更高的红线？
解决方法：确认是否在调0时放入黑块，黑块拿出时调100；另外不要在0到100或是100到0的变化过程中，按下0/100键。
4．调0/100时，按下0键，或100键后，红线为什么不马上变为0或100？
解决方法：这种现象是正常的，要在调0/100按“结束分析”键后，重新点击“开始对照分析”键，才会看到0线和100线的数值变为0或100。
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