表皮葡萄球菌诱导克林霉素耐药及常见抗生素耐药性分析

表皮葡萄球菌诱导克林霉素耐药及常见抗生素耐药性分析

董玉飞，赵纪维，杨敬芳，李海娜，许丽枫

【摘 要】摘要：目的 分离临床标本中表皮葡萄球菌，检测其对常用抗生素的耐药性，并检测红霉素对克林霉素诱导性耐药的发生率。方法 分离培养临床标本中的表皮葡萄球菌，用k－b法检测其对红霉素及克林霉素等抗生素的耐药性，并做纸片法D试验检测红霉素诱导克林霉素耐药发生率。用头孢西丁法检测MRSE。结果 86株表皮葡萄球菌中MRSE 72株，占83.72%，MSSE 14株 占16.28%。总D试验阳性34株，占39.53%，D试验阴性52珠，占60.47%。所有试验菌株对青霉素耐药率100%，红霉素耐药率88.37%，克林霉素24.42%，利奈唑烷100%敏感，万古霉素100%敏感。结论 临床分离表皮葡萄球菌对青霉素，红霉素和克林霉素等药物耐药率较高，常规D试验检测有助于临床合理使用大环内酯类及林可霉素类抗菌药物。 【期刊名称】中国实验诊断学 【年(卷),期】2014(018)001 【总页数】3

【关键词】表皮葡萄球菌；红霉素；诱导克林霉素耐药；D试验

凝固酶阴性葡萄球菌中，表皮葡萄球菌是主要种别，也是引起肿瘤患者和新生儿院内感染的重要致病菌。表皮葡萄球菌在医院获得性菌血症患者中的分离率很高，达到74%－92%。可引起心瓣膜手术和心血管手术以及心脏切开术后感染，永久性的起搏器感染，血管移植物感染，是脊髓液分流术及其菌血症的主要致病菌。是各种整形术后感染和无诱因关节感染最主要的致病菌。表皮葡萄球菌在人类感染的凝固酶阴性葡萄球菌中占第一位。表皮葡萄球菌可定植在体

内人工装置，如人工瓣膜、脊髓液分流管、静脉内导管等，进而引起各种感染，是重要的机会致病菌，是手术后伤口感染的致病菌，也是瓣膜修复术后心内膜炎的最常见致病菌，且对多种抗生素耐药[1]。本研究从临床标本分离的表皮葡萄球菌入手，检测其对常用抗生素耐药性，着重红霉素及克林霉素耐药性及诱导克林霉素耐药检测。从而帮助临床合理应用抗生素。

1 材料与方法

1.1 菌株来源

分离本院2011.1—2011.10，临床标本分离表皮葡萄球菌86株，分别来自痰18株，尿液16株，伤口分泌物16株，血液34株其他标本2株。用金黄色葡萄球菌ATCC25923做纸片法药敏试验质控菌株。 1.2 材料

MH琼脂购自杭州天和微生物试剂有限公司，红霉素、克林霉素、头孢西丁等药敏纸片购于温州康泰生物科技有限公司，葡萄球菌鉴定卡是bioMerieux sa公司产品，ATCC25923是卫生部北京医院惠赠。 1.3 方法

1.3.1 菌株分离与鉴定 按照医院常规标本采集标准采集标本，分离其中表皮葡萄球菌到血平板，进一步分离分纯，采用ATB Expression鉴定系统及其配套鉴定卡32staph鉴定到种。其中痰 尿等标本某些不做致病菌报告，但留菌做实验。

1.3.2 MH平板制备 按照说明书要求称量干粉溶于蒸馏水中加热溶解后，1210c高压15min，450c水浴平衡后，取一次性无菌培养皿在超净工作台中水平仪上每平皿注入24ml，冷却待用。

1.3.3 药敏试验 采用k－b琼脂扩散法检测红霉素15μg、克林霉素2μg、头孢西丁30μg耐药性，试验方法及结果判读按照CLSI2010M100－S20执行。红霉素抑菌圈＞＝23敏感，14－22中介，＜＝13耐药。克林霉素＞＝21敏感，15－20中介，＜＝14耐药。头孢西丁30μg＜＝24为 MRSE，＞＝25为MSSE。采用whonet5.5统计分析结果。

1.3.4 D试验检测 采用k－b琼脂扩散法依据CLSI2010M100－S20进行，把传纯18－24h的菌落用无菌生理盐水配制成0.5麦氏单位浊度，均匀涂布在MH平板上，将红霉素15μg、克林霉素2μg纸片贴到平板上，两纸片中心间距15－26mm，35℃普通培养箱培养16－18h观察结果。与红霉素相邻的克林霉素抑菌圈边缘出现“截平”即D试验阳性。无截平时判为阴性。

2 结果

2.1 86株表皮葡萄球菌标本来源比例，本次研究来自血液标本的占39.53%，痰液占20.93%，伤口分泌物和尿液各占18.60%.血液标本比例最大和范昊等报道来自痰液比例最大不一致，可能与本院该阶段血培养抽血污染率及痰培养中凝固酶阴性葡萄球菌不做致病菌报告相关。该菌在各类标本中出现均需结合临床表现综合判断是致病菌或污染菌，见表1。

2.2 86株表皮葡萄球菌中 MRSE 72株，占83.72%，MSSE 14株 占16.28%。红霉素和克林霉素都敏感8株，占9.30%。红霉素和克林霉素都耐药（即MLsb固有表型）18株，占20.93%。红霉素耐药或中介，克林霉素敏感或中介60株（MS表型），占69.76%，这60株中D试验阳性34株（即MLsb诱导表型），D试验阴性26株，在60株中分别占56.67% 和43.33%，见表2。 2.3 86株表皮葡萄球菌对常见抗生素耐药性见表3。万古霉素纸片直径全部在