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诺卡氏菌的染色及鉴定

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诺卡氏菌的染色及鉴定

诺卡氏菌

诺卡氏菌属 革兰氏阳性。有时抗酸的菌丝体内含诺卡氏菌类脂(LCN-A)和诺卡枝菌酸,细胞壁Ⅳ型。根据菌丝体发育的程度和断裂的迟早,将本属分为3群。

本属菌广泛分布于自然界。有的致病,引起人和动物的诺卡氏菌病。它们也是多种抗生素的产生菌。此外,在石油脱蜡、污水净化方面也起一定作用。代表种为鼻疽诺卡氏菌。

类诺卡氏菌

类诺卡氏菌属 培养几天后,基内菌丝和气生菌丝都断裂,细胞壁化学组分Ⅰ型、不含诺卡氏菌特征性的类脂A和诺卡氏菌酸,革兰氏阳性,不抗酸;DNA中的G+C克分子含量为66.3%。代表种为白色类诺卡氏菌。

拟诺卡氏菌

拟诺卡氏菌属 基内菌丝和气生菌丝断裂为不规则杆状或球状体;细胞壁组分Ⅲ型,不含诺卡氏枝菌酸和诺卡氏菌类脂A。代表种为达松维尔拟诺卡氏菌。

假诺卡氏菌

假诺卡氏菌属 基内菌丝均多横隔,顶生芽殖,后期才断裂,细胞壁组分Ⅳ型,革兰氏阳性,不抗酸,断裂的节段有的带刺。代表种为嗜热假诺卡氏菌。

放线多孢菌

放线多孢菌属 气生菌丝产生较长的孢子链,基内菌丝部分断裂,细胞壁组分Ⅳ型,DNA中的G+C克分子含量为64.2%。革兰氏阳性,抗酸,模式种为嗜盐放线多孢菌,能在饱和氯化钠内生长。生长最低盐浓度为10~12%。

糖多孢菌

糖多孢菌属 基内菌丝在菌中央断裂为不规则杆状体,气生菌丝上有圈环状或松散螺旋形的短孢子链;细胞壁Ⅳ型;代表种为披发糖多孢菌。 红球菌

红球菌属 多形态的雏形菌丝体迅速断裂为不规则细胞;可能部分抗酸;一般无气生菌丝;菌落分枝杆菌样;含诺卡氏菌类脂A和诺卡氏枝菌酸;细胞壁Ⅳ型。DNA中的G+C克分子含量为61~68%或67~73%代表种为红色红球菌。

原小单孢菌

原小单孢菌属 基内菌丝形成单个孢子,并断裂为类白喉杆菌,一般无气生菌丝,即使有也不产生孢子;细胞壁Ⅵ型,含赖氨酸而无二氨基庚二酸。只记述一种为柠檬原小单孢菌。 厄氏菌

厄氏菌属 菌落象细菌,无气生菌丝,雏形菌丝迅速断成能游动的杆状体,具极生或周生鞭毛;细胞壁Ⅵ型,含赖氨酸和半乳糖,天门冬氨酸有或无;DNA中的G+C克分子含量为70.5%~75%;革兰氏染色阳性,不抗酸。代表种为扰动厄氏菌。 一、抗酸染色

诺卡氏菌为抗酸性或弱抗酸菌、或在生长的某一阶段具有抗酸性,抗酸染色为弱阳性,若脱色时间延长,则抗酸染色为阴性,呈现蓝色。目前常用改良抗酸染色方法,改良抗酸染色与传统的抗酸染色相比,是用1%的硫酸作为脱色剂替代3%的盐酸乙醇。抗酸染色结果与培养诺卡氏菌的培养基类型及诺卡氏菌的培养时间均有关系。当菌丝断裂后,在显微镜下可呈现球状或杆状的菌丝断裂体。故而抗酸染色的结果仅能作为辅助性诊断,而不能作为最终的诊断依据。 二、革兰氏染色

诺卡氏菌革兰氏染色阳性,镜下观察到菌体呈分枝状或串珠状的细密如丝排列,诺卡氏菌镜下形态与以色列放线菌相似,但菌丝末端不呈棍棒状膨胀,菌丝可缠绕成团,形成类似放线菌的颗粒。诺卡氏菌除了同分枝杆菌属的其他细菌一样含有结核硬脂酸(tuberculostearic acid)以外,它还含有短链(40-60个碳)的

分枝菌酸(mycolicacid)。经革兰氏染色出现特征性的分枝状或串珠状,可作为识别诺卡氏菌的依据。临床样本,涂片经革兰氏染色能观察到典型的分枝形态,周围被急性炎症细胞所包裹,这是临床标本的典型特征。三、生化鉴定

诺卡氏菌不分解腺嘌呤、次黄嘌呤、黄嘌呤、酪氨酸,不水解酪蛋白、产尿素酶,产β-内酰胺酶,枸橼酸盐、液化明胶、尿素分解实验均为阳性,不发酵葡萄糖和甘露醇,硝酸盐还原除鼻疽诺卡氏菌为阴性外,其他均为阳性。

生化鉴定的方法并不是一种可靠的方法,并非每次都得到期望的结果,对于近年来发现的特征菌群,比如新星诺卡氏菌等分类群不能进行鉴定。生化鉴定方法费时费力,并不能快速鉴定出诺卡氏菌,通常会对诊断诺卡氏菌造成延误。

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