布氏杆菌表面特异性多表位抗原的串联表达与免疫磁珠的初步建立

布氏杆菌表面特异性多表位抗原的串联表达与免疫磁珠的

初步建立

唐泰山;赵林立;廉慧峰;张常印;陈国强;姜焱;祝长青;王凯民

【期刊名称】《中国人兽共患病学报》 【年(卷),期】2013(029)010

【摘要】目的 为获得布氏杆菌表面多表位抗原的特异性抗体,用于布氏杆菌免疫磁珠的构建.方法 从布氏杆菌3个表面蛋白中分析到特异性抗原表位,人工合成其串联基因片段并插入原核表达载体,转化至E.coli BL21(DE3),获得重组质粒pET-32a(+)-CJMEA-A,IPTG诱导后表达出30 kDa的重组蛋白,亲和层析纯化后将其进行Western blot分析、间接ELISA鉴定和兔免疫试验,制备的抗血清经亲和层析纯化后,包被成免疫磁珠并用于布氏杆菌富集.结果 表达的重组蛋白能与牛抗布氏杆菌血清反应,其抗血清与布氏杆菌发生良好反应,纯化抗体包被的免疫磁珠能特异性吸附布氏杆菌.结论 获得的布氏杆菌特异性抗体和免疫磁珠具有良好的应用前景. 【总页数】7页(965-971)

【关键词】布氏杆菌;多表位抗原;串联表达;免疫磁珠

【作者】唐泰山;赵林立;廉慧峰;张常印;陈国强;姜焱;祝长青;王凯民

【作者单位】江苏出入境检验检疫局,南京210001;内蒙古出入境检验检疫局,呼和浩特 010020;山西出入境检验检疫局,太原 030024;江苏出入境检验检疫局,南京210001;江苏出入境检验检疫局,南京210001;江苏出入境检验检疫局,南京210001;江苏出入境检验检疫局,南京210001;江苏出入境检验检疫局,南京210001