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激光共聚焦显微镜操作手册最终版 - 图文 

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显微镜主体的型号为Ti,因此[Ti Pad]界面的功能是在软件中控制显微镜的硬件的转换,如物镜的切换,物镜的位置,PFS的开关,白炽灯的打开和亮度,汞灯滤光片的切换等,这些转换同样可以在显微镜主体和外部控制设备中实现。

13、图像的拍摄和保存

通过焦距调节,亮度调节,扫描区域放大或剪切操作后,得到了实验需要的图像。接下来将把图像拍摄下来保存,或进行下一步的数据分析。

(1)在Frozen状态下,点击XY按钮。

(2)得到captured图像,保存图像到目标文件夹并编写文件名,保存格式为JP2格式。

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图片扫描参数调用简介:

JP2格式图像包含了图像拍摄时的各种参数,右击图片打开[Image Properties]界面,可查看拍摄参数,包括物镜类型,激发光,激发光输出功率,接收通道,增益,补偿,扫描速度,图像分辨率,放大倍数等信息。如需调用图像拍摄参数,右击图片选择[Reuse Camera Setting],即可在主界面重置扫描参数。

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JP2格式图片转化为JPG/TIFF格式图片的操作:

JP2格式图片包含了所有接收通道的荧光图像,因此转化为JPG/TIFF格式图片时,需要对每个接收通道的图像分别进行转化。 (1) (2) (3) (4) (5)

选择需要转化的图像

点击通道标签选择需要的接收通道图像 输入[Shift+Z],出现一张截图。

保存截图至文件夹,格式选择JPG/TIFF,并填写文件名。 继续选择并转化其他接收通道图像。

各通道荧光图像自由叠加的介绍:

前文介绍了在Live/Frozen状态下用[Custom]通道标签得到可各通道自由叠加的荧光图像。现介绍可实现此功能的另一种方法:

(1)Frozen状态下,点击一通道标签,拖曳至主界面空白处,出现一张单通道荧光图像; (2)点击另一通道标签,拖曳至单通道荧光图像界面,即形成两个通道叠加的荧光图像。 (3)继续第(2)步操作即可得到需要的叠加荧光图像。[TD]通道也可参与通道叠加。

14、两种激光一种接收通道(2Ex1Em)的光路设置

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在有些实验设计中,样品加入两种荧光染料,分别受激于不同的激发光,但两种染料的发射荧光在同一个波长区域。可以通过先用一种激光扫描样品得到染料1荧光图像后,再用另一种激光扫描样品得到染料2的荧光图像的方法实现实验目的,但方法太过繁琐。我们可以利用程序中的2Ex1Em模式方便的对两种染料进行同时扫描并得到分离的荧光图像。 (1)打开[setting]界面,选择2Ex1Em模式

(2)选择发射荧光接收通道和激发光

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(3)点击Live按钮,出现扫描图像。

色彩标签页为不同激发光在同一个通道中的荧光图像,可根据需要更改荧光色彩加以区分。

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激光共聚焦显微镜操作手册最终版 - 图文 

显微镜主体的型号为Ti,因此[TiPad]界面的功能是在软件中控制显微镜的硬件的转换,如物镜的切换,物镜的位置,PFS的开关,白炽灯的打开和亮度,汞灯滤光片的切换等,这些转换同样可以在显微镜主体和外部控制设备中实现。13、图像的拍摄和保存通过焦距调节,亮度调节,扫描区域放大或剪切操作后,得到了实验需要的图
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