标准探测模式（DU4）图像拍摄流程
一、软件开启
1、 双击桌面NIS-Element图标。
2、 出现对话框后，选择[Nikon A1/C1 Confocal]，点击OK按钮。
3、 出现NIS启动窗口，软件与硬件通讯开始建立，此过程将持续5-10秒或者更长，请耐
心等待。通讯建立后，自动出现NIS-Element操作主界面。
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二、基本设置
4、鼠标右击操作主界面空白处，在[Acquisition Controls]中选择[A1 Settings]，出现激光模式设置界面（A1 setting）。
[A1 Setting]界面主要功能区域简介：
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名称 1 Acquire 功能区 功能 包含了全部功能模式的按钮，包括扫描（Live），拍摄(XY)，三维立体图像扫描(XYZ)，时间序列图像扫描(XY Time)，光活化扫描(Photo Activation)。具体操作后篇会做详细解答。 2 扫描模式选择 未连接计算机时可用，在Resonant和Galvano两种扫描模式中切换。SD和VF模式下只能采用Galvano模式。 3 光路设置功能区 (Filter and Dye) 选择激发光波长，色彩，选择二向色镜，选择接收通道等。 4 调节/光激发功能区 (Acquisition/ Photo Activation) 调节视窗可用于调整PMT亮度（HV）,激光输出功率（Laser）和针孔（pinhole）大小等。 光活化界面用于设置光活化所用的激光种类，输出功率，扫描速度等。 5 扫描设置功能区 (Scan Setting) 用于设置扫描方向，图像分辨率，扫描速度等 6 前台图标 当用外部设备（remote controller）调节扫描参数时，图标出现的通道为当前调节通道。 5、根据实验情况设置光路，点击[Filter and Dye]功能区中的 [Setting]按钮，打开详细的光路设置界面（Setting）。
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[Setting]界面功能简介：
名称 1 选择探测模式 功能 DU4---标准探测模式，可获得4个通道+TD通道的图像 SD-----光谱探测模式，可获得最多32个通道+TD通道的图像 VF-----虚拟探测模式，可获得4个通道+TD通道的图像。 2 自动/人工模式 人工模式：可根据实验要求改变或选择参数设置。 自动模式：只需选择荧光探针，系统会自动设定合适的滤光片和激发波长，同时也会自动进行显微镜设置。 3 4 5 6 激光指示 显示当前在用的激发光种类。 透射激光探测器 如需要激光明场图像，点击接入按钮；不需要时点击移出按钮。 接收通道选定 通道色彩选定 选择所需要的接收通道 展示该通道接收的发射波长的色彩，单击色彩按钮可改变颜色 4
7 荧光染料选择框 根据实验所用染料不同选择合适的染料名称，此名称会显现在Live视窗的通道标签上。 自动模式：在选择框选择所用荧光染料名称（软件数据库自带）； 人工模式：手填所用荧光染料名称。 8 激发光选择框 人工模式下可用 接收通道可选择任意激发光，以适应特殊荧光染料的拍摄要求。首先根据荧光染料的发射波长选择通道，然后根据激发波长选择激发光。 9 Rainbow图表 400-750nm光谱色彩展示，包含以下信息： 荧光染料的发射光谱 荧光染料的激发光 10 二向色镜选择框 人工模式下可用。根据选择的接收通道，选择相应的二向色镜。405/488/543/640是最保险的选择，任何情况下适用。S20/80表示允许20%的激光反射，通常用于无发射荧光的金颗粒的探测。 11 12 滤块的设置 滤光模块的变化和编辑图标 滤块展示和选择 人工模式下可用，可以不考虑激发光设置滤块，以满足特殊的实验需要。 13 14 15 OK Cancle 2Ex1Em 保存光路设置，并回到主界面 取消之前所作操作，并回到主界面。 见下文。 5
激光共聚焦显微镜操作手册最终版 - 图文
